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1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化【摘要】目的：研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化及其臨床意義。方法：對(duì)30例患者和20例健康者，采用特異性熒光抗體標(biāo)記，流式細(xì)胞檢測T淋巴細(xì)胞亞群的變化。結(jié)果：SLE活動(dòng)組CD4+細(xì)胞數(shù)明顯降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值明顯降低（P<0.05）。結(jié)論：T淋巴細(xì)胞亞群在SLE的發(fā)病機(jī)制中起重要作用?！娟P(guān)鍵詞】系統(tǒng)性紅斑狼瘡；T淋巴細(xì)胞亞群;流式細(xì)胞術(shù) TheChangeofPeripheralBloodTLymphocyteSubsetsinPatientswithDiff
2、erentClinicalTypesofSystemicLupusErythematosus Abstract:ObjectiveTostudythechangeofTlymhocytesubsetswithsystemiclupuserythematosus.Methods30patientswithsystemiclupuserythematosusand20casesofhealthysubjectswereinvestigatedandthechangeofTLymphocytesubsetswerecountedbyflowcytometer.Resul
3、tsDecreaseinCD4+cellsandwasobservedinSLEpatients(P<0.05).ConclusionTlymphocyteisplayanimportantroleinthedevelopmentofSLE.Keywords:Systemiclupuserythematosus;Tlymphocyte;Flowcytomety系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種自身免疫性疾病，存在免疫功能的紊亂，但其發(fā)病機(jī)制及機(jī)體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞的具體變化尚未完全明確。本研究采用特異性熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)，探討SLE患者在疾病的不同階段外周血CD
4、3+、CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞的變化，為闡述SLE患者存在的免疫功能紊亂、揭示SLE的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 1資料與方法 1.1臨床資料 SLE患者30例，其中女29例，男1例，年齡17歲~54歲，平均年齡31.8歲，所有病例均符合1982年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ARA）修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。采用1992年歐洲SLE活動(dòng)性評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判斷SLE的病情活動(dòng)性［2］。其中活動(dòng)期SLE18例（活動(dòng)期患者未用糖皮質(zhì)激素），非活動(dòng)期SLE12例,正常對(duì)照組為20例健康志愿者?！ ?.2主要試劑和儀器3 雙色標(biāo)記單抗CD3+、CD4+分別與FITC、PE熒光素結(jié)合；含
5、beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads;FACS溶血素（均為美國BD公司產(chǎn)品）。FACSCalibur流式細(xì)胞儀（美國BD公司）?！ ?.3實(shí)驗(yàn)方法 標(biāo)本處理：抽患者外周血2ml,用肝素鈉抗凝管保存，6h內(nèi)分析;向TrueCount管中分別加入20μl抗體和50μl的抗凝全血,振蕩混勻3s，避光放置15min；加入FACS（1X）溶血素2ml，充分混勻，室溫避光10min；1000rpm/min離心5min,棄上清；加入2mlPBS洗一次;800rpm/min離心5min,棄上清；流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測。數(shù)據(jù)獲取與分析使用CaliBRITE標(biāo)
6、準(zhǔn)微球、FACSComp軟件調(diào)節(jié)FACSCalibur流式細(xì)胞儀PMT電壓、熒光補(bǔ)償、靈敏度，應(yīng)用SimulSET分析軟件對(duì)處理好的標(biāo)本進(jìn)行CD3+、CD4+、CD8+相對(duì)計(jì)數(shù)?！ ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS8.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析?！ ?結(jié)果SLE患者外周血T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果見表1，SLE活動(dòng)期患者與正常組比較CD4+細(xì)胞數(shù)明顯降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值降低（P<0.05）。SLE活動(dòng)期患者與正常組比CD8+細(xì)胞數(shù)差異無顯著性（P>0.05）。表1SLE患者與正常
7、人T淋巴細(xì)胞亞群比較（略）注：*與正常對(duì)照組比較，P<0.05；Δ與正常對(duì)照組比較，P>0.05。 3討論正常免疫應(yīng)答過程有依賴于各種免疫細(xì)胞，特別是各T細(xì)胞亞群之間的相互協(xié)作和相互制約。若某一T細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常，機(jī)制就出現(xiàn)免疫紊亂，并發(fā)生一系列病理變化。SLE是一種自身免疫性疾病，存在免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。國內(nèi)外對(duì)SLE患者T細(xì)胞亞群的研究有很多，但結(jié)果不太一致。過去多數(shù)研究認(rèn)為［3］在SLE活動(dòng)期，CD4+（輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞）升高，CD8+（抑制/殺傷T細(xì)胞）下降，CD4+/CD8+比值升高，認(rèn)為SLE的發(fā)病與上述T細(xì)胞亞群的改變有關(guān)，尤
8、其是CD8
