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1、胎盤組織中HumanAnnexinV的表達(dá)及與HBV感染的關(guān)系作者:張潤駒,岳亞飛,李淑紅,石紫云,葉峰,歸巧娣,石磊【關(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒(HBV)摘要:目的觀察HumanAnnexinV(HAV)在胎盤組織中的表達(dá),并探討其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盤中的可能作用。方法用免疫熒光染色法檢測早孕絨毛,中孕和足月胎盤絨毛中HAV的表達(dá);用免疫熒光雙重染色法觀察HBV感染的胎盤組織HBsAg和HAV的分布及相互關(guān)系。結(jié)果①所有的標(biāo)本絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞、絨毛間質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞都有HAV的存在。②HBV感染的胎盤絨毛中只要是HBsAg陽性
2、的部位同時一定有HAV的表達(dá),陽性信號存在于滋養(yǎng)層細(xì)胞、絨毛間質(zhì)細(xì)胞、絨毛毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中。結(jié)論HAV可能作為HBsAg的特異性受體介導(dǎo)了HBV與胎盤組織各層細(xì)胞的粘附、內(nèi)化等過程并最終導(dǎo)致了HBV對胎盤的感染?! £P(guān)鍵詞:胎盤;病毒受體;人膜聯(lián)蛋白(HAV);乙型肝炎病毒(HBV) ExpressionofHumanAnnexinVinplacentaanditseffectsonplacentainfectedbyHBV ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofHumanAnne
3、xinV(HAV)inplacentaandtoexplorethepossibleroleofitinHBVinfectedplacenta.MethodsHAVwasdetectedinplacentasthathadbeenprovedinfectedwithHBVwithimmunofluorescenceassaysandthedoublelabelimmunofluorescenceassayswereusedtodetectHBsAgandHAVinthesameplacenta.Confocallaserscanningmi
4、croscopewasalsousedtoobservetheresult.Results①HAVwasexpressedonearlyperiod,metaphaseandtermvilli.Itwasexpressedontrophoblasticcell,interstitialcellandendotheliumcellofinterstitialbloodvesselsofvilli.TheresulthadnorelationwiththeinfectionofHBVandthetimeofpregnancy.②Thedoubl
5、elabelimmunofluorescenceassaysshowedthepositiveareaofHBsAginplacentasaccordedwiththeareaofHAV.ConclusionHAVmediatedHBVintocellsofplacentaasspecificreceptorandresultedininfection. KEYWORDS:placenta;viralreceptor;humanannexinV(HAV);hepatitisBvirus(HBV)5 我國為乙肝高感染區(qū),HBsAg攜帶者高
6、達(dá)1.2億,其中50%以上為母嬰傳播所致。而HBV宮內(nèi)感染是母嬰傳播的重要途徑,感染率可高達(dá)40%以上[1]。目前普遍認(rèn)為HBV宮內(nèi)感染主要經(jīng)胎盤感染而致,即孕婦絨毛間隙血中的HBV感染絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞、絨毛間質(zhì)細(xì)胞、絨毛毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞后感染胎兒[2],但具體機(jī)理現(xiàn)仍不清楚。HBV感染肝臟的研究表明,HBV也同其他的病毒一樣,首先通過病毒外膜蛋白識別肝臟細(xì)胞質(zhì)膜上的受體[3],和靶細(xì)胞上的受體結(jié)合,附著于細(xì)胞表面,在病毒受體的介導(dǎo)下,進(jìn)入細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制。有研究發(fā)現(xiàn)人膜聯(lián)蛋白V(HumanAnnexinV,HAV)是肝細(xì)胞膜上與HBV感染有關(guān)的
7、受體[4]。并且在胎盤組織中也檢測到HAV[5],那么HBV感染胎盤各類細(xì)胞是否也與HAV有關(guān)?為此,我們對正常的不同孕期胎盤和足月HBV感染的胎盤中HAV及HBsAg表達(dá)應(yīng)用免疫熒光雙標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行檢測,以了解其分布和相互關(guān)系,并探討HAV在HBV感染胎盤中的可能作用?! ?材料與方法 1.1材料2003年3月至2004年3月,收集在西安交通大學(xué)第一醫(yī)院住院分娩的產(chǎn)前檢查及復(fù)查血清中HBsAg陽性(其中大三陽12例,小三陽15例)孕婦足月分娩胎盤27例。同時隨機(jī)收集3例HBV血清標(biāo)志物陰性的正常足月胎盤;另外取人工流產(chǎn)及住院治療性中期引產(chǎn)
8、的HBV血清標(biāo)志物陰性的孕婦絨毛和胎盤各3例。鼠抗人乙肝病毒表面抗原(HBsAg)單克隆抗體(一抗)、FITC標(biāo)記兔抗山羊IgG(二抗)、羅丹明標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(二抗)購于北