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《高速逆流色譜快速分離茯苓皮中的高純度茯苓酸a》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)第3l卷第2期2009年4月大連醫(yī)科大學學報JournalofDalianMedicalUniversityVm．3lNO．2Apr．2009高速逆流色譜快速分離茯苓皮中的高純度茯苓酸A王艷，湯新強(大連醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院藥劑科，遼寧大連116011)摘要：[目的]建立利用高速逆流色譜法高效、快速分離茯苓皮中茯芩酸A的新方法。[方法]茯苓皮的乙醇提取物經(jīng)大孔吸附樹脂柱初分后，直接進行高速逆流色譜分離，所用兩相溶劑體系為正己烷一乙酸乙酯一正丁醇一水(1：1：1．2：0．8，v／v)，流速1．5mL／IIIi
2、n，轉速800r／rain．檢測波長254nm，所得產物的純度經(jīng)HPLC檢測，結構經(jīng)紅外光譜(IR)，紫外光譜(uv)，質譜(Ms)和核磁共振譜(NMR)鑒定。[結果]從200mg茯苓皮粗提物中可得到76mg純度高于98％的茯苓酸A，分離時間短于5h。[結論]該方法簡便、快速，適合于茯苓皮中高純度茯苓酸A的分離制備。關鍵詞：HSCCC；茯苓皮；茯苓酸A：HPl。C中圖分類號：R284．2文獻標志碼：A文章編號：1671—7295(2009)02—0227—04茯苓是中國著名的傳統(tǒng)中藥，為多菌科真菌茯苓(PofiaC
3、OCOS)。茯苓皮為茯苓菌核的黑色外皮PoriaCOCOS(Schw．)Wolf．[PavhymaCOCOSFr．]，首載于《本草綱日》，味甘淡，性平，是一味常用的利水消腫藥，主要含多糖，三萜酸類，等有效成分¨'2J。歷來主要把茯苓人藥，而對茯苓皮的研究很少，通常當廢物棄去，造成很大的資源浪費。高速逆流色譜(High—speedcounter—currentchromatography，HSCCC)是在20世紀80年代南Yoichiroho教授首先研究和發(fā)展起來的一種無同相載體的連續(xù)液一液分配色譜技術[35
4、，目前
5、在天然產物的分離制備中應用廣泛。本文利用高速逆流色譜對茯苓皮中的化學成分進行分離，最終得到純度高于98％的茯苓酸A。該方法分離時間短，分離效率高、產物純度好，是制備茯苓酸A的有效方法。目前，還未見關于使用HSC—CC分離制備茯苓酸A的研究報道。1試劑與儀器1．1藥材與試劑茯苓皮購于云南千草源藥業(yè)有限公司，經(jīng)大連醫(yī)科大學天然藥物化學教研室刁云鵬博士鑒定為茯苓菌核(PoriaCOCOS)的外表皮(PoriaCOCOS(Schw．)Wolf．[PavhymaCOCOSFr．])。正己烷、乙酸乙酯和甲醇均為分析純試劑(天津
6、科密歐化學試劑開發(fā)中收稿日期：2008—11—26；修回日期：2009一01—18作者簡介：王艷(1968一)，山東龍口人，副主任藥師，碩士。心)，乙腈、甲醇為色譜純試劑(TEDIA，USA)，95％醫(yī)用酒精(盤錦天源藥業(yè)有限公司)，自制艤蒸水。1．2儀器設備TBE一300A高速逆流色譜儀(上海同田?；夹g有限公司)、進樣罔20mL、8823B一紫外槍測儀(北京市新技術應用研究所)、TBP一50A恒壓恒流微量泵(上海同田生化技術有限公司)、HXl050恒溫循環(huán)器(北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司)、N2000色譜數(shù)據(jù)工作
7、站(浙江大學智達信息T程有限公司)；Agilentl200HPLC系統(tǒng)包括G1322A真空脫氣機、G1311A四元泵、G1329A自動進樣器、G1314B可變波長紫外檢測器、ChemstationT作站(Agilent，USA)：U3010紫；,1-／可見分光光度計(Hitachi，Ja—pan)：Perkin—Elmer577紅外分光光度計，KBr壓片：Bruker一400型核磁共振儀，TMS為內標；APl3200型質譜儀(美國應用生物系統(tǒng)公司)；D101大孔樹脂(天津農藥廠)，SENCO5L旋轉蒸發(fā)儀(上海申生
8、科技有限公司)，DZF一6021真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)，98—1一B電熱套(上海申生科技有限公司)。2方法與結果2．1兩相溶劑系統(tǒng)的制備本研究采用正己烷一乙酸乙酯一甲醇一水(1：1：1．2：0．8，v／v)的溶劑系統(tǒng)。將正己烷、乙酸萬方數(shù)據(jù)228大連醫(yī)科大學學報第3l卷乙酯、甲醇、蒸餾水按體積比(1：1：1．2：0．8)倒入分液漏斗內混合，充分振搖，靜置分層，使用前分取上下相，上相作為同定相，下相作為流動相，分別超聲脫氣30min，冷卻至室溫，備用。2．2樣品溶液的制備取十燥的茯苓皮0．5kg，粉碎后用
9、70％乙醇回流提取2次，4h／次。合并提取液，減壓同收提取物得浸膏800mL，濃縮溫度為60。C。將浸膏進行D101大孔樹脂柱(80cmx6cm)層析，依次用水，60％、70％、80％、95％乙醇各2000mL梯度洗脫，接收各濃度的乙醇洗脫液，并對其進行HPLC分析，結果顯示70％流份適于用高速逆流色譜法進行分離純化，將該流份減壓濃縮、真空干燥，得淡黃色粉末
