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1、中藥地椒乙醇提取物對(duì)人白血病細(xì)胞增殖的抑制作用作者：孫震曉，張英慧，程霜，馬清溫，郭善利，張金?！娟P(guān)鍵詞】乙醇提取物［摘要］目的：篩選中藥地椒乙醇提取物的抗腫瘤活性成分，探討其可能的抗腫瘤作用機(jī)制。方法：從野生地椒乙醇提取物中分離得到乙酸乙酯、正丁醇和丙酮3種萃取組分，以體外培養(yǎng)的人白血病細(xì)胞株K562和HL60作為研究對(duì)象。將各萃取組分與腫瘤細(xì)胞作用一定時(shí)間后，計(jì)數(shù)存活腫瘤細(xì)胞數(shù)，分析藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的影響，考察各組分對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。以去甲斑蝥素作為陽性對(duì)照組，通過形態(tài)學(xué)分析等方法，研究中藥地椒乙醇
2、提取物可能的抗腫瘤作用機(jī)制。結(jié)果：中藥地椒乙酸乙酯萃取物對(duì)人白血病細(xì)胞株K562和HL60均有顯著的抑制作用，且呈藥物濃度依賴性，并可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；而正丁醇和丙酮萃取物對(duì)兩種白血病細(xì)胞均無顯著的抑制作用。結(jié)論：體外實(shí)驗(yàn)表明，乙酸乙酯萃取物是中藥地椒乙醇提取物中主要的抗腫瘤活性成分?！ 。坳P(guān)鍵詞］地椒;乙醇提取物;乙酸乙酯萃取物;抗腫瘤藥;K562;HL60 AntitumoreffectofethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelakonhumanleukemia
3、cellline ABSTRACTObjective:ToscreentheantitumorfractionofethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelakandinvestigateitsantitumoreffectonhumanleukemiacellline.Methods:Ethylacetate,nbutanolandacetonefractionswereseparatedfromtheethanolextractsofwildThymusquinque
4、costatusCelak.GrowthinhibitingeffectsoftheseextractsonhumanleukemiacelllinesK562andHL60weredeterminedbylivecellcountingandcellgrowthcurveanalysis.Thepossibleantitumormechanismwasstudiedbymorphologicalanalysiswithnorcantharidinasapositivecontrol.Results:Ethylace
5、tatefractioncouldsignificantlyinhibittheproliferationsofK562andHL60cells,andtheinhibitingeffectdependedontheconcentrationofethylacetatefraction.EthylacetatefractioncouldinduceapoptosisofK562andHL60cells.Thenbutanolandacetonefractionshadnosignificantinhibitingef
6、fectonK562andHL60cells.Conclusion:EthylacetatefractionisthemajorantitumorfractioninethanolextractsfromThymusquinquecostatusCelak. KEYWORDSThymusquinquecostatusCelak;ethanolextract;ethylacetatefraction;antineoplasticagents;K562;HL606 中藥地椒（Thymusquinquecostatus
7、Celak），又名百里香，為唇形科百里香屬植物，屬矮小半灌木，莖匍匐生長(zhǎng)，常生長(zhǎng)于山坡和海邊低丘上［1,2］。藥用其地上部分，陰干或鮮用，味辛、性溫，有小毒，有祛風(fēng)解表、行氣止痛之功［3］。民間單用地椒或配伍其他中藥治療癌癥，確有一定的療效。我們?cè)趯?duì)地椒進(jìn)行有效成分提取、分離及分析的基礎(chǔ)上［4,5］，以小鼠移植性腫瘤為模型，研究了地椒的抗腫瘤作用及其對(duì)機(jī)體免疫功能的影響［6］。隨后，我們又以體外培養(yǎng)的人紅白血病K562細(xì)胞和人早幼粒白血病HL60細(xì)胞為研究對(duì)象，進(jìn)一步篩選地椒乙醇提取物中的抗腫瘤活性成分，并闡明其可能
8、的抗腫瘤作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下?！ ?材料與方法 1.1實(shí)驗(yàn)材料（1）野生地椒采自山東省平邑縣山區(qū)，全草陰干后粉碎，過40目篩。經(jīng)乙醚浸泡24h后，35℃回流3h抽濾，去濾液，濾渣用75%酒精溶液冷浸24h，72℃回流3h，抽濾得乙醇提取物溶液。乙醇提取物進(jìn)一步用乙酸乙酯、正丁醇、丙酮逐級(jí)萃取，獲得地椒乙酸乙酯、正丁醇和丙酮萃取物3個(gè)組分，冷凍
