不同分子量殼寡糖對高脂糖尿病大鼠的果糖胺和血脂的影響

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1、不同分子量殼寡糖對高脂糖尿病大鼠的果糖胺和血脂的影響林強(qiáng)1*，王鑫1，2，葛喜珍1，桑帥1，高偉1（1．北京聯(lián)合大學(xué)生物化學(xué)工程學(xué)院，北京100023；2．北京化工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京100029）摘要目的：探討不同分子量殼寡糖對糖尿病大鼠的作用機(jī)制。方法：Wistar大鼠采用高脂高糖飲食同時腹腔注射鏈脲佐菌素復(fù)制糖尿病大鼠模型。將動物隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性對照和藥物治療組。給藥兩周后進(jìn)行糖耐量試驗(yàn)。四周后處死大鼠取血清測定血糖、果糖胺和血脂各項(xiàng)指標(biāo)。結(jié)果：與正常組比較，模型組血糖、果糖胺水平明顯升高（P<0.01），血脂各項(xiàng)指標(biāo)明顯變化（P

2、<0.01）。與模型組比較，治療組各項(xiàng)指標(biāo)有明顯改善(P<0.05,P<0.01)，且這種作用具有劑量和分子量依賴性。結(jié)論：本模型大鼠血糖升高，并引起脂代謝紊亂，分子量1700的殼寡糖、大鼠日用劑量為140mg.kg-1適合高脂糖尿病患者，可降低血糖、調(diào)節(jié)血脂，起到保健作用。關(guān)鍵詞殼寡糖；糖尿??；血糖；血脂；果糖胺中圖分類號:R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:糖尿病(diabetesmellitus，DM)病情嚴(yán)重或應(yīng)激時可發(fā)生多種急性代謝性紊亂,研究和開發(fā)防治糖尿病及其并發(fā)癥的藥物越來越受到人們的重視。殼聚糖(chitosan)是以蝦、蟹、昆蟲的外殼或真菌

3、類藻類等細(xì)胞壁提取的甲殼素經(jīng)脫乙?；磻?yīng)而得到的一種純天然多糖類有機(jī)聚合物，是自然界中存在的唯一豐富的堿性多糖。研究發(fā)現(xiàn)，殼聚糖可降低膽固醇，具有抗腫瘤活性、免疫調(diào)節(jié)作用和調(diào)理腸胃的功能[1]。殼寡糖(chitooligosaccharides,COS)是殼聚糖的降解產(chǎn)物，分子量小，溶于水，可被人體、動物及植物機(jī)體吸收利用，它不僅具有和殼聚糖相似的性質(zhì)，而且一些生理活性或功能性質(zhì)更加顯著，如提高機(jī)體免疫力、抗腫瘤作用、調(diào)節(jié)血脂、作為促進(jìn)雙歧桿菌生長因子等，其降血糖作用國內(nèi)外有相關(guān)報(bào)道[2]。但殼寡糖平均相對分子質(zhì)量(Mr)在2000～10000之間，不同分子量

4、和用藥劑量的藥理作用報(bào)道不一[3]。本研究擬探討不同分子量殼寡糖的降糖作用機(jī)制，為殼寡糖開發(fā)成糖尿病易感人群或患者的保健食品或藥品提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料1.1實(shí)驗(yàn)動物兩月齡wistar清潔級雄性大鼠70只，體重150-200g，由軍事科學(xué)動物中心提供。許可證號：SCXK-（軍）2002-001。1.2實(shí)驗(yàn)儀器TGL-16C低速離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；ThermoMK3型酶標(biāo)儀：熱電（上海）儀器有限公司；scoutⅡ半自動生化儀：德國scout公司；優(yōu)越型血糖測試儀：德國羅氏公司；JA2003精密電子天平稱：上海恒平科學(xué)儀器有限公司；HW.SY11-KD2C電

5、熱恒溫水浴鍋：北京長風(fēng)儀器儀表公司?；痦?xiàng)目：北京市教育委員會科技成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目（注：無課題號）。作者簡介：林強(qiáng)（1964年4月-），男，博士研究生，研究方向?yàn)樘烊凰幬锘瘜W(xué)。*通訊作者：林強(qiáng)，E-mail：linqiang@buu.com.cntel：010-67373086,13910232705通信地址：北京朝陽區(qū)垡頭西里三區(qū)18號北京聯(lián)合大學(xué)生化學(xué)院制藥工程研究所林強(qiáng)收郵編：10002361.3藥物與試劑鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）：sigma公司，臨用前以pH4.2的檸檬酸鈉緩沖溶液溶解。膽固醇、膽酸鈉：北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公

6、司。分子量1700和3000殼寡糖：由本實(shí)驗(yàn)室自制。拜唐蘋：中國北京拜耳醫(yī)藥保健有限公司。葡萄糖（Glu）、甘油三酯（TG）、高度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、總膽固醇（TC）試劑盒：中生北控生物科技股份有限公司。果糖胺（FMN）、游離脂肪酸（FFA）試劑盒：南京建成生物工程研究所。2方法2.1糖尿病大鼠模型的制備兩月齡wistar清潔級雄性大鼠70只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。隨機(jī)選取10只為正常對照組，灌胃0.9%生理鹽水，其余60只灌胃高脂乳劑飼料10ml.kg-1。四周后除正常組外，各組均腹腔注射STZ40mg.kg。3天后尾靜脈取血測血糖，取空腹血糖大于7.8m

7、mol.L-1的大鼠入選糖尿病模型。高脂乳劑配方：200g豬油加熱溶化，加入100g膽固醇，待溶化后加入20g膽酸鈉，300g蔗糖，充分?jǐn)噭蚝蠹尤?00ml吐溫80，200ml丙二醇及適量蒸餾水，攪拌，待溶解后冷卻至室溫再加適量蒸餾水至1500ml并充分混勻，4℃封存，用時37℃水浴加熱溶化。2.2分組處理65只大鼠除正常組10只，其余大鼠隨機(jī)分為5組：模型組、拜唐蘋陽性對照組，1700殼寡糖高劑量組，1700殼寡糖低劑量組，3000殼寡糖組；正常對照組、模型對照組：按體重每日生理鹽水灌胃(10ml.kg-1)；拜唐蘋陽性對照組：按13.5mg.kg-1.d-

8、1的劑量灌胃；1700殼寡糖組：分別按