靈芝多糖對大鼠胰島細(xì)胞分泌胰島素功能的影響

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1、維普資訊http://www.cqvip.com·265·中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)◇研究原著◇中國藥理學(xué)會(huì)主辦~1206／R．ISSN1009-2501E-mail：editoa3,s@mail．wh．a(chǎn)l1．CI12003Jun；8(3)：265—2．68靈芝多糖對大鼠胰島細(xì)胞分泌胰島素功能的影響張慧娜，林志彬北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，北京100083摘要目的：探討靈芝多糖(G1．PS)對胰島細(xì)胞分泌瘤和抗氧化作用¨J。以前的研究也表明G1．PS通胰島素的影響。方法：分離大鼠胰島細(xì)胞，分別觀察過升高血漿胰島素水平或影響肝臟中某些代謝酶，在葡萄糖為5．6和16．7mmol·L時(shí)，Gl—PS

2、對胰島對正常小鼠和四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠起降血糖細(xì)胞分泌胰島素的影響。進(jìn)一步加入不同的抑制劑作用，并可明顯增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對葡萄糖的耐受觀察G1．PS對胰島細(xì)胞分泌胰島素的影響。采用力_6，但其作用機(jī)制目前尚不太清楚。本研究旨Westernblotting觀察G1．PS對胰島細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)在探討G1．PS對胰島細(xì)胞分泌胰島素的影響。蛋白2(GIJ)表達(dá)的影響。結(jié)果：在5．6mmol·L1材料和方法葡萄糖時(shí)，100mg·L的G1．PS可明顯促進(jìn)胰島細(xì)胞胰島素的分泌；當(dāng)葡萄糖濃度為16．7mmol·LI1時(shí)，1．1動(dòng)物Wistar大鼠舍，34周齡，6070g，購50和100mg·L的G1．PS均

3、可明顯促進(jìn)胰島細(xì)胞胰自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物所。島素的分泌。維拉帕米或維拉帕米4-EGTA均可顯1．2藥品和試劑G1．PS是從赤芝中提取，為一種著抑制5．6和16．7mmol·L葡萄糖時(shí)胰島素的分含17種氨基酸的多糖，分子量為584900，多糖：肽泌，維拉帕米只能部分抑制G1．PS的促胰島素分泌=93．51％：6．49％。多糖部分是由葡萄糖，半乳作用，而維拉帕米+EGrA則可完全抑制Gl—PS的這糖，木糖，阿拉伯糖和甘露糖等組成。RPMI．1640，種作用。在葡萄糖濃度為5．6和16．7mmol·L時(shí)，DMEM培養(yǎng)基購自GibcoBRL公司。胰島素放免試G1-PS50和100mg·LI1均能明

4、顯促進(jìn)胰島細(xì)胞劑盒購自中國原子能院同位素所。膠原酶(V型)，GLUT2的蛋白表達(dá)。結(jié)論：G1．PS可能通過促進(jìn)胰島D．葡萄糖，維拉帕米(verapamil)和EGTA均購自sig．細(xì)胞GLUT2蛋白的表達(dá)從而有助于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)入Bnla公司。兔抗GLUT2多克隆抗體(氨基端3298細(xì)胞，促進(jìn)葡萄糖的代謝，引起胰島細(xì)胞外ca2內(nèi)氨基酸)，辣根過氧化酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG和化學(xué)流而起到促胰島素釋放的作用。發(fā)光(ECL)試劑盒均購自SantaCruze公司。關(guān)鍵詞藥理學(xué)；靈芝多糖；胰島細(xì)胞；胰島素分泌；1．3胰島細(xì)胞培養(yǎng)大鼠戊巴比妥鈉腹腔注射麻葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2醉后，無菌取出胰腺，置于4oCHank

5、s液中，用眼科小剪刀將胰腺剪成1r—大小的組織塊，加入中圖分類號(hào)：R285．5；R329．250．5g·L膠原酶，37℃恒溫水浴振蕩消化15min，文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A將已消化至細(xì)顆粒狀組織吸出，并用大量4℃Ha．文章編號(hào)：1009．2501(2003)03．026504nks液終止消化，余下未消化完全的組織加入少量37oCnank~液，用粗口徑吸管輕輕吹打，直至大部靈芝多糖(C,anodermaluc／dumpolysaccharides，分組織被消化成細(xì)顆粒狀，用大量4oCHanks液終G1．PS)是靈芝的主要活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)，抗腫止消化。混合前后兩部分的消化產(chǎn)物，用Hanks液低速離

6、心洗滌3次后，將組織置于含100U·ml青20o3-0"2一l8收稿2003-0"2—24修回霉素，100mg·L鏈霉素，11．1mmol·L葡萄糖，1Ol上海綠谷(集團(tuán))有限公司科研基金資助課題mmol·L—Hepes和7％的胎牛血清的完全RPMI．張慧娜，女，博士生。林志彬，通訊作者，男，教授，博士生導(dǎo)師，中國藥理學(xué)會(huì)理事長，研究1640培養(yǎng)液中，用150目(108t-m)尼龍篩網(wǎng)過濾，以方向?yàn)閮?nèi)分泌和免疫藥理學(xué)。除去未被消化的組織和結(jié)締組織。將已分離好的胰Tel：010-6209l686(Fax)E．mail：linzb@pubhc3、bta．netca島細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)，置于含上述培養(yǎng)

7、液內(nèi)的培養(yǎng)瓶內(nèi)——一—“一一a，維普資訊http://www.cqvip.comChinJClinPharmacolTher2OO3Jun；8(3培養(yǎng)。24h后，吸出未貼壁的細(xì)胞懸液，低速離心砌·LPMSF)冰上裂解60min后，12000ipm4oC以收集細(xì)胞，顯微鏡下計(jì)數(shù)后，以每孔50個(gè)胰島細(xì)離心10min，吸取上清。采用Bradford法測定上清蛋胞團(tuán)接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，繼續(xù)培養(yǎng)48h后白含量J。每組分別取1