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《離心洗滌對(duì)精子形態(tài)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、離心洗滌對(duì)精子形態(tài)的影響.L.編輯。作者：梁琳，趙曉曦，王麗巖，宋靜慧，陳秀娟【摘要】目的探討常規(guī)精子形態(tài)學(xué)染色中離心洗滌步驟對(duì)分析結(jié)果的影響。方法47例人精液標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)密度及活力后，分別在離心前后涂片，應(yīng)用快速蘇木素-伊紅染色法進(jìn)行染色，檢測(cè)精子頭部、體部、尾部畸形率。對(duì)比精子畸形指數(shù)(SDI)和畸形精子指數(shù)(TZI)是否受到離心洗滌的影響。結(jié)果離心洗滌后的精子頭部畸形率和正常精子率較離心前直接涂片無(wú)顯著差異，體部畸形率、尾部畸形率、SDI、TZI各指數(shù)在離心前后的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不經(jīng)過(guò)離心洗滌精漿而直接采用ethodsSem
2、enanalysesanualfor47subfertilemen，filmpreparationbeforeandaftercentrifugateityratioofspermhead,body,tailandSDI,TZI.ResultsThediversityratioofdeformedheadandnormalspermhavenosignificantdifferencebeforeandaftertheity，SDI，TZIhavedisparity，andthedifferencehavestatisticalsigni
3、ficance.Thedirectfilmpreparationremendbyatterafterstaining,butdidn’tinfluenceanalyses.ConclusionTheseresultsindicatethatspermorphologyanalyseshasimpactonSDIandTZI.Buthavenoinfluenceontheratioofeumorphismsperm.Thedirectfilmpreparationisapplicableforthenon-severityoligosper
4、matismandthespecimenofhypo-viscidity. [Key;centrifugate;orphology;staining 在不孕夫婦中，男性因素導(dǎo)致的不孕約為25%～40%。常規(guī)精液分析在評(píng)價(jià)精子質(zhì)量方面應(yīng)用廣泛，精子形態(tài)作為精液參數(shù)的組成部分，是反映精液質(zhì)量的重要指標(biāo)[1]。精子功能與精子的正常形態(tài)密切相關(guān)。而畸形精子的增加，也是男性生育力受損的標(biāo)志之一。正常形態(tài)率越低精子凋亡率越高。將精液常規(guī)與精子形態(tài)學(xué)分析相結(jié)合，有助于提高男性不育癥的診斷率[2]?！ 【有螒B(tài)在評(píng)估精子受精能力及預(yù)測(cè)輔助生殖技術(shù)治療
5、結(jié)局方面，也發(fā)揮了很大作用。精子形態(tài)越差，其自然妊娠的能力就越低。由于各實(shí)驗(yàn)人員所采用的標(biāo)準(zhǔn)及判斷不一致，在對(duì)精子形態(tài)分析方面結(jié)果出入頗大[3]。但是對(duì)精子形態(tài)做出準(zhǔn)確的評(píng)估，對(duì)需要采用輔助生殖技術(shù)來(lái)滿足其生育要求的畸形精子癥患者非常重要，有助于找到適合的精液處理方法及行輔助生殖技術(shù)治療時(shí)選擇最佳的受精方式[4]。本研究通過(guò)統(tǒng)計(jì)精子化驗(yàn)中各項(xiàng)畸形指標(biāo)，為其形態(tài)學(xué)檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化提供思路。 1資料與方法 1.1精液標(biāo)本47例來(lái)自本中心就診的男性不育患者，年齡在24～39歲，禁欲2～7天，手淫法取精。精液常規(guī)檢查參考世界衛(wèi)生組織《精液分析手冊(cè)
6、》(第4版)。入選標(biāo)本的精子密度在(59.42±39.67)×106/ml?！ ?.2實(shí)驗(yàn)方法 1.2.1標(biāo)本制備精液標(biāo)本在常規(guī)分析后直接涂片，若密度檢查小于20×106/ml，取10～20μl精液直接涂片;若密度高于20×106/ml，取5μl精液在載玻片上拉薄，空氣中自然干燥。同份標(biāo)本加入5倍體積的生理鹽水，在800g下離心10min去除精漿，輕彈試管使離心后的精子團(tuán)重新懸浮于鹽水中，取20～40μl涂片。光鏡下觀察精子密度，以無(wú)精子重疊為準(zhǔn)，過(guò)稀或過(guò)密需重新涂片。 1.2.2標(biāo)本染色方法采用快速蘇木素-伊紅染色法(HE)染色[5
7、]，干燥后的涂片在90%酒精中固定30min，流水沖洗后將涂片在蘇木素中染5min，再次沖洗后在伊紅溶液中染色5min，流水沖洗玻片后室溫干燥。在油鏡視野下觀察并進(jìn)行計(jì)數(shù)?！ ?.2.3分類標(biāo)準(zhǔn)采用Kruger嚴(yán)格精子評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，每份標(biāo)本連續(xù)計(jì)數(shù)200個(gè)精子，分別記錄頭部、體部、尾部畸形精子的百分率和正常形態(tài)精子比率。其中頭部畸形中將大頭畸形和小頭畸形分別標(biāo)記。最后統(tǒng)計(jì)精子畸形指數(shù)和畸形精子指數(shù)。 1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，各項(xiàng)畸形以百分率表示，均數(shù)比較用t檢驗(yàn)。P<
8、0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！ ?結(jié)果 47例非嚴(yán)重少精患者在離心前后分別計(jì)數(shù)頭、體、尾部畸形精子比例，結(jié)果如表1所示。正常形態(tài)精子比率在離心洗滌前后無(wú)顯著差異(P>0.01)。頭部畸
