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《淺析基質(zhì)細(xì)胞衍生因子在哮喘小鼠氣道中的表達(dá)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、淺析基質(zhì)細(xì)胞衍生因子在哮喘小鼠氣道中的表達(dá)【摘要】目的觀察基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal-derivedfactor-1,SDF-1)在雞卵清蛋白(OVA)誘導(dǎo)小鼠哮喘模型中的表達(dá)，探索哮喘氣道重塑的發(fā)生機(jī)制。方法40只雌性SPF級(jí)C57BL/6小鼠，體重18～22g，隨機(jī)分為哮喘組和對(duì)照組。按照文獻(xiàn)方法建立OVA小鼠哮喘模型。兩組動(dòng)物于末次霧化結(jié)束后24h處死，取肺組織行病理切片，蘇木精-伊紅染色(HE)觀察肺臟的組織病理學(xué)變化;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、免疫印跡法(Westernblot)、免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IH)技術(shù)檢測(cè)肺
2、組織SDF-1的表達(dá)。結(jié)果①哮喘組支氣管上皮細(xì)胞脫落、氣道壁增厚，細(xì)支氣管和血管周圍有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn);②哮喘組肺組織SDF-1在RT-PCR、Westernblot及IH中均為陽(yáng)性表達(dá)，而對(duì)照組則否。結(jié)論小鼠哮喘時(shí)肺組織分泌大量細(xì)胞趨化因子SDF-1，可能是哮喘氣道重塑的重要因素之一。【關(guān)鍵詞】基質(zhì)細(xì)胞衍生因子;哮喘;氣道重塑ABSTRACT:ObjectiveTostudytheexpressionofstromal-derivedfactor-1(SDF-1)intheairwayofmicewithallergicasthmainducedbyovalbumin(OVA)soa
3、stoexplorethemechanismofasthmaticairwayfemaleC57BL/miceofSPFgradewererandomlydividedintoasthmagroupandcontrolgroupwith0ineach.Miceweresensitizedandchallengedwithovalbumintoestablishtheasthmaticmodel.Allthemicewerekilledhoursafterthelastaerosolisation.Theparaffinembeddedsectionsoflungtissueswere
4、stainedwithhematoxylinandeosin(HE)foranalyzingpathologicalchanges.SDF-1mRNAextractedfromlungtissueswasassessedbyRT-PCRwhileSDF-1protEinextractedfromlungtissueswasassessedbyWesternblotandimmunohistochemistry(IH).Results①Afterrepeatedallergenchallenge,obviousinfiltrationofinflammatorycellsandprol
5、iferationofgobletcellsandsmoothmusclesappearedinmousebronchi.②AccordingtoRT-PCRandWesternblotandIHresults,theexpressionofSDF-1waspositiveinasthmagroupbutnegativeincontrollargeamountofSDF-1issecretedinthelungtissuesinasthmaticmice,whichmaybeoneofthecriticalfactorsinasthmaticairwayremodeling.KEYW
6、ORDS:stromal-derivedfactor-1;asthma;airwayremodeling支氣管哮喘是一種慢性氣道炎癥，伴有氣道高反應(yīng)性和氣道重塑，而氣道重塑則是一個(gè)在慢性炎癥基礎(chǔ)上的異常損傷修復(fù)過(guò)程?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal-derivedfactor-1,SDF-1)是由基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種CXC型趨化因子。近年來(lái)研究表明，基質(zhì)細(xì)胞衍生因子對(duì)組織或器官的創(chuàng)傷、炎癥損傷修復(fù)起到了重要的作用。但是，SDF-1與哮喘相關(guān)性的研究目前還未見(jiàn)報(bào)道，我們就此進(jìn)行了探討。 1材料與方法藥品與試劑雞卵清蛋白(OVA)Ⅴ級(jí)(美國(guó)GBICO公司);氫氧化鋁干粉(鄭州派尼化學(xué)試
7、劑公司);PBS(美國(guó)GBICO公司);SDF-1兔抗小鼠一抗(武漢博士德生物有限公司);過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗兔二抗(美國(guó)DAKO公司);ECL發(fā)光液(北京碧云天公司);兔抗小鼠內(nèi)參β-actin(北京博奧森公司);免疫組織化學(xué)試劑盒(美國(guó)DAKO公司)。方法哮喘模型的制備小鼠哮喘模型實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)[1]，略有變動(dòng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為40只雌性SPF級(jí)C57BL/6小鼠(第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供)，體重18～22g，隨機(jī)分為哮喘組和對(duì)照組。按照文獻(xiàn)方法[1]構(gòu)建哮喘模
