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1、板栗殼斗總酚對(duì)高脂糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影響陳思玉劉玉軍*（北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京100083）[摘要]目的：觀察板栗殼斗總酚對(duì)II型糖尿病伴高血脂模型大鼠血糖與血脂水平的影響。方法：通過腹腔注射鏈脲佐菌素，配合高脂飼料誘導(dǎo)建立糖尿病脂代謝紊亂大鼠模型。將動(dòng)物隨機(jī)分為模型對(duì)照組、板栗殼斗總酚大劑量組（300mg/kg）、小劑量組（150mg/kg）及甲糖寧組，并設(shè)正常對(duì)照組。給藥8周后處死大鼠，取血清測定空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。結(jié)果：與正常對(duì)照
2、組對(duì)比，模型組血糖FPG、TC、TG、LDL水平顯著升高，HDL水平顯著降低；與模型對(duì)照組比較，大劑量組血糖及血脂水平有顯著改善，小劑量組血糖水平顯著改善，血脂水平無顯著變化。結(jié)論：板栗殼斗提取物能顯著改善高脂糖尿病模型大鼠的血糖水平，大劑量時(shí)能顯著調(diào)節(jié)血脂水平。[關(guān)鍵詞]板栗；殼斗；血糖；血脂；糖尿病[基金項(xiàng)目]TheFundamentalResearchFundsfortheCentralUniversities(JD2010-2)[通訊作者]*劉玉軍，E-mail:yjliubio@163.com，主要研究方向:藥用植物學(xué)化學(xué)II型糖尿病患者除血糖水平異常升
3、高外，還普遍存在脂代謝紊亂的現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為血液甘油三酯（TG)、總膽固醇（TC)和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C)水平升高，腹部脂肪增加.研究調(diào)節(jié)血糖血脂的藥物對(duì)于預(yù)防和治療糖尿病，提高糖尿病人的健康狀況具有重要意義。板栗殼斗是板栗（CastaneamollissimaBlume）果實(shí)外的帶刺毛殼，采收后作為廢棄物拋棄。2010年，沈陽藥科大學(xué)與日本明治醫(yī)科大學(xué)合作研究發(fā)現(xiàn)，板栗殼斗中含有的山奈酚、沒食子酸、3,4-二甲基苯甲酸、鞣花酸、苯甲基-6-O-β-d-葡萄糖苷等多種化學(xué)成分具有醛糖還原酶抑制活性，其中鞣花酸與苯甲基-6-O-β-d-葡萄糖苷活性最為顯著
4、，提示這些物質(zhì)具有一定的降糖活性；2011年，Muji?A.等研究發(fā)現(xiàn)，板栗殼斗粗提物能夠修復(fù)鏈脲佐菌素（STZ）誘發(fā)的Rin-5F大鼠原代β胰島細(xì)胞的損傷，同樣提示板栗殼斗提取物具有一定的降糖作用，同年，尹培培等研究發(fā)現(xiàn)，板栗殼斗提取物能顯著降低STZ誘導(dǎo)的糖尿病模型大鼠血糖水平，從而在整體動(dòng)物水平驗(yàn)證了板栗殼斗的降糖活性，該活性可能與板栗殼斗總酚的抗氧化活性相關(guān)。本研究旨在進(jìn)一步評(píng)價(jià)板栗殼斗總酚對(duì)高脂糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影響，從而對(duì)板栗殼斗總酚的生物活性有更充分的認(rèn)識(shí)。1材料1.1動(dòng)物清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，體重100~120g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物
5、中心提供，許可證號(hào)：SCXK-00118901.2儀器RT-9000型半自動(dòng)生化儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司），GT-1640型日本京都血糖儀以及相應(yīng)試紙（愛科來國際貿(mào)易（上海）有限公司）。1.3試劑鏈脈佐菌素與甲糖寧（Sigma公司），大鼠甘油三酯測定試劑盒、葡糖糖試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒、總膽固醇試劑盒（自中生北控生物科技股份有限公司），高脂飼料（軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心，配方為：10%豬油，20%蔗糖，2.5%膽固醇，1.0%膽酸鹽，66.5%普通動(dòng)物飼料）。2方法2.1板栗殼斗總酚制備干燥的板栗殼斗1kg，加入50%乙醇
6、8L，80℃回流提取三次，每次1h，浸提液經(jīng)紗布過濾、離心后將上清液合并，50℃，0.1MPa真空減壓濃縮至原體積的20%，然后用蒸餾水將濃縮液補(bǔ)充至原體積，靜置24h，取上清，進(jìn)一步離心（5000rpm×10min）后收集上清液。將上清液通過蒸餾水平衡好的HPD100大孔樹脂層析柱(600mm×60mmi.d.)，然后依次用4L的去離子水洗脫,4L50%乙醇洗脫，收集50%洗脫液，然后于50℃，0.1MPa真空濃縮成膏，最后冷凍干燥得到板栗殼斗總酚，并于?20°C避光保存。2.2高脂糖尿病大鼠模型的建立與分組雄性Wistar大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，選取體重在20
7、0~250g的大鼠，給予高脂飼料喂養(yǎng)一個(gè)月，空腹24h后腹腔注射STZ（55mg/kg），5天后尾靜脈取血測定大鼠空腹血糖濃度，選取空腹血糖值大于11.1mmol/L的40只糖尿病模型大鼠。將40只糖尿病模型大鼠隨機(jī)分為4組，分別為大劑量組、小劑量組、甲糖寧組和模型對(duì)照組?？崭?2h后，大劑量組灌胃給予板栗殼斗總酚300mg/kg，小劑量組灌胃給予板栗殼斗總酚150mg/kg，甲糖寧組灌胃給予甲糖寧100mg/kg，模型對(duì)照組灌胃給予等量生理鹽水。實(shí)驗(yàn)中每天給藥1次，共給藥8周，并于給藥后的14天（2wk），28天（4wk）、42天（6wk）、56天（8wk）尾靜
8、脈取血測定
