兔腎vx2移植瘤模型的建立及其超聲顯像檢測(cè)

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1、兔腎VX2移植瘤模型的建立及其超聲顯像檢測(cè)作者:王子明,佘軍軍,程偉,李小鵬,李謙,車向明,韓水平,白卓亞【關(guān)鍵詞】超聲技術(shù)摘要:目的比較建立兔腎VX2移植瘤模型的不同方法的優(yōu)劣。方法分別用瘤液穿刺法、瘤塊液種植法、瘤塊包埋法建立兔腎VX2癌模型。采用超聲技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測(cè)腫瘤體積及CDFI的變化,確定該模型最佳實(shí)驗(yàn)干預(yù)時(shí)段及其血流參數(shù)范圍。比較各自的成瘤率;觀測(cè)腎臟腫瘤的大小及其回聲、瘤內(nèi)血管生成以及血流阻抗等指標(biāo)。結(jié)果瘤塊包埋法可建立穩(wěn)定的兔腎VX2移植瘤模型。B超可以實(shí)時(shí)、準(zhǔn)確、方便的監(jiān)測(cè)腫瘤體積及血流動(dòng)力學(xué)變化。結(jié)論兔腎VX2移植瘤是一種造模方法簡(jiǎn)便且成瘤率高的腎癌動(dòng)物模型

2、,采用超聲技術(shù)能精確、無創(chuàng)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腫瘤體積變化及血流特征?! £P(guān)鍵詞:兔;VX2腎癌;超聲技術(shù)  EstablishingrabbitVX2carcinomamodelandmonitoringit ethodstoestablishtherabbitVX2carcinomamodel.MethodsUltrasoundtechniquethebestperiodsofexperimentontherabbitVX2carcinomamode.TherabbitVX2carcinomamodelorcellsfluidsandtumorblocktransplantingg

3、uidedbyBultrasound,tumorblocktransplantingbyoperationtoparethEirsuccessfulrate.Kidneysizeandotherindexsorblocktransplantingbyoperationostsuccessfultoestablishasteadymodel.ConclusionTherabbitVX2carcinomaisoneofthebiggestanimalmodelsforkidneycarcinomasexperimentalresearch;itissteadyandeasytob

4、emanipulated.  KEYI1640培養(yǎng)液中,臺(tái)盼藍(lán)染色并做死、活細(xì)胞計(jì)數(shù),將培養(yǎng)液調(diào)制成107/mL活細(xì)胞濃度?! ?.3動(dòng)物模型建立將45只兔隨機(jī)分為A、B、C三組,每組各15只。A組采用瘤細(xì)胞懸液接種法。兔清醒狀態(tài)下B超引導(dǎo)穿刺右腎下級(jí)并注入瘤細(xì)胞液1mL。B組采用瘤塊液穿刺種植法。先將上述瘤細(xì)胞液2mL分別注入兔雙側(cè)后腿皮下即成為荷瘤種兔,兩周后腫瘤形成直徑約2cm大小時(shí)完整切取,去除包膜及壞死組織,剪取腫瘤邊緣生長(zhǎng)旺盛部分置于Hanks液中。盡量剪碎約1mm,制成瘤細(xì)胞懸液。兔麻醉狀態(tài)下B超引導(dǎo)16G穿刺針進(jìn)入右腎下級(jí),注入瘤細(xì)胞懸液0.3mL。C組采用瘤

5、塊包埋法。兔麻醉后俯臥位固定,取右12肋緣下切口3-4cm,暴露右腎下級(jí)后用眼科鑷穿刺1.5cm深隧洞。在冰塊上將前述荷瘤組織剪為直徑0.2-0.3cm的小塊后植入。明膠海綿壓迫止血,生物膠填塞。各組操作均于1.5h內(nèi)完成。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肌注青霉素40萬單位,連續(xù)3d。實(shí)驗(yàn)期內(nèi)無1例兔感染或死亡?! ?.4腫瘤的超聲檢查用AcusonSequoia512型超聲儀,15L8Hz),分別于腫瘤種植后7、9、11、13、15、17、19、21、23、25d對(duì)實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行多切面掃查,由兩名高年資超聲醫(yī)師同時(shí)操作。觀察腎臟及腎內(nèi)腫瘤的大小、形態(tài)、回聲特點(diǎn),用所測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算腫瘤體積(V=0.5a×

6、b2,a和b分別是腫瘤最大直徑和與其垂直的最小橫徑)和腫瘤生長(zhǎng)率(tumorgroenofrabbitrenalVX2carcinomamodel  圖2兔腎VX2癌腫瘤細(xì)胞(略)  Fig.2CellsofrabbitrenalVX2carcinomamodel(HE×400)  2.2腫瘤生長(zhǎng)特征變化三組實(shí)驗(yàn)兔不同時(shí)間腫瘤體積及其環(huán)比增長(zhǎng)速度見表1。瘤塊包埋組(C組)全部成瘤并且生長(zhǎng)穩(wěn)定,腫瘤形態(tài)規(guī)則,在植瘤后11-21d,各監(jiān)測(cè)時(shí)間體積增長(zhǎng)無顯著性差異(P>0.05)。病檢發(fā)現(xiàn)當(dāng)腫瘤體積增至15-20cm3時(shí),腫瘤中央出現(xiàn)液化壞死,周圍局部浸潤(rùn)及肝、肺、腎門淋巴結(jié)

7、廣泛轉(zhuǎn)移。所以實(shí)驗(yàn)干預(yù)適宜于植瘤后2-3周內(nèi)進(jìn)行。  2.3超聲檢測(cè)腫瘤的體積變化各組實(shí)驗(yàn)兔均于B超檢查后即刻處死1只,并實(shí)際測(cè)量腫瘤大小后計(jì)算體積。B超測(cè)量體積與腫瘤實(shí)測(cè)體積(表2)經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)無顯著性差異(P>0.05)。表明B超可以方便、快速、無創(chuàng)、準(zhǔn)確的應(yīng)用于腫瘤動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),篩檢合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物  2.4瘤體內(nèi)部及癌周CDFI血流信號(hào)的檢測(cè)不同體積兔腎VX2癌瘤體內(nèi)血流動(dòng)力學(xué)變化見表3。根據(jù)CDFI將瘤體及其周邊血流分為星點(diǎn)狀、短條狀、樹枝狀、環(huán)狀四種[2]。兔腎VX2癌為富血供腫瘤,癌灶周邊

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