肉牛胚胎移植技術(shù)

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1、肉牛胚胎移植技術(shù)胚胎移植又稱(chēng)受精卵移植，是將l頭良種母畜(供體)配種后的早期胚胎取出，移植到另一頭同種的生理狀態(tài)相同的母畜(受體)的子宮內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成為個(gè)體，所以也叫人工授胎或“借腹懷胎”。(一)胚胎移植的意義1．充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛力，提高繁殖效率由于牛的胚胎移植可以利用非手術(shù)法反復(fù)從一頭供體中收集胚胎，所以繁殖率得以更加提高。據(jù)報(bào)道國(guó)外已能做到從一頭供體牛一年獲得40～50頭犢牛。2．加速品種改良，擴(kuò)大良種畜群利用超數(shù)排卵、胚胎移植技術(shù)能使母畜排出較多卵子，山東永豐牧業(yè)同時(shí)解除其妊娠

2、胚胎的職能，這樣一頭良種母牛就可產(chǎn)生多量的后代。使一頭優(yōu)良母畜在育種工作中的意義大為提高。3．誘發(fā)肉牛懷雙胎，提高生產(chǎn)效率在肉牛業(yè)中，有一種由胚胎移植技術(shù)演化出來(lái)的所謂“誘發(fā)雙胎”的方法，即向已配種的母畜(排卵的對(duì)側(cè)子宮角)移植一個(gè)胚胎，這樣配種后未受胎的母畜可能因接受移植的胚胎而妊娠，而已受精的母畜由于增加了一個(gè)外來(lái)胚胎而可能懷雙胎o4．代替種畜的引進(jìn)，保存品種資源通過(guò)胚胎的運(yùn)輸代替以往的種牛進(jìn)出Vl山東永豐牧業(yè)，大大節(jié)約了購(gòu)買(mǎi)和運(yùn)輸種牛的費(fèi)用。同時(shí)可用保存胚胎的方式解決牛品種資源保存的問(wèn)題。

3、(二)胚胎移植的操作原則1．胚胎移植前后所處環(huán)境的一致性即胚胎移植后的生活環(huán)境和胚胎的發(fā)育階段相適應(yīng)山東永豐牧業(yè)。包括生理上的一致性(即供體和受體在發(fā)情時(shí)問(wèn)上的一致性)和解剖位上的一致性(即移植后的胚胎與移植前所處的空問(wèn)環(huán)境的相似性)以及種屬一致性(即供體與受體應(yīng)屬同一物種，www.myyzw.com但并不排除種間移植成功的可能性)。2．胚胎收集期限胚胎收集和移植的期限(胚胎的日齡)不能超過(guò)周期黃體的壽命，最遲要在周期黃體退化之前數(shù)日進(jìn)行移植。通常是在供體發(fā)情配種后3～8日內(nèi)收集和移植胚胎。3．

4、在全部操作過(guò)程中，胚胎不應(yīng)受到任何不良因素(物理的、化學(xué)的、微生物的)的影響而危及生命力。移植的胚胎必須經(jīng)鑒定并認(rèn)為是發(fā)育正常者。(三)胚胎移植技術(shù)的基本程序胚胎移植的基本程序包括：供授體母牛的同期發(fā)情、供體母牛的超數(shù)排卵、供體母牛的配種、胚胎的收集、山東永豐牧業(yè)胚胎的檢查、胚胎的保存和移植等程序。如圖3—4所示。關(guān)于超排和同期發(fā)情處理在前面已有敘述，下面僅介紹其余部分。1．供體母牛的配種經(jīng)超數(shù)排卵的供體母牛，為了使排出的卵子有較多的受精機(jī)會(huì)，一般在發(fā)情后輸精2～3次，每次間隔8～12h。2．胚

5、胎的收集從供體母牛收集胚胎的方法，可采用手術(shù)法和非手術(shù)法兩種。手術(shù)法是按外科剖腹術(shù)的要求進(jìn)行山東永豐牧業(yè)，手術(shù)部位在右肋部或腹下乳房至臍部之問(wèn)的白線切開(kāi)。www.myyzw.com伸進(jìn)手指找到輸卵管和子宮角，引出供。母體十畜同期發(fā)情處理受體母畜辛辛辛辛發(fā)情配種妊娠或再作供體圖3-4胚胎移植過(guò)程示意圖妊娠分娩辛早6艿優(yōu)良后代切口外。輸精后3～4天，受精卵絕大多數(shù)還在輸卵管內(nèi)，用注射器吸取沖洗液，連接穿刺針頭，在子宮前端刺入，再送入輸卵管峽部，注人沖洗液；另在輸卵管傘端插入塑料導(dǎo)管山東永豐牧業(yè)，回收

6、帶有受精卵的沖洗液。如在輸精后的5天沖卵，受精卵已絕大部分進(jìn)入子宮角，需從子宮角沖卵。非手術(shù)法是采用特制的二路或三路導(dǎo)管沖卵器(參看圖3—5)。沖卵時(shí)將導(dǎo)管用直腸把握法經(jīng)子宮頸導(dǎo)入子宮角，從子宮角沖卵，www.myyzw.com在輸精后5～7天進(jìn)行。沖卵所用的沖洗液，多為組織培養(yǎng)液，如林格氏液、杜氏磷酸緩沖液、布林斯特氏液(BMoG3)和TCM-199等。杜氏磷酸緩沖液(Ⅸ峪)，加入0．4％的牛血清白蛋白或1％～l0％的小牛血清，效果較好。布林斯特氏液效果也較好。這2個(gè)培養(yǎng)液的成分如表圖3-5非

7、手術(shù)取卵裝置3—8所示。沖洗液的溫度為35～37"C，每毫升加入青霉素1000IU，鏈霉素500～1000／*9，以防生殖道感染。表3-8組織培養(yǎng)液成分{9／L雙蒸餾水)成分杜氏磷酸緩沖液(PBS)布林斯特氏液(BMOG3)3．胚胎的檢查把上述方法所回收的沖洗液，置于室溫或37℃溫箱內(nèi)靜置lomin。待胚胎下沉后，移去上層液，取底部少量液體，移至平皿內(nèi)，先在10～20倍的解剖鏡下檢查胚胎數(shù)量，然后在50～100倍鏡下觀察胚胎發(fā)育狀況。把發(fā)育正常的胚胎收集于帶有密閉蓋的玻璃容器內(nèi)備用或儲(chǔ)存。發(fā)育正

8、常的胚胎，外形整齊、大小一致、分布均勻、外膜完整。無(wú)卵裂現(xiàn)象(未受精)和異常卵(外膜破裂、www.myyzw.com卵裂球破裂等)都不能用于胚胎移植。4．胚胎的移植分手術(shù)和非手術(shù)移植。在肉牛業(yè)中以誘產(chǎn)雙胎為目的，一般都采用非手術(shù)移植。山東永豐牧業(yè)非手術(shù)移植胚胎是用人工授精細(xì)管輸精器或?qū)Ｓ靡坡哑鳎粗蹦c把握輸卵法，將吸有胚胎的移卵器插入受體母牛非排卵側(cè)子宮角深部，將胚胎注入即可。此外，胚胎冷凍、胚胎分割、體外受精(試管牛犢)、核移植等繁殖新技術(shù)，我國(guó)均已取得成功，但目前尚未進(jìn)入實(shí)用階段，故不作介紹