體外鎂合金與小鼠成骨細胞聯合培養(yǎng)觀察

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1、體外鎂合金與小鼠成骨細胞聯合培養(yǎng)觀察【摘要】觀察鎂合金與小鼠成骨細胞體外聯合培養(yǎng)后，小鼠成骨細胞的活力、組織形態(tài)變化及生長擴增情況。由此驗證鎂合金與成骨細胞的生物相容性和骨傳導特性，探討鎂合金成為一種新型骨科內置物材料的可行性。［方法］將小鼠成骨細胞體外擴增培養(yǎng)，并應用鈣鈷法及VonKossa法檢測堿性磷酸酶加以驗證。傳代后將成骨細胞與鎂合金金屬片體外復合培養(yǎng)，細胞密度為3×104/ml。培養(yǎng)24、48、72h后，分別進行掃描電鏡（SEM）、共聚焦顯微鏡觀察細胞形態(tài)學變化及生長情況。［結果］小鼠成骨細胞體外培養(yǎng)后大量擴增，

2、細胞特性穩(wěn)定。與鎂合金復合培養(yǎng)后，細胞保持良好的活性和分裂增殖能力。SEM觀察：細胞粘附明顯，增殖分化良好；共聚焦顯微鏡觀察：隨時間段的延長，細胞形態(tài)完整，輪廓清晰，增殖明顯。［結論］鎂合金與小鼠成骨細胞具有良好的生物相容性，鎂合金對成骨細胞具有良好的骨傳導特性。因此，鎂合金成為一種新型的骨科內置物材料具有較強的可行性?！娟P鍵詞】鎂合金成骨細胞生物相容性Abstract：［Objective］Toobservemouseosteoblastsvitality,histomorphologyandgrowingdevelop

3、mentinvitroco-culturecombinedwithmagnesiumalloys,confirmthebiocompatibilityofmagnesiumalloysandosteoblasts,andtry10tofindoutthepossibilityofmagnesiumalloystobeanewtypeofbonesurgeryimplantmaterial.［Method］MouseosteoblastswerecheckedbyGomoriandVonkossastained,cultur

4、edanddevelopedinvitro.Thentheosteoblastsweremixedwithmagnesiumalloysinacelldensityof3×104/ml.After24、48、72hourscoculture,thesurfaceofmagnesiumalloyswereobservedbyscanningelectronmicroscopy(SEM)andconfocalmicroscopytofindthechangeofosteoblasts.［Result］Afterculture

5、invitro,theosteoblastswelldeveloped,andexpressedstablecharacter.Aftercoculturewithmagnesiumalloys,thecellsadheredandproliferatedonthesurfaceofalloysverywellfromSEMandconfocalmicroscopyobservation,whichshowedtheosteoblastshadgreatactivityandreproducecapability.［Co

6、nclusion］Magnesiumalloysshowedgoodbiocompatibilityandboneconductioncapabilitywithmouseosteoblasts,sothemagnesiumalloyisverypossibletobeanewtypeofbonesurgeryimplantmaterial.Keywords：magnesiumalloy;osteoblast;biocompatibility10鎂合金作為一種可降解金屬材料，近年來成為新型的骨科內置物領域的研究熱點。本研究

7、用小鼠成骨細胞與鎂合金體外聯合培養(yǎng)的方法，并與生物相容性好、可降解的多聚乳酸（PLA）作比較，初步評價其生物相容性及骨誘導性，從而為進一步動物體內實驗做準備。1材料與方法1.1材料準備1.1.1鎂合金金屬片鎂合金由鎂（98%）、錳（1%）、鋅（1%）組成，制成直徑8mm，厚度1mm的圓形薄片。中國科學院金屬研究所提供。高溫高壓消毒后備用。PLA膜片PLA膜片：分子質量19kd，孔徑＜5μm,制成直徑8mm,厚度200μm的圓形薄片。武漢工業(yè)大學生物材料研究所提供。紫外消毒后備用。小鼠成骨細胞的制備1.2.1細胞營養(yǎng)液配制培

8、養(yǎng)液使用DMEM低糖培養(yǎng)基（Gibco）加入20%滅活胎牛血清（杭州四季青），青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml；細胞消化液用胰蛋白酶（1∶250，Sigma）溶解于d-hank’10s液，過濾滅菌。1.2.2小鼠成骨細胞培養(yǎng)及檢驗　　小鼠成骨細胞購自上海麥莎生物科技有限公司的MC3T3-E1小