植物組織培養(yǎng)——試管苗的生根與移栽

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1、第六章試管苗的生根與移栽技能目標：要求學生在熟練掌握試管苗生根與馴化移栽的基本知識和技能的基礎上，能夠靈活應用，為試管苗工廠化生產(chǎn)服務，并能夠解決試管苗生根與移栽中遇到的問題。知識目標：通過本章的學習和實踐，了解影響試管苗生根和移栽成活的因素，熟悉試管苗生根和移栽的常用方法，掌握試管苗生根和移栽的基本技術。植物的組培快繁通過外植體的初代培養(yǎng)以及試管苗的繼代增殖培養(yǎng)，往往誘導產(chǎn)生了大量的叢生芽、叢生莖或原球莖。離體繁殖產(chǎn)生的芽、嫩梢和原球莖，一般都需進一步誘導生根，才能得到完整的植株。當培養(yǎng)材料增殖到一定數(shù)量后，就要使部分培養(yǎng)物分

2、流到生根培養(yǎng)階段，并進行進一步的馴化移栽，使其適應外界的栽培環(huán)境，以獲得高質(zhì)量的商品苗。若不能及時將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上去，就會使久不轉(zhuǎn)移的試管苗發(fā)黃老化，或者因過分擁擠而使無效苗增多造成拋棄浪費。試管苗的生根與移栽是植物組培快繁的第三個階段，也是植物組培快繁的最后一道工序，是能否進行大量生產(chǎn)和實際應用的重要問題，也是商品化生產(chǎn)出售產(chǎn)品、取得效益的最終環(huán)節(jié)。第一節(jié)試管苗的生根試管苗的生根培養(yǎng)是使無根苗生根形成完整植株的過程，這個過程的目的就是使試管苗生出濃密而粗壯的不定根，以提高試管苗對外界環(huán)境的適應力及馴化移栽的成活率，獲

3、得更多高質(zhì)量的商品苗。試管苗的生根一般需轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中或直接栽入基質(zhì)中促進其生根，并進一步長大成苗。試管苗的生根可分為試管內(nèi)生根和試管外生根兩種方式。一、試管內(nèi)生根（一）影響試管苗生根的因素植物離體培養(yǎng)中根的發(fā)生都來自不定根，根原基的形成與生長素有關，但根原基的伸長和生長可以在沒有外源生長素的條件下實現(xiàn)。影響試管苗生根的因素很多，有植物材料自身的生理生化狀態(tài)，也有外部的培養(yǎng)條件，如20基本培養(yǎng)基、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)以及外部的環(huán)境因素等等，要提高試管苗的生根率，就必須考慮這些影響因素。1.植物材料不同植物種、不同的基因型、甚至同一植株

4、的不同部位和不同年齡對根的分化都有決定性的影響。因植物材料的不同，試管苗生根從誘導至開始出現(xiàn)不定根，一般快的只需3～4天，慢的則要3～4周甚至更久。此外，生根難易還與母株所處的生理狀態(tài)有關，因取材季節(jié)和所處環(huán)境條件不同而異。不同植物材料生根的一般規(guī)律是：木本植物較草本植物難，成年樹較幼年樹難，喬木較灌木難，同一植物中上部材料較基部材料難，休眠季節(jié)取材較開始旺盛生長的季節(jié)取材難。但是具體到不同的植物種類也存在個性的差異，一般自然界中營養(yǎng)繁殖容易生根的植物材料在離體繁殖中也較容易生根。2.基本培養(yǎng)基誘導生根的基本培養(yǎng)基，一般需要降低

5、無機鹽濃度以利于根的分化，常使用低濃度的MS培養(yǎng)基，如使用1/2MS、1/3MS或1/4MS的基本培養(yǎng)基，如無籽西瓜在1/2MS時生根較好，硬毛獼猴桃在1/3MS時生根較好，月季的莖段在1/4MS時生根較好，水仙的小鱗莖則在1/2MS時才能生根。礦質(zhì)元素的種類對生根也有一定的影響。對大多數(shù)植物而言，大量元素中NH4+多不利于發(fā)根；生根培養(yǎng)一般需要磷和鉀元素，但不宜太多；Ca2+一般有利于根的形成和生長；微量元素中以硼(B)、鐵(Fe)對生根有利。此外，糖的濃度對試管苗的生根也有一定的影響，一般低濃度的蔗糖對試管苗的生根有利，且有

6、利于試管苗的生活方式由異養(yǎng)到自養(yǎng)轉(zhuǎn)變，提高生根苗的移栽成活率，其使用濃度一般在1%～3%，如桉樹的不定枝發(fā)根最適宜的蔗糖濃度為0.25%，馬鈴薯發(fā)根則為1%。但也有些植物在高濃度時生根較好，如懷山藥在蔗糖6%時生根狀況最好。3.植物生長調(diào)節(jié)劑（1）植物生長調(diào)節(jié)劑的選用及配比在試管苗不定根的形成中，植物生長調(diào)節(jié)劑起著決定性的作用，一般各種類型的生長素均能促進生根。赤霉素、細胞分裂素和乙烯通常不利于發(fā)根，如與生長素配合使用，則濃度一般宜低于生長素濃度。脫落酸（ABA）有助于20部分植物試管苗的生根。植物生長延緩劑如多效銼（PP333

7、）、矮壯素（CCC）、比久（B9）對不定根的形成具有良好的作用，在誘導生根中所使用的濃度一般為0.1～4.0mg/L，如蘋果試管苗生根時若在培養(yǎng)基中附加PP333O.5～2.Omg/L可顯著提高生根率。據(jù)統(tǒng)計，試管苗的生根培養(yǎng)中單一使用一種生長素的情況約占51.5%，使用生長素加激動素的約占20.1%。生根培養(yǎng)中常用的生長素主要為IBA、NAA、IAA和2,4-D等，其中IBA、NAA使用最多。IBA作用強烈，作用時間長，誘導根多而長，NAA誘導根少而粗，一般認為用IBA、NAA0.1～1.0mg/L有利生根，兩者可混合使用，但

8、大多數(shù)單用一種人工合成生長素即可獲得較好的生根效果，常見植物生根培養(yǎng)基的生長調(diào)節(jié)劑水平見表6-1。此外，生根粉(ABT)也可促進不定根的形成，并可與生長素、赤霉素等配合使用，如獼猴桃采用lmg/L或1.5mg/L的1號ABT生根粉生根率可達100%，在赤按組織苗