白花丹參和紫花丹參生化標(biāo)記分析

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOI．．20NO．1時(shí)珍同醫(yī)圍藥2009年第20卷第1期白花丹參和紫花丹參生化標(biāo)記分析韓琳娜1，李紅梅2(1．山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250035；2．山東省科學(xué)院，山東濟(jì)南250035)摘要：目的分析白花丹參和紫花丹參在蛋白水平的遺傳差異。方法利用葉片過氧化物酶和種子貯藏蛋白兩種生化標(biāo)記對(duì)白花丹參和紫花丹參進(jìn)行了分析。結(jié)果同工酶分析表明，兩種丹參間過氧化物酶同工酶譜存在差異；貯藏蛋白分析表明，丹參

2、種子蛋白主要是以鹽溶性蛋白為主，水溶蛋白和醇溶蛋白較少，堿溶性蛋白更少；兩種丹參種子貯藏蛋白譜帶之間的差異性不明顯。結(jié)論二者在蛋白水平存在一定差異。關(guān)鍵詞：紫花丹參；白花丹參；貯藏蛋白；同工酶；聚丙烯酰胺凝膠電泳法；生化標(biāo)記中圖分類號(hào)：R284．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1008-0805(2009)01-0211旬1BiochemicalMarkerCharacterAnalysisofWhiteFlowerDanshenandVioletFlowerDanshenHANLin．nal，LiHo

3、ng—mel‘2(1．ShandongUniversityofTraditionalChineseMedwine，Jinan250355，China；2．ShandongAcademyofSci—ences．Jinan250014，China)Abstract：ObjectiveToanalyzewhiteflowerDanshenandvioletflowerDanshenintheir2biochemicalmarkers(perodiaseandstorageprotein)．Methods

4、Twobiochemicalmakersofperodiaseandstorageproteinwereanalyzed．Result7FherewasdifferenceinperoxidasePAGE—bandingpateerns．SeedproteinsofwhiteflowerDanshenandvioletflowerdanshenwererespectivelyextrac-tedusingdistilledH2O，2．5％NaCI，0．2％NaOHand75％alcoh01．Bas

5、edonacrylamidegelelectrophoresis，mostofstorageproteinsweresalt—soluble．water—solubleandaclohol—solubleproteinswasless．Therewasalittlealkali—solubleprotein．ConclusionThereisdifferenceinstorgeproteinbetweenwhiteflowerDanshenandvioletflowerDanshen．Keywor

6、ds：WhiteflowerDanshen；VioletflowerDanshen；Storageprotein；Isozyme；PAGE；Biochemicalmarker丹參Salviamiltiorrhiza味苦、性微寒，功能活血祛淤，安神寧心，排膿止痛?，臨床應(yīng)用范圍較廣。就』t形態(tài)學(xué)性狀而言，可分白花、紫花兩種。傳統(tǒng)育種巾的形態(tài)學(xué)鑒定只能揭示外觀差異且受環(huán)境影響較大，不能完傘揭示品種問的遺傳差異。?；瘶?biāo)記是以基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)作為遺傳標(biāo)記，主要包括貯藏蛋白、同工酶和等位酶標(biāo)記舊J。生化標(biāo)

7、記分析是一種快速、簡(jiǎn)便、有效的遺傳檢測(cè)手段。作為牛化標(biāo)記的同工酶、非酶形式的蛋白質(zhì)，已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用丁遺傳種質(zhì)的分離、篩選、品種鑒定以及生物多樣性、雜種優(yōu)勢(shì)的研究中p“J。本研究利用貯藏蛋白和過氧化物酶同工酶兩種生化標(biāo)記對(duì)白花丹參和紫花丹參進(jìn)行了分析，以期了解其在蛋白質(zhì)性狀水平的遺傳差異，為種質(zhì)資源的收集和二者藥效成分上的比較提供理論依據(jù)。1材料與方法1．1材料供試材料白花丹參和紫花丹參均由山東中醫(yī)藥大學(xué)藥圃提供。1．2方法1．2．1過氧化物酶提取稱取lg鮮材料，冰浴研磨，加入1ml稀釋4倍的濃縮

8、膠緩沖液(pH=6．7)，冰浴超聲提取15min，8000r／min，o氣：離心20min。上清液加入等體積40％蔗糖溶液混勻，作為供試溶液，可在4℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?．2．2蛋白質(zhì)提取蛋白質(zhì)提取分為分步提取和一次性提取兩種。分步提取主要研究丹參種子中各類蛋白質(zhì)的組成及比例；一次性提取主要比較在不同提取液的情況下，蛋白質(zhì)譜帶的帶型。分步提取方法：取丹參種子粉碎后稱取0．1g，加入600“l(fā)水，在60℃水浴中提取40min，10000r／min離心5min，取上清液備用，再用水按同樣