寧夏地區(qū)牛腦組織博爾納病病毒的感染狀況

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1、寧夏地區(qū)牛腦組織博爾納病病毒的感染狀況【摘要】  目的分析寧夏地區(qū)牛腦組織博爾納病病毒(Bornadiseasevirus,BDV)的感染狀況,探討陽性基因擴增片段與德國馬源性標準病毒株He/80同源性。方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)、熒光定量巢式逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(FQ-nRT-PCR)分別檢測寧夏地區(qū)145例健康牛腦組織中BDVp40、BDVp24基因片段,對BDVp24陽性擴增產(chǎn)物進行基因序列測定,并應用BLAST和DNAsist5.0軟件對測序結果進行分析。結果145例牛腦組織中4例BDVp40、BDVp24均陽性,陽性率為2.759%,且陽性

2、BDVp24片段的核苷酸序列與He/80同源性最高,所編碼氨基酸序列相同。結論寧夏地區(qū)牛腦組織中可能存在動物源性BDV的自然感染,陽性BDVp24核苷酸序列與He/80具有高度同源性,所編碼的氨基酸序列相同?!娟P鍵詞】博爾納病病毒;熒光定量巢式逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應;牛腦組織  InvestigationofBDVNaturalInfectioninBovineBrainTissuesinNingxia   (DepartmentofNeurology,theAffiliatedHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan75

3、0004)12  Abstract:ObjectiveToinvestigatethenaturalinfectionofBDVinbovinebraintissueinNingxia,andtoexplorehomologybetweengeneamplificationfragmentsinpositiveproductsandtheGermanhorse-bornestandardstrainHe/80.MethodsBDVp40andBDVp24genefragmentsweredetectedbyRevorseTranscriptasePolymerase

4、ChainReactionandfluorescentquantitativenestedreversetranscriptase-polymerasechainreaction(FQ-nRT-PCR)in145casesofhealthycattlebraintissueinNingxia.GenesequencingwasDeterminedinthepositivePCRproductsandthesequencewasanalyzedusingBLASTandDNAsist5.0software.ResultsTherewere4positivecasesi

5、n145bovinebraintissuesamplesandthepositiveratewas2.759%.TheanalysisofgenesequenceshowedBDVp24inbovinebraintissuefromNingxiawashomophylicwithstrainHe/80,andtheiraminoacidsequenceremainedthesame.ConclusionBDVinfectionmayexistinNingxiabovinebraintissue.BDVp24-positiveandStrainHe/80nucleot

6、idesequencearehighlyhomologous.  Keywords:bornadiseasevirus;fluorescentquantitativenestedreversetranscriptase-polymerasechainreaction;bovinebraintissue12  博爾納病病毒(Bornadiseasevirus,BDV)是非分節(jié)段、單負鏈RNA病毒,具有非細胞溶解性、強嗜神經(jīng)性特點,能感染從鳥到靈長類的廣泛動物種類并引起以中樞系統(tǒng)功能障礙為特征的臨床表現(xiàn)[1]。研究表明,在我國黑龍江、新疆、重慶、寧夏等地存在BDV的自然

7、感染[2-4]。本課題組前期研究證實在寧夏地區(qū)牛、羊外周血單核細胞(PBMCs)及病毒性腦炎病人外周血單核細胞和腦脊液中存在BDV的自然感染,與德國馬源性標準病毒株He/80序列比對,具有高度同源性[5-6]。BDV侵入機體首先進入血液或侵入嗅覺上皮或某些神經(jīng)末梢,繼而通過血液系統(tǒng)或神經(jīng)軸突物質(zhì)轉(zhuǎn)運進入神經(jīng)系統(tǒng),造成行為異常、腦實質(zhì)和腦膜的炎性細胞浸潤,疾病特異性的抗原在邊緣系統(tǒng)神經(jīng)元中積聚,引起致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害[7]。BDV感染時外周血PBMCs檢測的陽性率與腦組織的陽性率是否一致呢?故本實驗對寧夏健康成年牛腦組織BDVp40、BDVp24兩個高度保守序

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