大黃素抑制體外淋巴細胞增殖的作用研究

《大黃素抑制體外淋巴細胞增殖的作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。

1、大黃素抑制體外淋巴細胞增殖的作用研究【關鍵詞】淋巴細胞；細胞增殖；大黃素；免疫耐受　　Inhibitoryeffectsofemodinonproliferationofhumanlymphocytesinvitro　　【Abstract】AIM:Toevaluatetheinhibitoryeffectsofemodinonproliferationofhumanlymphocytesinvitroandtoexploreitspossiblemechanism.METHODS:Humanperipheralbloodl

2、ymphocytesisolatedfromhealthydonorswereculturedwithphytohemagglutinin(PHA),interleukin2(IL2)ormixedleukocyteculture(MLC),respectively.Interferedbydifferentagents,emodinandCsA,theproliferationofhumanlymphocyteswasobservedbyMTT.RESULTS:Intherangeofconcentrationsfrom

3、3×10-6mol/Lto3×10-5mol/L,emodincouldsuppresstheproliferationoflymphocytesinducedbyPHA,IL2orMLCobviously,andshowedapositiveconcentrationdependentinhibitoryeffect.AndalsoemodinhadasynergisticeffectwithCsAinimmunosuppressivebehavior.CONCLUSION:Emodinexertsitsimmunosu

4、ppressiveeffectsthroughinhibitingtheproliferationoflymphocytesinvitro.6　　【Keywords】lymphocytes;cellproliferation;emodin;immunetolerance　　【摘要】目的：研究大黃素的體外免疫抑制作用，探討其可能的作用機制.方法：通過PHA，IL2及MLC活化淋巴細胞，給予大黃素和CsA干預，采用MTT法觀察比較大黃素和CsA對淋巴細胞活化的抑制作用.結果：在3×10-6～3×10-5mol/L的濃度范圍內(nèi)，

5、大黃素對PHA，IL2及MLC引起的淋巴細胞活化表現(xiàn)出明顯的抑制作用，其作用隨濃度增加而增強，并與CsA具有協(xié)同性.結論：大黃素在體外通過抑制淋巴細胞增殖來發(fā)揮其免疫抑制作用.　　【關鍵詞】淋巴細胞；細胞增殖；大黃素；免疫耐受　　0引言　　大黃素（emodin）屬蒽醌類，是蓼科植物提取的主要成分.具有抗腫瘤、抗炎抑菌及保護肝腎等作用［1-3］.我們觀察emodin對離體淋巴細胞活化的影響，并與環(huán)孢素A（CsA）比較，研究兩者的協(xié)同性，以探討emodin在移植免疫抑制中的作用.　　1材料和方法6　　1.1材料emodin（標

6、準品）由陜西省藥品檢驗所提供；CsA由Novartis公司提供；淋巴細胞分離液、四甲基偶氮唑鹽（MTT），重組人IL2均購自晶美公司；新生牛血清由杭州四季青生物工程研究所提供；RPMI1640，植物血凝素（PHA）分別購自Gibco公司和上海市醫(yī)學化驗所.　　1.2方法實驗分為正常對照組、CsA組（1mg/L），emodin大（3×10-5mol/L），中（1×10-5mol/L），小劑量組（3×10-6mol/L），CsA與emodin聯(lián)用組（1mg/LCsA＋1×10-5mol/Lemodin）.外周血淋巴細胞（PBM

7、C）取自健康成年人靜脈血，細胞密度為1×109/L，按200μL/孔培養(yǎng)于96孔培養(yǎng)板中，每組設6個復孔，同時設2個復孔對照（不加細胞，其他同實驗孔），置入37℃CO2的孵育箱中培養(yǎng).①PHA與IL2刺激組：分別將PHA溶液按1∶50的比例、IL2貯存液按1∶40的比例加入淋巴細胞懸液中，分組給藥后培養(yǎng).②MLC組：采用雙向混合淋巴細胞培養(yǎng)，取兩位健康成年人無菌外周靜脈血，分別制備外周血淋巴細胞（方法同前）.將供者、受者淋巴細胞每孔分別加入各100μL，分組給藥后培養(yǎng).培養(yǎng)24,48,72h后用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法于

8、酶聯(lián)免疫分析儀上檢測各孔的吸光度（A）值.淋巴細胞增殖抑制率（%）=［1－（實驗孔A值－本組對照孔A值）/（空白組A值－空白組對照孔A值）］×100%.　　統(tǒng)計學處理：數(shù)據(jù)均用x±6s表示，各組淋巴細胞增殖抑制率比較用重復測量設計的方差分析（SPSS10.0軟件包）.P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義