靈芝多糖的分離純化和藥理活性及在功能食品中的應(yīng)用

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1、維普資訊http://www.cqvip.com118《食品研究與開發(fā)>2005年2月第26卷第1期靈芝多糖的分離純化和藥理活性及在功能食品中的應(yīng)用張熳張?zhí)m江蘇食品職業(yè)技術(shù)學(xué)院淮安223002摘要：就近10年來對靈芝多糖的研究進(jìn)行了歸納總結(jié)，并對其在功能食品中的應(yīng)用進(jìn)行了展望。傳統(tǒng)的提取工藝結(jié)合現(xiàn)代層析技術(shù)和離子交換技術(shù)是提取高純度、高活性的多糖成分的有效手段。靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老、抗氧化作用已經(jīng)過大量的試驗(yàn)驗(yàn)證。關(guān)鍵詞：靈芝多糖；分離純化；藥理活性；作用機(jī)制靈芝為多孔菌科真菌靈芝的子實(shí)體。在我國酵液中提取。作為藥物已有2000多年的歷史。靈芝的有效成陳

2、文星等人[2]，對從子實(shí)體中提取靈芝多糖進(jìn)分非常豐富，目前已知的有多糖、麥角字醇、三萜行了比較研究，研究表明，靈芝子實(shí)體經(jīng)水浸，沸水類、蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽、等十大類，150多種。煎煮30min，反復(fù)收集濾液，濃縮，過離子交換柱，靈芝多糖是靈芝最主要的生理活性成分。目前分透析，真空干燥，可得多糖含量為80％的提取產(chǎn)物。離到的靈芝多糖達(dá)200種之多，大部分為B型該產(chǎn)物較其他方法有明顯的抗腫瘤作用，可明顯抑葡聚糖，分子量從數(shù)千到數(shù)萬不等，不溶于高濃制B。6Bk腫瘤細(xì)胞在鼠體內(nèi)的生長，降低S．舳接種度乙醇，可在熱水中溶解。靈芝多糖的藥理活性小鼠的死亡率。主要取決于多糖中的糖苷鍵和立

3、體結(jié)構(gòu)，其中以羅立新等[3對靈芝菌深層培養(yǎng)產(chǎn)物菌絲體B一(1—3)、(1—6)連接或B一(1—4)、(1—6)的糖苷和發(fā)酵液由提取方法進(jìn)行了探討，發(fā)酵液胞外鍵活性較高??，F(xiàn)代研究表明，靈芝多糖具有抗多糖的提?。喊l(fā)酵液離心，取上清液80~90℃血栓、抗腫瘤、抗輻射、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、保肝、濃縮后流水透析至無還原糖，然后加入95％乙降壓。醇5～10℃下靜止沉淀12h以上，沉淀物分別1靈芝多糖的分離純化以無水乙醇、丙酮、乙醚、洗滌后真空干燥。此1．1分離提取提取物多糖含量為69．2％，雜蛋白含量為目前靈芝多糖的生產(chǎn)主要從野生或人工栽培20．6％。的靈芝子實(shí)體和靈芝菌深層培養(yǎng)產(chǎn)物菌絲

4、體和發(fā)菌絲體胞內(nèi)多糖的提?。壕z體上濃縮離t70．5MNaOH25℃廠———————上清(棄去)沉淀物(水溶性多糖)殘?jiān)锨逡簭S—————]去??冷=：上清液殘?jiān)?棄去)璣涎仞L城提水冶多話上透析沉淀沉NN(g~提水溶多糖)1．2粗多糖純化]糖溶于熱水后，以1：4的丁醇氯仿混合液振蕩粗多糖的純化第一步是去除雜蛋白。靈芝至有機(jī)層澄清為止。對于雜蛋白含量高的子實(shí)菌深層培養(yǎng)產(chǎn)物菌絲體和發(fā)酵液提取粗多糖，體提取物則應(yīng)先用蛋白酶處理再用Sevag法除雜蛋白含量少，可采用Sevag法除去，即將粗多去雜蛋白。維普資訊http://www.cqvip.com《食品研究與開發(fā)))2005年2月

5、第26卷第1期119除蛋白后的多糖還含有較多其他雜質(zhì)?？赏ㄟ^免疫細(xì)胞直接作用和通過機(jī)體神經(jīng)一內(nèi)分泌一免疫柱層析進(jìn)一步除去。方法如下：將除雜蛋白后的多系統(tǒng)的相互調(diào)節(jié)。糖溶于0．1MNaC1中，加入DEAE-SephadexA-25T淋巴細(xì)胞是重要的免疫細(xì)胞，靈芝多糖能層析柱內(nèi)以0．1MNaC1洗至無糖檢出，再繼續(xù)進(jìn)行顯著的促進(jìn)小鼠脾臟T細(xì)胞的增殖；李明春1研梯度洗脫，然后透析，無水乙醇沉淀。最后取樣品溶究認(rèn)為，GLB能迅速提高靜息T細(xì)胞中三磷酸于盡可能少的0．1MNaC1中，上Sephadexg-200層肌醇IP，；的濃度且被Gp蛋白抑制劑PTX所抑析柱，繼續(xù)用0．1MNaC1

6、以10mL／h的流速洗脫后收制，還可顯著促進(jìn)靜息T細(xì)胞中二酰基甘油集，測定含糖部分，合并相同峰，經(jīng)透析，乙醇沉淀，DAG的合成，而對活化T細(xì)胞則無作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)丙酮，乙醚洗滌，真空干燥的純度96％以上的白色果表明，靈芝多糖作用并激活T細(xì)胞的機(jī)制之多糖純品。一是通過IP，／Ca與DAG／PKC信號傳遞途徑。羅立新等在分離純化靈芝多糖的過程中，大蛋白激酶是催化體內(nèi)蛋白磷酸化的酶類，而蛋量多次使用有機(jī)溶劑，獲得了高含量高純度的靈白磷酸化是體內(nèi)各種生物反應(yīng)最終起作用的通芝多糖純品。但有機(jī)溶劑作用激烈，使蛋白質(zhì)變性路，蛋白激酶的活化是激活T細(xì)胞中必要條件。的同時(shí)，多糖的結(jié)構(gòu)也會(huì)發(fā)生改變，

7、導(dǎo)致多糖活李明春【1研究證明，靈芝多糖可使小鼠靜息T細(xì)性被抑制或喪失，因此該法提取的靈芝多糖的胞中PKA和PKC活性明顯升高，并使PKA發(fā)藥理生理活性還有進(jìn)一步驗(yàn)證。陳文星等采用生質(zhì)膜轉(zhuǎn)位，并拮抗Staurosporine對T細(xì)胞離子變換法替代有機(jī)溶劑的作用取得了高藥理PKC活性的抑制。因此，增強(qiáng)T細(xì)胞蛋白激酶活活性的多糖，因此可考慮以溫和的離子交換法改性是靈芝多糖發(fā)揮免疫增強(qiáng)和抗腫瘤作用的重進(jìn)羅立新等研究方法，以期獲得高純度高活性的要途徑。靈芝多糖。2．3抗衰老、抗氧化1．3靈芝多糖含量測定[41很多