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《兔腎vx2移植瘤模型的建立及其超聲顯像檢測》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、兔腎VX2移植瘤模型的建立及其超聲顯像檢測作者:王子明,佘軍軍,程偉,李小鵬,李謙,車向明,韓水平,白卓亞【關(guān)鍵詞】超聲技術(shù)摘要:目的比較建立兔腎VX2移植瘤模型的不同方法的優(yōu)劣。方法分別用瘤液穿刺法、瘤塊液種植法、瘤塊包埋法建立兔腎VX2癌模型。采用超聲技術(shù)動態(tài)檢測腫瘤體積及CDFI的變化,確定該模型最佳實驗干預(yù)時段及其血流參數(shù)范圍。比較各自的成瘤率;觀測腎臟腫瘤的大小及其回聲、瘤內(nèi)血管生成以及血流阻抗等指標(biāo)。結(jié)果瘤塊包埋法可建立穩(wěn)定的兔腎VX2移植瘤模型。B超可以實時、準(zhǔn)確、方便的監(jiān)測腫瘤體積及血流動力學(xué)變化。結(jié)論兔腎VX2移植瘤是一種造模方法簡便且成瘤率高的腎癌動物模型,采用超聲技術(shù)能精
2、確、無創(chuàng)的動態(tài)監(jiān)測腫瘤體積變化及血流特征?! £P(guān)鍵詞:兔;VX2腎癌;超聲技術(shù) EstablishingrabbitVX2carcinomamodelandmonitoringit withcolorDopplerenergyultrasoundtechnique10 ABSTRACT:ObjectiveTocomparetheadvantagesanddisadvantagesofseveralmethodstoestablishtherabbitVX2carcinomamodel.MethodsUltrasoundtechniquewasusedtoconfirmthebestperi
3、odsofexperimentontherabbitVX2carcinomamode.TherabbitVX2carcinomamodelwasestablishedbydifferentways,suchastumorcellsfluidsandtumorblocktransplantingguidedbyBultrasound,tumorblocktransplantingbyoperationtocomparetheirsuccessfulrate.Kidneysizeandotherindexswereobserved.ResultsTumorblocktransplantingbyo
4、perationwasthemostsuccessfultoestablishasteadymodel.ConclusionTherabbitVX2carcinomaisoneofthebiggestanimalmodelsforkidneycarcinomasexperimentalresearch;itissteadyandeasytobemanipulated. KEYWORDS:rabbit;VX2kindeycarcinoma;Bultrasound 小鼠移植瘤模型常被用于腎癌的實驗研究,但動物體型小、抗干預(yù)能力差,腫瘤原發(fā)部位不在腎臟并且成瘤率低,因而其應(yīng)用受到限制。VX2腫瘤
5、是由Shope病毒誘發(fā)的兔可移植性腫瘤,可接種到不同器官而成兔移植瘤模型。我們旨在尋找建立兔腎VX2移植瘤模型的最佳方法,用B超追蹤腫瘤生長特征,確定最佳實驗干預(yù)時段,為評價腎癌的基礎(chǔ)研究及治療療效提供依據(jù)。10 1材料與方法 1.1實驗材料新西蘭大白兔45只,體質(zhì)量2.0-2.5kg,雌雄不限,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。VX2瘤株由第四軍醫(yī)大學(xué)提供。B超檢查用美國Acuson512型彩色多普勒超聲診斷儀。日本HitachiH600型電子透射顯微鏡?! ?.2VX2瘤細(xì)胞的復(fù)蘇與培養(yǎng)按照一般細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對冰凍VX2瘤細(xì)胞懸液進(jìn)行復(fù)蘇后離心5min(800r/min),除去上清液
6、,加入PBS液用玻璃棒攪勻。取懸液置于RPMI1640培養(yǎng)液中,臺盼藍(lán)染色并做死、活細(xì)胞計數(shù),將培養(yǎng)液調(diào)制成107/mL活細(xì)胞濃度?! ?.3動物模型建立將45只兔隨機(jī)分為A、B、C10三組,每組各15只。A組采用瘤細(xì)胞懸液接種法。兔清醒狀態(tài)下B超引導(dǎo)穿刺右腎下級并注入瘤細(xì)胞液1mL。B組采用瘤塊液穿刺種植法。先將上述瘤細(xì)胞液2mL分別注入兔雙側(cè)后腿皮下即成為荷瘤種兔,兩周后腫瘤形成直徑約2cm大小時完整切取,去除包膜及壞死組織,剪取腫瘤邊緣生長旺盛部分置于Hanks液中。盡量剪碎約1mm,制成瘤細(xì)胞懸液。兔麻醉狀態(tài)下B超引導(dǎo)16G穿刺針進(jìn)入右腎下級,注入瘤細(xì)胞懸液0.3mL。C組采用瘤塊包埋
7、法。兔麻醉后俯臥位固定,取右12肋緣下切口3-4cm,暴露右腎下級后用眼科鑷穿刺1.5cm深隧洞。在冰塊上將前述荷瘤組織剪為直徑0.2-0.3cm的小塊后植入。明膠海綿壓迫止血,生物膠填塞。各組操作均于1.5h內(nèi)完成。實驗動物肌注青霉素40萬單位,連續(xù)3d。實驗期內(nèi)無1例兔感染或死亡?! ?.4腫瘤的超聲檢查用AcusonSequoia512型超聲儀,15L8W寬頻線陣探頭(頻率為8.0-13.0