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《堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)牙周膜細(xì)胞內(nèi)核心蛋白多糖基因表達(dá)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)·研究報(bào)告·生物技術(shù)通報(bào)BIoTECHNoLoGYBULLETIN2008年第3期堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)牙周膜細(xì)胞內(nèi)核心蛋白多糖基因表達(dá)的影響程遠(yuǎn)1曾照芳1朱俊2(1重慶醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系，重慶400016；z西南交通大學(xué)土木工程學(xué)院，成都610031)摘要：利用外源性堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BasicFibroblastGrowthFactor，bFGF)刺激體外培養(yǎng)的人正常牙周膜細(xì)胞。采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT—PCR)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)decorin的基因表達(dá)的變化，研究bFGF對(duì)體外培養(yǎng)的人牙周膜細(xì)胞內(nèi)核心蛋白多糖(decorin)的作用，進(jìn)一步探討bFGF抑制I型膠原
2、的作用機(jī)制。發(fā)現(xiàn)bFGF刺激牙周膜細(xì)胞后能促進(jìn)牙周膜細(xì)胞的增殖，bFGF抑制decorin的合成是bFGF促進(jìn)牙周膜細(xì)胞增殖的重要調(diào)節(jié)因素之一。關(guān)鍵詞：牙周組織再生bFGF核心蛋白多糖EffectofBasicFibroblastGrowthFactorontheGeneExpressionofDecorinbyPeriodontalLigamentCellsinCultureChengYuanlZengZhaofan91ZhuJun2(1BepttrtmentofBiomedicalEngineering，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing40001
3、6；2SchoolofCivilEng．。SouthwestJiaotongUniversity，Chengdu610031)Abstract：ThisstudywastofindOUttheeffectsofExogenousbasicfibroblastgrowthFactor(bFGF)ondecorinofperiodontalligamentcells(PDLC)．GeneexpressionlevehwereanalyzedbyRT—PCR。toevaluatetheprincipleofbFGFoninhibitingtypeIcollagen．Theresearchshow
4、sthatbFGFenhacetheproliferationofPDLC，whichismainlycausedbybFGFinhibitingcompositionofdecorin．Keywords：PeriodontalregenerationbFGFDecorin牙周病是口腔兩大類主要疾病之一。在牙周組織傷口愈合的4種來(lái)源細(xì)胞中，只有牙周膜細(xì)胞(periodontalligamentcells，PDLCs)具有牙周組織再生的能力【ll。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)牙周膜細(xì)胞具有多種生物學(xué)作用，它可以促進(jìn)牙周膜細(xì)胞的增殖，促進(jìn)透明質(zhì)酸的合成，提高層粘連蛋白的mRNA水平，抑
5、制I型膠原纖維、堿性磷酸酶和彈性蛋白原的合成[21。1材料與方法1．1人正常牙周膜細(xì)胞的取材、培養(yǎng)和擴(kuò)增1．1．1原代培養(yǎng)【31在口腔外科門診收集正畸拔除的12～18歲青少年健康前磨牙．立即投人裝有無(wú)菌D．Hanks溶液的青霉素包裝瓶中，輕輕晃動(dòng)瓶子大約5一lOmin，將牙根面的血跡沖洗干凈，然后用無(wú)菌鑷子將牙齒夾出至另一個(gè)裝有無(wú)菌D—Hanks溶液的青霉素包裝瓶中，冰浴下帶到實(shí)驗(yàn)室。1．1．2傳代培養(yǎng)當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80％～90％匯合時(shí)，吸去培養(yǎng)液，0．25％胰蛋白酶：0．02％EDTA(1：1)的混和消化液消化細(xì)胞2～5min，至鏡下觀察細(xì)胞突起回縮，細(xì)胞變圓時(shí)終止消化，吸管輕柔反復(fù)吹打形成
6、均勻的細(xì)胞懸液，不要遺留有細(xì)胞團(tuán)。細(xì)胞懸液以1：2的比例接種于25cm2一次性無(wú)菌培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，以后每3d更換一次培養(yǎng)液。收稿日期：2007．11．16作者簡(jiǎn)介：程遠(yuǎn)：3￡(1981-)，碩士研究生，研究方向：生物醫(yī)學(xué)信息學(xué)，E-mail：chengyuan2001@163．coin通訊作者：曾照芳，教授。電話：023—68485009，E-mail：zen9000@126．com萬(wàn)方數(shù)據(jù)生物技術(shù)通報(bào)BiotechnologyBulletin2008年第3期1．1．3細(xì)胞凍存取第3代對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。凍存前1d更換一次培養(yǎng)液。用0．25％胰蛋白酶將單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)，用彎頭吸管輕柔
7、地將細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液移入50ml的無(wú)菌離心管中，800r／min離心10min。小心吸去上清液。加入1．5ml的細(xì)胞凍存液，凍存液的成分是含有10％DMSO和20％FBS的DMEM培養(yǎng)液。用吸管輕輕吹打形成均勻的細(xì)胞懸液，移人準(zhǔn)備好的無(wú)菌1．5ml凍存管中，標(biāo)記好細(xì)胞名稱、凍存時(shí)間后放入凍存盒中，一80℃過(guò)夜，第二天移人液氮中保存。1．2人正常牙周膜細(xì)胞的鑒定1．2．1制備細(xì)胞爬片按照細(xì)胞培養(yǎng)玻璃器皿要求清
