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《氯胺酮對谷氨酸誘導(dǎo)大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞內(nèi)游離鈣濃度的影響.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、氯胺酮對谷氨酸誘導(dǎo)大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞內(nèi)游離鈣濃度的影響作者:李清,朱濤,秦成名,劉菊英 [摘要]目的:觀察氯胺酮對谷氨酸誘導(dǎo)大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞凋亡和胞內(nèi)游離鈣濃度([Ca2+]i)變化的影響。方法:取新生2~3dWistar大鼠T11~L6脊髓背角星形膠質(zhì)細胞,原代純化培養(yǎng)。將細胞隨機分為:對照組(C組),谷氨酸組(G組),氯胺酮組(K組),余下3組為谷氨酸+不同濃度氯胺酮組(標記為GK1~GK3組),培養(yǎng)30min后取各細胞檢測[Ca2+]i,再培養(yǎng)48h檢測星形膠質(zhì)細胞凋亡率。結(jié)果:與C組比較,G組細胞發(fā)生了大量凋亡(P<0.01),[Ca2+]
2、i顯著升高(P<0.01);與G組比較,GK2組細胞凋亡率和[Ca2+]i明顯降低(P<0.05),GK3組細胞凋亡率和[Ca2+]i顯著降低(P<0.01)。結(jié)論:適量氯胺酮通過抑制細胞內(nèi)鈣超載顯著抑制了谷氨酸誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細胞凋亡?! 關(guān)鍵詞]氯胺酮;谷氨酸;脊髓背角;星形膠質(zhì)細胞;凋亡;[Ca2+]i Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofketamineonGlutamate-inducedapoptosisandtheintracellulardissociatedCa2+concentration([Ca2+]
3、i)inratculturedspinalcorddorsalhornastrocytes.MethodsCellswerederivedfromT11-L6spinalcorddorsalhornof2-3daysoldWistarratandpurifiedfortwoweeks,theyweretreatedwithfollowingsixconditions:(1)shamwashwithHankssolution(controlgroup-C);(2)100μmol/LofGlutamate(group-G);(3)100μmol/Lketamine(
4、group-K);(4-6)100μmol/LofGlutamatewasaddedand30minslater,ketamineat10,50or100μmol/Lwassuperimposed,respectively(groupGK1-GK3).After30minsor48hrstreatment,the[Ca2+]iandtheapoptoticcelldeathwasanalyzedwithflowcytometer.ResultsApoptoticcelldeathandthe[Ca2+]iwassignificantlyincreasedinGr
5、oupGwhencomparedwithGroupC(P<0.01).Theapoptoticastrocytesandthe[Ca2+]iwassignificantlowinGK2group(P<0.05)andGK3group(P<0.01)thaninGroupG.Therewasnoeffectofketamineitselfat100μmol/Lonapoptoticcelldeathand[Ca2+]i.ConclusionKetamineat100μmol/Lcaninhibitglutamate-inducedapoptosi
6、scelldeathinratculturedspinalcorddorsalhornastrocytes.Itsanti-apoptoticmechanismsmaybeexplainedbyinhibitingtheintracellularCa2+overloading. Keywords:Ketamine;Glutamate;Spinalcorddorsalhorn;Astrocyte;Apoptosis;[Ca2+]i4 脊髓背角的谷氨酸是初級感覺傳入的主要興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。外周持續(xù)性傷害刺激可使初級感覺傳入神經(jīng)末稍釋放大量谷氨酸,激活背角星形膠質(zhì)細
7、胞,通過神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞之間的電――化學信號轉(zhuǎn)導(dǎo)參與傷害性信號調(diào)控,導(dǎo)致興奮性毒性作用,誘發(fā)星形膠質(zhì)細胞損傷或凋亡[1-2]。目前對該過程中谷氨酸誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細胞凋亡的機制不完全清楚。氯氨酮是一種非競爭性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑,它能通過血腦屏障與NMDA受體離子通道結(jié)合,阻斷鈣離子通道。有研究表明,氯胺酮可抑制脊髓星形膠質(zhì)細胞的激活[3]。有關(guān)氯胺酮對谷氨酸誘導(dǎo)大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞凋亡的影響尚無報道。本實驗通過對大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞原代純化培養(yǎng),用氯胺酮對此進行探討。 1材料與方法 1.1動物、主要儀器和試劑出生1~3dWi
8、star大鼠20只,雌雄