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《不同藥物對維氏氣單胞菌的抑菌作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、不同藥物對維氏氣單胞菌的抑菌作用研究水產養(yǎng)殖2006級于書萍指導老師：黃小麗摘要：以28種常見藥物為材料，測定了其對斑點叉尾鮰的維氏氣單胞菌的生物學活性，結果表明，在所試的28種化學試劑中，以環(huán)丙沙星、氟苯尼考、奧福星、美福仙、羅美沙星、左氟沙星等共計14種對該菌有較強的抑制作用，而以前水產養(yǎng)殖中常用的四環(huán)素、青霉素、紅霉素等對此病原菌無抑菌作用或作用不明顯，顯示出病原菌對其可能已具有抗性，不適合作為它的抑菌藥物。關鍵詞：斑點叉尾鮰抑菌性MIC前言：斑點叉尾鮰是一種溫水性淡水魚類，適溫范圍0-38℃，生長攝食溫度為5-36℃，最適生長溫度為18-34℃，最佳攝食溫度為18-30℃，當水溫
2、超過39℃時會出現(xiàn)呼吸變慢、行動呆滯等不良反應。在溶氧為3mg/L時能正常生長，當?shù)陀?.5mg/L會出現(xiàn)死亡現(xiàn)象．對pH值的適應范圍為6。5-9.0，對鹽度的適應值應小于1‰【12】斑點叉尾鮰有密而細的口腔齒和咽喉齒，屬于有胃魚類，行動敏捷，體色較深．一般認為它屬肉食性魚類.在我國養(yǎng)殖面積比較廣，有著較好的經濟價值。然而隨著養(yǎng)殖面積的不斷擴大，養(yǎng)殖水域環(huán)境的日益惡化，斑點叉尾鮰的病害越來越嚴重，給廣大的漁民朋友們帶來了巨大的經濟損失?！?】目前對水產養(yǎng)殖動物細菌病進行控制的主要手段是采用抗菌藥物治療。但由于對病原學、藥理學等方面認識不全面,在養(yǎng)殖過程中存在高劑量多種藥物混合使用等濫用、
3、亂用藥物現(xiàn)象,雖然對殺滅病原菌有一定的效果,但毒副作用明顯,長期使用,易導致病原微生物產生抗藥性。因此,在使用藥物治療細菌性疾病之前,必須測定該藥物對病原菌的敏感性研究。【4】對于水產病原的藥物敏感性的研究大都采用測定MIC，MBC等方法，目前報道的測定MIC的方法有液體法和平皿法，斜面法，其中由于液體法不能測定出不溶性藥物的MIC，故使用較少，以平皿法使用居多，平皿法是將細菌點種在含藥平板上，足夠藥液濃度便可抑制細菌生長，可較快篩選藥物，斜面法是在一系列試管中，以普通肉湯培養(yǎng)基按倍比稀釋法稀釋藥液，每管加入等量的含菌普通肉湯和加入瓊脂量為2.6%的瓊脂培養(yǎng)基,使最終菌量為104CFU/
4、ml、搖勻、擺成斜面;適宜溫度下培養(yǎng)16-18h觀察實驗結果,記錄無菌生長的最低藥物濃度,即為該藥的最低抑菌濃度[1].1:材料與方法1、試驗材料試驗對象：斑點叉尾鮰維氏氣單胞菌（四川農業(yè)大學實驗室）主要試劑：藥敏紙片，蛋白胨，牛肉膏，氯化鈉，瓊脂，蒸餾水，主要儀器：光學顯微鏡，培養(yǎng)皿，鑷子，燒瓶，酒精燈，PH試紙，平板。2、試驗方法2.1實驗準備2．1．1培養(yǎng)基的配制采用以下配方：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂17g，蒸餾水1000mL，pH7.2。將除瓊脂外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，分裝于培養(yǎng)皿內，121℃，15min高壓滅菌備用。2．1．2藥物敏感性試
5、驗【5】將28℃恒溫培養(yǎng)18～24h的菌落,用生理鹽水制成105CUF菌懸液均勻涂抹在平板上,貼上藥敏試紙,置恒溫箱內24h后觀察并制表。抑菌圈直徑≤14mm為敏感,15-17mm,為中敏感,≥18mm為高敏感。實驗重復3次。2．1．3氟苯尼考等4種敏感藥物MIC的測定【6】取菌懸液1ml,加入含8ml液體培養(yǎng)基的無菌試管中；再吸取每種各藥敏紙片原藥稀釋液（6.4mg/ml）各5ml,沿管壁注入裝有5ml滅菌生理鹽水的滅菌試管內,搖勻制成2倍稀釋液。按上述操作順序,制成6個濃度梯度,它們的濃度依次為:0.64、0.32、0.16、0.08、0.04、0.02mg/ml；再從6個不同濃度梯
6、度試管中分別吸取1ml藥物稀釋液,依次加入到各種細菌稀釋液中混合均勻,置28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,取出后觀察測定最小抑菌濃度(MIC)并制表。2.結果與討論2.1.藥敏實驗用紙片法對病原菌維氏氣單胞菌菌株進行藥物敏感性試驗，結果見表1，表1:不同藥物對維氏氣單胞菌的抑制作用藥物名稱代號抑菌圈半徑cm藥物含量判斷標準是否敏感乙酰螺旋霉素乙1.0磺胺異惡唑磺2.3氯霉素氯2.4四環(huán)素四1.8羅美沙星羅3.0多粘霉素多0.7新生霉素生0.7鏈霉素鏈2.1丁胺卡那霉素丁1.6氯潔霉素潔0.6妥布霉素妥1.6麥迪霉素麥0.9新霉素新1.1美滿霉素滿1.2氟苯尼考尼3.1奧福星奧2.5美福仙美2.7
7、青霉素青0.7恩諾沙星恩2.4利福平利1.5左氟沙星左3.2紅霉素紅1.8復方新諾明復2.3卡那霉素卡1.8克拉霉素克1.8痢特靈痢1.2環(huán)丙沙星環(huán)2.9阿奇霉素奇2.6注：每種藥物含藥量均為30ug/片。2.2MIC值測定從藥敏實驗所得結果中選擇4種抗菌能力較好的藥物采用兩倍稀釋法對維氏氣單胞菌菌株作MIC值測定(表2)。表2:藥物對維氏氣單胞菌的MIC值藥物mg/ml0.640.320.160.080.04MIC值mg/ml氟苯
