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《靈芝多糖對大鼠胰島細胞分泌胰島素功能的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com·265·中國臨床藥理學與治療學◇研究原著◇中國藥理學會主辦~1206／R．ISSN1009-2501E-mail：editoa3,s@mail．wh．a(chǎn)l1．CI12003Jun；8(3)：265—2．68靈芝多糖對大鼠胰島細胞分泌胰島素功能的影響張慧娜，林志彬北京大學基礎醫(yī)學院藥理學系，北京100083摘要目的：探討靈芝多糖(G1．PS)對胰島細胞分泌瘤和抗氧化作用¨J。以前的研究也表明G1．PS通胰島素的影響。方法：分離大鼠胰島細胞，分別觀察過升高血漿胰島素水平或影響肝臟中某些代謝酶，在葡萄糖為5．6和16．7mmol·L時，Gl—PS
2、對胰島對正常小鼠和四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠起降血糖細胞分泌胰島素的影響。進一步加入不同的抑制劑作用，并可明顯增強實驗動物對葡萄糖的耐受觀察G1．PS對胰島細胞分泌胰島素的影響。采用力_6，但其作用機制目前尚不太清楚。本研究旨Westernblotting觀察G1．PS對胰島細胞葡萄糖轉運在探討G1．PS對胰島細胞分泌胰島素的影響。蛋白2(GIJ)表達的影響。結果：在5．6mmol·L1材料和方法葡萄糖時，100mg·L的G1．PS可明顯促進胰島細胞胰島素的分泌；當葡萄糖濃度為16．7mmol·LI1時，1．1動物Wistar大鼠舍，34周齡，6070g，購50和100mg·L的G1．PS均
3、可明顯促進胰島細胞胰自中國醫(yī)學科學院動物所。島素的分泌。維拉帕米或維拉帕米4-EGTA均可顯1．2藥品和試劑G1．PS是從赤芝中提取，為一種著抑制5．6和16．7mmol·L葡萄糖時胰島素的分含17種氨基酸的多糖，分子量為584900，多糖：肽泌，維拉帕米只能部分抑制G1．PS的促胰島素分泌=93．51％：6．49％。多糖部分是由葡萄糖，半乳作用，而維拉帕米+EGrA則可完全抑制Gl—PS的這糖，木糖，阿拉伯糖和甘露糖等組成。RPMI．1640，種作用。在葡萄糖濃度為5．6和16．7mmol·L時，DMEM培養(yǎng)基購自GibcoBRL公司。胰島素放免試G1-PS50和100mg·LI1均能明
4、顯促進胰島細胞劑盒購自中國原子能院同位素所。膠原酶(V型)，GLUT2的蛋白表達。結論：G1．PS可能通過促進胰島D．葡萄糖，維拉帕米(verapamil)和EGTA均購自sig．細胞GLUT2蛋白的表達從而有助于葡萄糖轉運入Bnla公司。兔抗GLUT2多克隆抗體(氨基端3298細胞，促進葡萄糖的代謝，引起胰島細胞外ca2內(nèi)氨基酸)，辣根過氧化酶標記的山羊抗兔IgG和化學流而起到促胰島素釋放的作用。發(fā)光(ECL)試劑盒均購自SantaCruze公司。關鍵詞藥理學；靈芝多糖；胰島細胞；胰島素分泌；1．3胰島細胞培養(yǎng)大鼠戊巴比妥鈉腹腔注射麻葡萄糖轉運蛋白2醉后，無菌取出胰腺，置于4oCHank
5、s液中，用眼科小剪刀將胰腺剪成1r—大小的組織塊，加入中圖分類號：R285．5；R329．250．5g·L膠原酶，37℃恒溫水浴振蕩消化15min，文獻標識碼：A將已消化至細顆粒狀組織吸出，并用大量4℃Ha．文章編號：1009．2501(2003)03．026504nks液終止消化，余下未消化完全的組織加入少量37oCnank~液，用粗口徑吸管輕輕吹打，直至大部靈芝多糖(C,anodermaluc／dumpolysaccharides，分組織被消化成細顆粒狀，用大量4oCHanks液終G1．PS)是靈芝的主要活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)，抗腫止消化。混合前后兩部分的消化產(chǎn)物，用Hanks液低速離
6、心洗滌3次后，將組織置于含100U·ml青20o3-0"2一l8收稿2003-0"2—24修回霉素，100mg·L鏈霉素，11．1mmol·L葡萄糖，1Ol上海綠谷(集團)有限公司科研基金資助課題mmol·L—Hepes和7％的胎牛血清的完全RPMI．張慧娜，女，博士生。林志彬，通訊作者，男，教授，博士生導師，中國藥理學會理事長，研究1640培養(yǎng)液中，用150目(108t-m)尼龍篩網(wǎng)過濾，以方向為內(nèi)分泌和免疫藥理學。除去未被消化的組織和結締組織。將已分離好的胰Tel：010-6209l686(Fax)E．mail：linzb@pubhc3、bta．netca島細胞和細胞團，置于含上述培養(yǎng)
7、液內(nèi)的培養(yǎng)瓶內(nèi)——一—“一一a，維普資訊http://www.cqvip.comChinJClinPharmacolTher2OO3Jun；8(3培養(yǎng)。24h后，吸出未貼壁的細胞懸液，低速離心砌·LPMSF)冰上裂解60min后，12000ipm4oC以收集細胞，顯微鏡下計數(shù)后，以每孔50個胰島細離心10min，吸取上清。采用Bradford法測定上清蛋胞團接種于24孔細胞培養(yǎng)板內(nèi)，繼續(xù)培養(yǎng)48h后白含量J。每組分別取1
