甲狀腺乳頭狀癌nm23h1、cd31表達與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究

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1、甲狀腺乳頭狀癌nm23H1、CD31表達與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究【關(guān)鍵詞】甲狀腺乳頭狀癌nm23H1CD31腫瘤轉(zhuǎn)移　　Abstract：［Objective］Tostudytheexpressionsofnm23H1,CD31inpapillarythyroidcancertissuesandthecorrelationphnodemetastasis.［Methods］nm23H1,CD31munohistochemistrymethodin55tomourtissuesand10normaltissues;theexpressionofCD31arkofthevascul

2、arendothelialcell,thetumormicrovasculardensity(MVD).［Results］Thepositiveexpressionrateofnm23H1inpapillarythyroidcancer23H1inpapillarythyroidcancertissuealthroidtissue(P<001).There23H1.［Conclusions］nm23H1promotesmicrovascularemergedinpapillarythyroidcancertissuesandplaysanimportantrolei

3、nthelymphnodesmetastasis.　　Keya;nm23H1;CD31;Tumormetastasis　　全世界甲狀腺癌發(fā)病率約占全身惡性腫瘤的1%～2%，我國年發(fā)病率為05～40人/10萬人，近幾年來，我國甲狀腺癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，尤其以女性明顯增加，對人類健康危害極大。其中甲狀腺癌分化性癌占80-90%，甲狀腺乳頭狀癌的轉(zhuǎn)移方式多為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，年輕人的乳頭狀癌患者確診時，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高達90%［1］。目前，對甲狀腺癌的轉(zhuǎn)移機制尚不清楚。本文研究nm23H1（nonmetastaticgene23H1）和CD31在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移關(guān)系，

4、為指導甲狀腺癌臨床診斷及判斷預后提供參考?！　?材料與方法　　11臨床資料收集2003年1月至2006年1月中甲狀腺乳頭狀癌組織標本55例，年齡15~71歲（平均4356±1454），男11例，女44例?；颊吲R床資料完整,術(shù)前均未接受化療和放療,均為經(jīng)典根治術(shù)，有淋巴轉(zhuǎn)移或遠處轉(zhuǎn)移的35例，無轉(zhuǎn)移的20例，經(jīng)病理檢查證實均為原發(fā)甲狀腺乳頭狀癌。TNM分期［1］：Ⅰ期16例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。對照組為10例正常甲狀腺組織，取自甲狀腺癌周圍組織（簡稱癌周組織），經(jīng)病理檢查確認均為正常組織。取手術(shù)切除的組織標本，經(jīng)10%福爾馬林固定,常規(guī)脫水透明、浸蠟、包埋，連續(xù)切

5、片，切片厚4μm，用于EnVisionTM免疫組織化學法?！　?2主要試劑和免疫組織化學方法一抗為即用型兔抗人nm23H1多克隆抗體和鼠抗人CD31蛋白單克隆抗體（JC70A，M082301，Dako公司）；EnVisionTM試劑盒（Dako公司，工作液），購自上?；蚬?。采用EnVisionTM兩步法。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，微波修復抗原，3%H2O2溶液室溫孵育20min，以消化內(nèi)源性過氧化物酶，10%正常羊血清封閉30min，分別加一抗nm23H1，濕盒中孵育，4oC過夜，滴加二抗，EnVisionTM試劑室溫孵育1h。各步驟間均以001mol/LPBS緩沖溶液沖洗

6、5min連續(xù)3次。DABH2O2顯色，顯微鏡下控制時間，蘇木素復染，脫水透明，中性樹膠封片，OlympusBX41顯微鏡觀察、照相。用PBS緩沖溶液代替一抗，作為陰性對照，以甲狀腺乳頭狀癌癌周組織作對照組?！　?3結(jié)果判斷nm23H1免疫組化染色的陽性判定，細胞漿和部分細胞核著棕色顆粒者為陽性，不著色者為陰性。結(jié)果以顯微鏡下每張切片取5個高倍視野（200×），數(shù)每個高倍視野下的陽性細胞所占比例，并依據(jù)每高倍視野中陽性細胞率0%為陰性（-），10%～25%為弱陽性（+），26%～50%為中陽性（++），>50%為強陽性（+++），其中弱陽性和中陽性為低表達，強陽性為高表

7、達［2］。CD31結(jié)果判斷及MVD計算：CD31的陽性表達產(chǎn)物主要分布于血管內(nèi)皮細胞的胞漿內(nèi)，呈棕黃色或棕褐色染色。每張切片在脈管高密度區(qū)，隨機選取5個視野（200×，0075mm2），分別計數(shù)后，取平均值，作為該例腫瘤的MVD?！　?4統(tǒng)計學處理計量資料兩組間比較用t檢驗，計數(shù)資料兩組間比較用χ2檢驗。采用SPSS130統(tǒng)計軟件進行Spearmant等級相關(guān)分析檢驗?！　?結(jié)果　　21nm23H1在甲狀腺癌中的表達nm23H1陽性表達產(chǎn)物主要分布于細胞質(zhì)