甲狀腺乳頭狀癌TGF-β1、nm23-H1、CD31表達(dá)及其與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系.doc

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1、甲狀腺乳頭狀癌TGF-β1、nm23-H1、CD31表達(dá)及其與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系作者:方海飛 丁國芳 徐銀峰【摘要】研究甲狀腺乳頭狀癌組織中TGF-β1、nm23-H1和CD31的表達(dá)水平及其與甲狀腺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法應(yīng)用EnVisionTM免疫組織化學(xué)法檢測55例甲狀腺乳頭狀癌和10例癌周組織TGF-β1、nm23-H1和CD31的表達(dá);并計(jì)數(shù)CD31標(biāo)記的腫瘤組織微血管密度(MVD)。結(jié)果甲狀腺乳頭狀癌組織中TGF-β1陽性表達(dá)率76.37%、nm23-H1陽性表達(dá)率65.46%,均高于癌周組織,兩者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別=16.64、10.

2、61,P均<0.05);MVD與TGF-β1的表達(dá)之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.70,P<0.05),MVD與nm23-H1的表達(dá)之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.62,P<0.05)。結(jié)論甲狀腺乳頭狀癌中TGF-β1、nm23-H1和CD31表達(dá)水平可作為判斷病情進(jìn)展和腫瘤轉(zhuǎn)移的指標(biāo)之一。【關(guān)鍵詞】甲狀腺乳頭狀癌;TGF-β1;nm23-H1;MVD;腫瘤轉(zhuǎn)移AbstractObjectiveTostudytheexpressionsofTGF-β1,nm23-H1,CD31inpapillarythyroidcancer(PTC)tissuesandit

3、srelationwiththelymphnodemetastasis.MethodsTGF-β1,nm23-H1,CD31weredetectedbyEnVisionTMimmunohistoche-mistrymethodin55tumourtissuesand10normaltissues;theexpressionofCD31wasusedforthemarkofthevascularendothelialcell,thetumormicrovasculardensity(MVD).ResultsThepositiveexpressionrat

4、esofTGF-β1andnm23-H1inpapillarythyroidcancerwere76.37%and65.46%,TheexpressionlevelsofTGF-β1andnm23-H1inpapillarythyroidcancertissuewerehigherthanthatinnormalthroidtissue(χ2=16.64,10.61,P<0.05).TherewaspositiverelationshipbetweenMVDandTGF-β1(r=0.70,P<0.05).Therewasnegativerelatio

5、nshipbetweenMVDandnm23-H1(r=-0.62,P<0.05).ConclusionsTGF-β1,nm23-H1,andCD31maybeusedtoestimatetheprogressionandlymphnodemetastasis.Keywordspapillarythyroidcancer;TGF-β1;nm23-H1;MVD;tumormetastasis發(fā)甲狀腺乳頭狀癌,其中有淋巴轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者35例,無轉(zhuǎn)移者20例。按UICC2002年TNM臨床分期:Ⅰ期16例,Ⅱ期19例,Ⅲ期18例,Ⅳ期2例。對(duì)照組為10例正

6、常甲狀腺組織,取自甲狀腺癌周圍組織(簡稱癌周組織),經(jīng)病理檢查確認(rèn)均無腫瘤。1.2 主要試劑和免疫組織化學(xué)方法 一抗為兔抗人TGF-β1多克隆抗體(SC-146,由美國Santa4Cruz公司生產(chǎn))、即用型兔抗人nm23-H1多克隆抗體和鼠抗人CD31蛋白單克隆抗體(JC70A,M082301,由德國Dako公司生產(chǎn));EnVisionTM試劑盒(由Dako公司生產(chǎn))。所有標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定,常規(guī)脫水透明、浸蠟、包埋,連續(xù)切片,切片厚4μm,用于EnVisionTM免疫組織化學(xué)法。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,微波修復(fù)抗原,3%H2O2溶液室溫孵育20m

7、in,以消化內(nèi)源性過氧化物酶,10%正常羊血清封閉30min,分別加一抗nm23-H1,濕盒中孵育,4℃過夜,滴加二抗,EnVisionTM試劑室溫孵育1h。各步驟間均以0.01mol/LPBS緩沖溶液沖洗5min連續(xù)3次。DAB-H2O2顯色,顯微鏡下控制時(shí)間,蘇木素復(fù)染,脫水透明,中性樹膠封片,OlympusBX-41顯微鏡觀察、照相。用PBS緩沖溶液代替一抗作為陰性對(duì)照,以甲狀腺乳頭狀癌癌周組織作對(duì)照組。1.3 結(jié)果判斷 TGF-β1和nm23-H1免疫組化染色的陽性判定,細(xì)胞漿和部分細(xì)胞核著棕色顆粒者為陽性,不著色者為陰性。結(jié)果以顯微鏡下每張切

8、片取5個(gè)高倍視野(200×,0.075mm2),計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞所占比例,<10%為陰性(-);1

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