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1、地丁草對實(shí)驗(yàn)性小鼠急性肝損傷保護(hù)作用作者:韓在剛袁紅艷郭偉康王芳張曉玲李鎬呂惠子【摘要】 目的探討地丁草水提取物對四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法60只小鼠隨機(jī)分為正常組,模型組,地丁草水提取物高劑量組、中劑量組、低劑量組,陽性對照組。地丁草水提取物高、中、低劑量組分別按2.0,1.0,0.5g/kg灌胃地丁草水提取物;陽性對照組按0.1g/kg水飛薊賓灌胃;正常組和模型組給予等體積生理鹽水,共5d。第5天給藥1h后,模型組,地丁草水提取物高、中、低劑量組和陽性對照組按0.15ml/10g腹腔注射0.1%CCl4,正常
2、對照組腹腔注射等體積生理鹽水。測定小鼠血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性和肝組織超氧化歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果地丁草水提取物能顯著降低CCl4所致小鼠血清ALT(P<0.01)和AST活性(P<0.05),升高肝組織SOD活性(P<0.01),降低肝組織MDA的含量(P<0.01)。結(jié)論地丁草水提取物對CCl4所致小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。【關(guān)鍵詞】地丁草急性肝損傷保護(hù)作用地丁草Corydalisbungeana6Turcz.為罌粟科一年生草本植物,為中藥
3、苦地丁的基源植物,其別名多,因地域不同而不同,有紫花地丁(北京)、苦丁小雞菜、苦丁茶、地丁紫堇、扁豆根(遼寧、河北)等。本品具有清熱解毒、活血消腫的作用,對感冒發(fā)熱、肝炎等多種炎癥有較好療效[1]。本實(shí)驗(yàn)探討了地丁草水提物對四氯化碳引起小鼠肝損傷的影響?! ?材料與儀器 1.1藥品與試劑藥材采于吉林省延吉市,由延邊大學(xué)藥學(xué)院劉永鎮(zhèn)教授鑒定為地丁草CorydalisbungeanaTurcz,標(biāo)本存放于延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)標(biāo)本室;水飛薊賓:西安天一生物技術(shù)有限公司。AST,ALT,MDA,SOD試劑盒:南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。
4、 1.2儀器紫外分光光度計(jì)(上海棱光技術(shù)有限公司,S22PC),全自動離心機(jī)(SIGMA公司產(chǎn)品,5308型),全自動生物化學(xué)分析儀(日本Arkray公司,SP4430)等?! ?.3動物昆明種雄性小鼠,體重18~20g,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部動物實(shí)驗(yàn)中心提供?! ?方法 2.1地丁草水提物的制備用水煎煮提取3次,合并濾液,干燥得浸膏,備用。6 2.2動物模型的制備與藥物處理昆明種小鼠60只,隨機(jī)分為6組,每組10只:分別為正常對照組,模型組,地丁草高劑量組(2.0g/kg)、中劑量組(1.0g/kg)、低劑量組(0.5g/kg)
5、,陽性對照組(水飛薊賓)。給藥組灌胃1次/d,正常對照組和模型組給予等體積(0.50ml)生理鹽水,連續(xù)5d,第5天給藥1h后,除正常對照組外,其余均腹腔注射0.1%CCl40.015ml·g-1,禁食20h,眼球取血,離心取血清;同時(shí)剖腹取肝,分別稱重取0.1g,加入1.8ml生理鹽水進(jìn)行勻漿?! ?.3生化指標(biāo)檢測 按試劑盒的檢測方法測定“2.2”項(xiàng)血清中的ALT和AST活性,肝組織中MDA含量和SOD活性?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以表示,各組樣本均數(shù)間差別的假設(shè)檢驗(yàn)用方差分析(ANOVA),P<0.05認(rèn)為
6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3結(jié)果 3.1地丁草水提物對CCl4所致肝損傷小鼠血清ALT和AST活性的影響模型組ALT,AST活性較正常組明顯升高,具有顯著性差異(P<60.001),表明CCl4引起小鼠肝損傷模型成功。地丁草高、中劑量組與模型組比較ALT活性顯著降低(P<0.01),AST檢測結(jié)果也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1。表1地丁草水提取物對CCl4(略)與模型組比較,***P<0.001,**P<0.01,*P<0.05;n=10 3.2地丁草水提取物對CCl4引起肝損傷小鼠肝組
7、織SOD活性及MDA含量的影響模型組肝組織SOD活性及MDA含量與正常組相比有顯著性差異,地丁草高、中、低劑量組均能與顯著升高SOD活性(P<0.01),同時(shí)明顯降低給藥組小鼠肝組織MDA的含量(P<0.01)。結(jié)果見表2。表2地丁草水提取物對CCl4所致肝損傷小鼠肝組織SOD活性和MDA含量的影響(略)與模型組比較,***P<0.001,**P<0.01,*P<0.05;n=10 4討論四氯化碳引起肝損傷是傳統(tǒng)的肝毒模型,它對肝損傷的毒性作用是通過脂質(zhì)過氧化作用進(jìn)行[2]。存在于肝細(xì)胞質(zhì)中的可溶性
8、酶ALT,AST在肝細(xì)胞損傷后釋放入血,血清中兩者水平高低可以反應(yīng)肝細(xì)胞損傷程度,可作為早期肝損傷的指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果地丁草高、中兩個(gè)劑量顯著降低CCl4所致小鼠急性肝損傷血清ALT和AST的升高(P<0.01,P<0.05),表明地丁草