資源描述:
《吡格列酮對ad模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的保護作用研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、吡格列酮對AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的保護作用研究 摘要:目的研究吡格列酮(Pioglitazone,Pio)對Aβ25-35所致的大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的保護作用。方法雙側(cè)海馬CA1區(qū)注射β-淀粉樣蛋白(Aβ25-35)建立AD大鼠模型。用不同劑量吡格列酮(40、80mg/kg)灌胃4w后,進行Morris水迷宮定位航行和空間探索實驗,觀察吡格列酮對AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的保護作用。結(jié)果海馬CA1區(qū)注射Aβ25-35后,模型組逃避潛伏期明顯延長,穿越平臺次數(shù)明顯減少,平臺滯留時間明顯縮短;吡格列酮組與模型組
2、相比較,逃避潛伏期明顯縮短,穿越平臺次數(shù)明顯增多,平臺滯留時間明顯延長;吡格列酮組較正常對照組無明顯差異。結(jié)論海馬CA1區(qū)注射Aβ25-35可導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,吡格列酮對β淀粉樣蛋白引起的大鼠學(xué)記憶障礙有改善作用?! £P(guān)鍵詞:吡格列酮;β淀粉樣蛋白;海馬 隨著人口老齡化的進展,阿爾茨海默?。ˋD)的患病率逐年遞增,危害性不斷增加。降低AD的發(fā)病率,進行有效地防治成為老年神經(jīng)病學(xué)研究領(lǐng)域不容忽視的問題。AD典型病理改變?yōu)槔夏臧撸⊿P)、神經(jīng)原纖維纏結(jié)(NFT)及神經(jīng)元丟失。β淀粉樣蛋白(Aβ)是老年斑
3、的主要成分,其過量生成和沉積,會引起一系列反應(yīng),導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶減退,認知障礙等臨床表現(xiàn),因此,β淀粉樣蛋白被認為是AD發(fā)病機制中的起始因素和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]。Aβ降解減少或生成增加均可導(dǎo)致Aβ的異常沉積,導(dǎo)致AD的發(fā)生[2]。吡格列酮屬于噻唑烷二酮類藥物,是一種新型胰島素增敏劑,能夠增強細胞對胰島素作用的敏感性,減輕胰島素抵抗,主要用于2型糖尿病及胰島素抵抗的治療。一些研究表明,吡格列酮可過激活過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)有潛在治療神經(jīng)變性疾病的可能[3]。本實驗采用雙側(cè)海馬CA1區(qū)注射β淀粉樣
4、蛋白造模方式,研究吡格列酮對大鼠的學(xué)習(xí)記憶的改善作用?! ?動物與材料 雄性Sprague-Dawley大鼠,340~380g,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部動物實驗中心提供(動物合格證號:SCXK(陜)2012-003)。β淀粉樣蛋白(美國Sigma公司,A4559-MG),用DMEM溶解,37℃孵育5d,使其成為聚集狀態(tài)。吡格列酮(日本Takera公司,純度>99%)。腦立體定位儀(NarishigeSN-3,日本);Morris水迷宮(成都泰盟科技有限公司,MT-200,四川)?! ?方法 SD大鼠40只
5、,隨機分為4組,即對照組,模型組,低劑量吡格列酮治療組,高劑量吡格列酮治療組,每組10只。大鼠用10%水合氯醛(4mL/kg)腹腔注射麻醉后,頭顱固定在腦立體定位儀上,頭皮備皮,消毒手術(shù)區(qū)皮膚,無菌下操作,做正中切口暴露前囟,參照大鼠腦立體定位圖譜,以前囟為原點,向后3.0mm,旁開2.0mm,為穿刺點,鉆開顱骨,自腦表面用微量進樣器進針3.0mm至海馬。對照組每側(cè)海馬注射生理鹽水3μl,其余3組每側(cè)海馬注射5μgAβ25-353μl,緩慢注射后,停針5min。縫合,保暖觀察至動物蘇醒?! 〗:蟮?d開
6、始,低、高劑量組分別給予吡格列酮40mg/kg、80mg/kg,溶于3ml生理鹽水中灌胃。對照組和模型組給予等量生理鹽水。灌胃4w?! orris水迷宮實驗:水迷宮為直徑120cm,高50cm,水深30cm,逃逸平臺位于水下1cm,水溫控制在(25±2)℃,平臺置于第四象限,從4個象限等距標(biāo)記4個入水點,①定位航行試驗(placenavigationtest):治療結(jié)束后第1d開始,共5d,每天分上、下午各4次,分別從4個不同象限,將大鼠頭朝池壁放入水中,記錄其2min內(nèi)尋找平臺所需時間(逃避潛伏期)。
7、若大鼠入水后2min內(nèi)未能找到平臺,則將其置于平臺上并停留10s,引導(dǎo)學(xué)習(xí)記憶,逃避潛伏期記錄為120s。②空間探索試驗(spatialprobetest):實驗第6d撤除平臺,將動物將大鼠面向池壁從4個不同象限放入水池,測試2min內(nèi)跨越原平臺位置的次數(shù)。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS16.0進行分析,采用均值比較、一維方差分析統(tǒng)計學(xué)處理,以P<0.05來表示差異的顯著性?! ?結(jié)果 Morris水迷宮實驗顯示,對照組潛伏期為(12.74±1.74)s,模型組潛伏期延長為(38.43±3.87)s,對照組穿越平臺次
8、數(shù)為7.25±3.57,模型組穿越平臺次數(shù)減少為3.47±1.26,對照組的平臺滯留時間為(2.5±1.27)s,模型組平臺滯留時間縮短為(1.03±0.61)s。對照組與模型組有顯著性差異(P<0.05)?! ∵粮窳型委熃M與模型組比較,低劑量組的潛伏期為(20.19±2.51)s、高劑量組的潛伏期(22.28±2.19)s,較模型組的潛伏期(38.43±3.87)s明顯縮短(P<0.05);低劑量組穿越平臺次數(shù)為4.95±