草履蟲的培養(yǎng)觀察

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1、培養(yǎng)和觀察草履蟲草履蟲是原生動物的重要代表，也是初學(xué)動物學(xué)最先接觸的動物。以草履蟲為代表的纖毛蟲在水質(zhì)凈化及監(jiān)測上有著十分重要的價值。本實驗主要是介紹草履蟲的純化和多種培養(yǎng)方法，并通過觀察，掌握原生動物的基本特征，進(jìn)而更好地理解有關(guān)原生動物的其他知識。一、實驗準(zhǔn)備（一）材料干稻草、舊稻草墊子、干玉米雄花穗、干荷葉、小麥粒、離芭葉、干酵母、動物內(nèi)臟（肝、胰、甲狀腺等）、蛋黃、牛肉汁（50g牛肉、100g水，煮熟）。（二）用品顯微鏡、放大鏡、電爐、恒溫培養(yǎng)箱、載玻片、蓋玻片、滴管、微吸管、解剖針、燒杯、培養(yǎng)皿、凹

2、玻璃片、紗布、吸水紙、大頭針、瓊膠、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3％的甲基纖維素溶液、碘液、葡萄糖、氯化鈉、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為１％的洋紅溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0．1％的中性紅溶液。（三）采集和培養(yǎng)1．采集選取多處進(jìn)行采集。凡是有機(jī)物含量豐富的污水，均可采250～500mL水樣，當(dāng)場用放大鏡檢查。水樣鏡檢，凡呈乳白色，個體較大，圓柱狀，一端稍圓一端稍尖的動物，就是草履蟲。如果多次檢查均未發(fā)現(xiàn)草履蟲，水樣可棄之，另選別處采集。水樣取回，經(jīng)顯微鏡檢查，凡含有草履蟲的水樣，要在離水樣瓶１０～２０cm處，放置一盞燈，經(jīng)以２４h照明，使草履蟲向水的上層

3、聚集。2．培養(yǎng)液制備制備方法較多，可根據(jù)教學(xué)實際進(jìn)行選用。（1）稻草培養(yǎng)液干稻草10g，剪成3Cm長，放人燒杯，加水1000m1，煮沸10～15min，放涼，補足失去水分。在１000mL水面處劃一刻度線，便于日后失水再補。（2）玉米雄花穗培養(yǎng)液干玉米雄花穗15g，剪成3Cm長，加水１000m1，煮沸10～15min。（3）荷葉培養(yǎng)液干荷葉50g，適當(dāng)撕碎，加水１000mL，煮沸15～20min。（4）麥粒培養(yǎng)液小麥粒１００顆，加水１０００mL，煮沸10～15min。5（5）離芭、稻草混合培養(yǎng)液離芭葉25g，加

4、水500m1，煮沸5min，補足失去的水分后，再加稻草培養(yǎng)液500m1。（6）干酵母培養(yǎng)液市售干酵母0．59，加水1000mL，搖蕩均勻后備用。（7）臟器培養(yǎng)液動物內(nèi)臟5g，剪碎，加水1000m1，浸泡1d，濾去內(nèi)臟與殘渣，留下純凈培養(yǎng)液。（8）蛋黃培養(yǎng)液煮熟雞蛋黃2g，加水1000m1，攪拌均勻。（9）稻草墊培養(yǎng)液舊稻草墊，取其10g，剪成3cm長，加水1000mL，再加50g葡萄糖。以上方法中，第1～8種，無論培養(yǎng)液煮沸與否均要放進(jìn)恒溫箱，在25～300C下培養(yǎng)1～2d，目的是促使培養(yǎng)液長出細(xì)菌，以便接種

5、草履蟲后，供草履蟲索餌。而第9種方法，既不需煮沸培養(yǎng)液，又不需接種草履蟲，直接將培養(yǎng)液放進(jìn)恒溫箱培養(yǎng)，只要稻草上附有草履蟲包囊，當(dāng)包囊處于適宜條件時，草履蟲就會破囊而出，進(jìn)行旺盛的代謝活動，在5～7d內(nèi)大量繁殖起來。牛奶液培養(yǎng)??將牛奶液攪拌均勻后，移入草履蟲，溫度保持在攝氏22度，二三日后，草履蟲迅速繁殖，并且出現(xiàn)處于分裂生殖狀態(tài)的草履蟲。5日內(nèi)蟲體數(shù)量達(dá)到高峰，以后每隔2星期在原有的培養(yǎng)液內(nèi)再加入牛奶液，可長期維持草履蟲的生活。取多根完整的黃豆芽，分別放入多只試管內(nèi)，試管中注入池塘水或河溝水，水的深度以完

6、全淹沒黃豆芽為宜。管口用紗布塞住，將試管置于試管架上，在20℃～25℃溫度下放置。大約7～10天，就會看到試管液面處有許多游動的小白點，這些小白點就是草履蟲。3．培養(yǎng)下面介紹三種培養(yǎng)方法。（1）采集的水樣經(jīng)一晝夜照光，從水面下1Cm處，在瓶壁上已經(jīng)形成一圈“白線”的地方，用微吸管取液。滴一滴到載片上，經(jīng)鏡檢證實水滴中只含草履蟲，無任何其他微型生物時，就可用一個新的干凈滴管吸培養(yǎng)液，將載片上的草履蟲吹人培養(yǎng)瓶中，放置在25～300C環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)5～7d，草履蟲就會大量繁殖起來。（2）如果水樣中混有少量其他微型

7、生物，可以在載片上先滴一滴牛肉汁，再滴一滴含有草履蟲的水樣，兩滴間距2cm左右，用解剖針從肉汁一端引一條線到含有草履蟲的水滴上。兩滴連結(jié)后，用放大鏡仔細(xì)觀察，會發(fā)現(xiàn)草履蟲對牛肉汁敏感性很強(qiáng)，草履蟲游到牛肉汁滴的速度也快。然后迅速將載玻片放置在顯微鏡下檢查，在確認(rèn)牛肉汁滴內(nèi)尤其他微型生物時，迅速用吸水紙切斷連結(jié)線，用紗布擦干另一側(cè)的水滴，用于凈滴管把含草履蟲的牛肉汁吹人培養(yǎng)瓶中。如此重復(fù)操作幾次，然后將培養(yǎng)瓶放在25～300C溫度下繼續(xù)培養(yǎng)，5～7bd后就會有大量草履蟲繁殖出來。5（3）如果水樣中混雜微型生物的

8、種類與數(shù)量過多，不易排除，就需要采用逐步擴(kuò)大法。一般是從水樣中取液，在凹玻片內(nèi)滴上1～2滴，放置在顯微鏡下，邊觀察邊用微吸管吸走其他微型生物。當(dāng)凹坑水中無任何其他微型生物而只含草履蟲時，往凹坑放少許培養(yǎng)液，在25～300C下培養(yǎng)，每日補加１／３～２／３培養(yǎng)液。如果幾天后，草履蟲數(shù)量有所增加，就將其轉(zhuǎn)入表面皿或培養(yǎng)皿，繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。如果再過幾天后草履蟲純化培養(yǎng)效果理想，數(shù)量又有所增加，就要再轉(zhuǎn)入大容器