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1、枯草芽孢桿菌芽孢中的芽孢衣·108·文章編號(hào)：1000—1336(2005)02-0108-03《生命~2oo5年25卷2期CHEMISTRYOFLIFE2005，25(2)●MiniReviews枯草芽孢桿菌芽孢中的芽孢衣劉燕秦玉昌(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院飼料研究所，北京100081)摘要：芽孢衣是賦予芽孢對(duì)有機(jī)溶劑和溶菌酶的抗性，以及對(duì)外界出芽誘導(dǎo)物的感應(yīng)能力的保護(hù)性結(jié)構(gòu)。該文主要介紹由枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)所形成的芽孢的芽孢衣中已鑒定的主要蛋白質(zhì)，及其基因表達(dá)調(diào)控和應(yīng)用等方面的研究進(jìn)展。關(guān)鍵詞：芽孢衣：形態(tài)建成蛋白質(zhì)
2、(morphogeneticprotein)；表面展示蛋白質(zhì)中圖分類號(hào)：Q934芽孢是某些革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌用于抵抗不良環(huán)境的休眠結(jié)構(gòu)。從開始形成到結(jié)束大約需要8～10h。在芽孢形成的初期，首先是經(jīng)歷不對(duì)稱分裂形成大小不等的兩個(gè)細(xì)胞。大的為母細(xì)胞(mothercel1)，小的為前芽孢(forespore)。各自包裹一部分染色體。然后前芽孢內(nèi)陷進(jìn)入母細(xì)胞，形成大細(xì)胞中包裹小細(xì)胞的形式。大小細(xì)胞經(jīng)歷不同的發(fā)育過(guò)程，前芽孢最終發(fā)育為芽孢，而母細(xì)胞則為前芽孢的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)和結(jié)構(gòu)成分。收稿日期：2004一l1—30作者簡(jiǎn)介：劉燕(1982一)，女，碩士生，
3、E—mail：liuyanllh@yahooCom．Cn芽孢的高度抗性主要依賴于高度脫水的核心(core)及包裹芽孢的兩層結(jié)構(gòu)：皮層(thecortex)和芽孢衣(thesporecoat)。在芽孢衣的組裝過(guò)程中基因表達(dá)的調(diào)控?zé)o疑是不可缺少的，但存儲(chǔ)于蛋白質(zhì)本身或輔助蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息對(duì)蛋白質(zhì)的正確定位也起到很重要的作用。已分離出幾種指導(dǎo)其他蛋白質(zhì)正確定位的形態(tài)建成蛋白質(zhì)：并提出了芽孢衣的初步組裝模型。芽孢衣蛋白質(zhì)的自我組裝已經(jīng)成為研究生物大分子自我組裝的模型。芽孢還被用作載體，利用其芽孢衣蛋白質(zhì)來(lái)展示其他外源蛋白質(zhì)。1．芽孢衣的形態(tài)和蛋白質(zhì)組
4、成病毒載體，即新構(gòu)建的CRAd、作為陽(yáng)性對(duì)照的含巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的腺病毒(AdCMV—E1A)及作為陰性對(duì)照的復(fù)制缺陷型腺病毒，以比較新構(gòu)建CRAd的效力：還需設(shè)定檢測(cè)時(shí)間及設(shè)定病毒不同的感染復(fù)數(shù)(multiplicityofinfection，MOI)，以綜合評(píng)價(jià)其復(fù)制水平和溶瘤能力：此外。還要構(gòu)建體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型。臨床前評(píng)價(jià)應(yīng)包括體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩部分。體外實(shí)驗(yàn)在細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)上進(jìn)行．如感染病毒后正常及靶腫瘤細(xì)胞成活率分析：而病毒復(fù)制能力分析則可采用Western印跡法、空斑測(cè)定(plaqueassay)及逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)fRT—P
5、CR)等。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)在構(gòu)建動(dòng)物模型后，瘤內(nèi)注射一定量的病毒．監(jiān)測(cè)異種移植瘤生長(zhǎng)情況并跟蹤小鼠成活期；還需小鼠尾靜脈注射病毒，一定時(shí)間后，取小鼠肝、脾等器官進(jìn)行組織病理分析以評(píng)價(jià)新構(gòu)建CRAd載體的毒性m1。近幾年來(lái)，CRAd已成為有前途的新型癌癥基因治療載體。尤其它在臨床前實(shí)驗(yàn)階段所顯示出的強(qiáng)有力的溶瘤作用．為實(shí)體瘤的治療帶來(lái)了新的希望。而且，隨著對(duì)病毒生物學(xué)方面知識(shí)不斷深入的了解，將引導(dǎo)我們?cè)谠鰪?qiáng)病毒靶向型、基因轉(zhuǎn)移效率、腫瘤特異性復(fù)制的調(diào)控及在人體內(nèi)的穩(wěn)定性方面進(jìn)行更為深入的研究，從而構(gòu)建出復(fù)制效率更高、特異性更強(qiáng)、應(yīng)用范圍更廣的CRAd載
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8、外膜內(nèi)膜皮層外膜內(nèi)膜皮層BCD圖l芽孢衣組裝模型【11MC，母細(xì)胞；FS，前芽孢；JA，CotjA；jc，CotjC；A，CotA；M，CotM；H，CotH；D，
