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《組蛋白去甲基化酶Jmjd3調(diào)節(jié)牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào):R781.3單位代碼:10159密級(jí):公開(kāi)學(xué)號(hào):201521170碩士學(xué)位論文(臨床醫(yī)學(xué)碩士科學(xué)學(xué)位)中文題目:組蛋白去甲基化酶Jmjd3調(diào)節(jié)牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的研究英文題目:TheroleofhistonedemethylaseJmjd3regulatingperiodontalligamentcellsdifferentiateintoosteoblasts論文作者:于博指導(dǎo)教師:仇麗鴻教授學(xué)科專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)完成時(shí)間:2018年2月中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文組蛋白去甲基化酶Jmjd3調(diào)節(jié)牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的研究Theroleof
2、histonedemethylaseJmjd3regulatingperiodontalligamentcellsdifferentiateintoosteoblasts論文作者于博指導(dǎo)教師仇麗鴻教授申請(qǐng)學(xué)位醫(yī)學(xué)碩士培養(yǎng)單位口腔醫(yī)學(xué)院一級(jí)學(xué)科口腔醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向牙體牙髓病學(xué)論文起止時(shí)間2017年10月—2018年2月論文完成時(shí)間2018年2月中國(guó)醫(yī)科大學(xué)(遼寧)2018年2月I中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:本論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,論文中除加以標(biāo)注的內(nèi)容外,不包含其他人或機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫
3、過(guò)的研究成果,也不包含本人為獲得其他學(xué)位而使用過(guò)的成果。對(duì)本研究提供貢獻(xiàn)的其他個(gè)人和集體均已在文中進(jìn)行了明確的說(shuō)明并表示謝意。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。論文作者簽名:日期:2018年5月9日中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的原件、復(fù)印件和電子版,允許學(xué)位論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密(),在年后解密適用本授權(quán)書(shū)。(保
4、密:請(qǐng)?jiān)诶ㄌ?hào)內(nèi)劃“√”)論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:2018年5月9日日期:2018年5月9日II中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目的:慢性根尖周炎是造成根尖周骨組織破壞的主要疾病之一,研究證實(shí)組蛋白甲基化與干細(xì)胞分化密切相關(guān)。本研究的目的是探討組蛋白去甲基化酶含十字形結(jié)構(gòu)域蛋白-3(Jumonjidomain-containing3,Jmjd3)對(duì)牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的影響。方法:來(lái)源于人乳牙的牙周膜細(xì)胞系SH-9細(xì)胞在含50μg/ml抗壞血酸(L-ascorbicacid,L-ASA)和6mMβ-甘油磷酸鹽(β-glycerophosphate
5、,β-GP)的促成骨分化培養(yǎng)液中培養(yǎng)(0、3、7、10d),采用real-timeRT-PCR檢測(cè)SH-9細(xì)胞中Jmjd3及成骨分化標(biāo)志基因Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(runt-relatedtranscriptionfactor2,RUNX2)、Osterix和骨鈣素(Osteocalcin,OCN)mRNA的表達(dá),采用WesternBlot檢測(cè)SH-9細(xì)胞中Jmjd3蛋白的表達(dá)。以不同濃度(0、1、10μM)Jmjd3去甲基化酶活性抑制劑GSK-J4預(yù)處理細(xì)胞2h后,在促成骨分化培養(yǎng)液中培養(yǎng)SH-9細(xì)胞3d,real-timeRT-PCR檢測(cè)GSK-J4
6、對(duì)成骨分化標(biāo)志基因RUNX2、Osterix、OCNmRNA表達(dá)的影響。采用小干擾RNA(SmallinterferingRNA,siRNA)轉(zhuǎn)染SH-9細(xì)胞,建立對(duì)照組(siCont)和Jmjd3沉默組(siJmjd3),在促成骨分化培養(yǎng)液中培養(yǎng)3d后,real-timeRT-PCR檢測(cè)RUNX2、Osterix、OCNmRNA的表達(dá)。采用pH4.3、60mM茜素紅(AlizarinRedS,ARS)染色,檢測(cè)沉默Jmjd3后對(duì)細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)形成水平的影響。采用SPSS18.0軟件包對(duì)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析和Dunnettt檢驗(yàn)。結(jié)果:在促成骨分化培養(yǎng)后
7、,SH-9細(xì)胞中成骨分化標(biāo)志基因RUNX2、Osterix、OCNmRNA表達(dá)增加,Jmjd3的表達(dá)顯著增加,7d時(shí)mRNA的表達(dá)量最高(P<0.01)。Jmjd3蛋白表達(dá)也增加,7d時(shí)蛋白表達(dá)量最高(P<0.01)。在促成骨分化培養(yǎng)液中加入GSK-J4后,RUNX2、Osterix、OCNmRNA表達(dá)受到抑制(P<0.05)。采用小干擾RNA轉(zhuǎn)染SH-9細(xì)胞,沉默Jmjd3時(shí),成骨分化標(biāo)志基因RUNX2、Osterix、OCN的表達(dá)受到抑制(P<0.01),細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)形成水平降低。結(jié)論:Jmjd3在牙周膜細(xì)胞向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中發(fā)揮正向調(diào)節(jié)作用且
8、與Jmjd3酶活性相關(guān)。關(guān)鍵詞:組蛋白去甲基化酶;Jmjd3;成骨分化;牙周膜細(xì)