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1、離心洗滌對精子形態(tài)的影響作者：梁琳，趙曉曦，王麗巖，宋靜慧，陳秀娟【摘要】目的探討常規(guī)精子形態(tài)學(xué)染色中離心洗滌步驟對分析結(jié)果的影響。方法47例人精液標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)檢測密度及活力后，分別在離心前后涂片，應(yīng)用快速蘇木素-伊紅染色法進(jìn)行染色，檢測精子頭部、體部、尾部畸形率。對比精子畸形指數(shù)(SDI)和畸形精子指數(shù)(TZI)是否受到離心洗滌的影響。結(jié)果離心洗滌后的精子頭部畸形率和正常精子率較離心前直接涂片無顯著差異，體部畸形率、尾部畸形率、SDI、TZI各指數(shù)在離心前后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不經(jīng)過離心洗滌精漿而直接采用WHO推薦的制備涂片方法的精液標(biāo)本染色后碎屑較多，但
2、是不影響分析。結(jié)論精子形態(tài)學(xué)分析中離心精液對精子畸形指數(shù)(SDI)和畸形精子指數(shù)(TZI)有影響。但是不影響形態(tài)正常精子的比率。精液不經(jīng)離心洗滌直接涂片適用于非嚴(yán)重少精及黏稠度低的標(biāo)本?！娟P(guān)鍵詞】精子;離心;洗滌;形態(tài);染色 [Abstract]ObjectiveToevaluatetheinfluenceofspermwashingonaccuracyofspermmorphometry.MethodsSemenanalyseswerecarriedoutaccordingtotheWorldHealthOrganizationmanualfor47sub
3、fertilemen，filmpreparationbeforeandaftercentrifugatewashing，thenuseHEdyeing，andassessthedeformityratioofspermhead,body,tailandSDI,TZI.ResultsThediversityratioofdeformedheadandnormalspermhavenosignificantdifferencebeforeandafterthewashingprocedure，buttheratioofbody,tailabnormity，SDI，
4、TZIhavedisparity，andthedifferencehavestatisticalsignificance.ThedirectfilmpreparationrecommendbyWHOwithoutwashinghavemoreforeignmatterafterstaining,butdidn’tinfluenceanalyses.ConclusionTheseresultsindicatethatspermwashingbycentrifugateinmorphologyanalyseshasimpactonSDIandTZI.Buthave
5、noinfluenceontheratioofeumorphismsperm.Thedirectfilmpreparationisapplicableforthenon-severityoligospermatismandthespecimenofhypo-viscidity. [Keywords]sperm;centrifugate;washing;morphology;staining 在不孕夫婦中，男性因素導(dǎo)致的不孕約為25%～40%。常規(guī)精液分析在評(píng)價(jià)精子質(zhì)量方面應(yīng)用廣泛，精子形態(tài)作為精液參數(shù)的組成部分，是反映精液質(zhì)量的重要指標(biāo)[1]。精子功能與精
6、子的正常形態(tài)密切相關(guān)。而畸形精子的增加，也是男性生育力受損的標(biāo)志之一。正常形態(tài)率越低精子凋亡率越高。將精液常規(guī)與精子形態(tài)學(xué)分析相結(jié)合，有助于提高男性不育癥的診斷率[2]。5 精子形態(tài)在評(píng)估精子受精能力及預(yù)測輔助生殖技術(shù)治療結(jié)局方面，也發(fā)揮了很大作用。精子形態(tài)越差，其自然妊娠的能力就越低。由于各實(shí)驗(yàn)人員所采用的標(biāo)準(zhǔn)及判斷不一致，在對精子形態(tài)分析方面結(jié)果出入頗大[3]。但是對精子形態(tài)做出準(zhǔn)確的評(píng)估，對需要采用輔助生殖技術(shù)來滿足其生育要求的畸形精子癥患者非常重要，有助于找到適合的精液處理方法及行輔助生殖技術(shù)治療時(shí)選擇最佳的受精方式[4]。本研究通過統(tǒng)計(jì)精子化驗(yàn)中各
7、項(xiàng)畸形指標(biāo)，為其形態(tài)學(xué)檢測的標(biāo)準(zhǔn)化提供思路?！ ?資料與方法 1.1精液標(biāo)本47例來自本中心就診的男性不育患者，年齡在24～39歲，禁欲2～7天，手淫法取精。精液常規(guī)檢查參考世界衛(wèi)生組織《精液分析手冊》(第4版)。入選標(biāo)本的精子密度在(59.42±39.67)×106/ml?！ ?.2實(shí)驗(yàn)方法 1.2.1標(biāo)本制備精液標(biāo)本在常規(guī)分析后直接涂片，若密度檢查小于20×106/ml，取10～20μl精液直接涂片;若密度高于20×106/ml，取5μl精液在載玻片上拉薄，空氣中自然干燥。同份標(biāo)本加入5倍體積的生理鹽水，在800g下離心10min去除精漿，輕彈試管使離
8、心后的精子團(tuán)重新懸浮于鹽水中，取20～
