靈芝中靈芝多糖的含量測(cè)定研究

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1、維普資訊http://www.cqvip.com第31卷第1O期中國(guó)中藥雜志Vo1.31,Issue102OO6年5月ChinaJournalofC]l~etieMateriaMedieaMay,2006靈芝中靈芝多糖的含量測(cè)定研究戚雁飛(浙江省藥品檢驗(yàn)所,浙江杭州310004)靈芝為多孔菌科真菌赤芝C,anodermaluc/dum2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取105℃干燥至恒(Leyss.exFr.)Ka瑙t.或紫芝C,anodermasinenseZhao.重的葡萄糖對(duì)照品適量,加水制成每lmL含0.1nagXuetZhang的干燥子實(shí)體。其化學(xué)成分復(fù)雜,目前的

2、溶液,作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶已知主要含有多糖(肽)類、三萜類、核苷類等?1。靈液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2mL置10mL具塞試管芝多糖類具有抗腫瘤作用、免疫調(diào)節(jié)作用、降血糖、中,加水至2.0mL,精密加入硫酸蒽酮溶液(精密稱降血脂、抗氧化和抗衰老等作用,被認(rèn)為是靈芝扶正取蒽酮0.1g,加80%的硫酸溶液100mL使溶解,即固本的重要有效成分2。本研究建立了靈芝多糖的得)6mL,搖勻,置沸水浴中加熱15min,取出,放人含量測(cè)定方法。本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法,以葡萄糖冰浴中冷卻,以相應(yīng)的試劑為空白,在625砌的波為對(duì)照品,經(jīng)硫酸葸酮顯色后

3、測(cè)定其吸收度。通過長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,以吸收度為縱坐標(biāo),含量為橫坐方法學(xué)驗(yàn)證,重復(fù)性良好,經(jīng)藥典會(huì)審批,本方法已標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其回歸方程為:Y=2.7248X+被收入《中國(guó)藥典)2005年版一部靈芝項(xiàng)下。0.0011,R=0.9993。1儀器與試藥2.4測(cè)定方法精密量取靈芝提取液2mL,置l0島津UV一260分光光度計(jì);蒽酮、硫酸、乙醇等mL具塞試管,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法,自“精密試劑均為分析純。葡萄糖對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制加入硫酸蒽酮溶液6mL”起同法操作,測(cè)定吸收度。品檢定所提供。靈芝樣品共8批,分別來自浙江42.5顯色穩(wěn)定性取同一靈芝的提取液,按上述測(cè)批、

4、廣西2批、四JII、福建各l批,經(jīng)浙江省藥品檢驗(yàn)定法顯色后,每隔一定時(shí)間測(cè)定吸收度,結(jié)果表明在所郭增喜副主任中藥師鑒定。l1h內(nèi)穩(wěn)定。2方法與結(jié)果2.6顯色重復(fù)性取同一靈芝的提取液,按上述方2.1靈芝多糖的提取取藥材粉末2g,精密稱定,法分別顯色6份,測(cè)定吸收度,RSD1.2%。置索氏提取器中,加水9omL,加熱回流提取至提取2.7重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批樣品,按前文所述方法液無色,將提取液轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中,加水稀釋分別提取6份,顯色后測(cè)定多糖含量,結(jié)果多糖的平至刻度,搖勻,精密吸取l0mL,加入乙醇150mL,搖均含量為0.78%,RSD2.3%(=6)。勻,4℃

5、放置12h,取出,離心,棄去上清液,沉淀加2.8樣品測(cè)定結(jié)果見表l。水溶解并定量轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中,用水稀釋至刻表1靈芝多糖含量度,搖勻。2.2條件的選擇2.2.1最大吸收波長(zhǎng)的選擇分別取經(jīng)硫酸蒽酮顯色后的無水葡萄糖對(duì)照品液和靈芝供試品液,于400~700nln掃描,結(jié)果對(duì)照品液和供試品液均在625nln處有最大吸收。故選擇625nln為測(cè)定波長(zhǎng)。2.2.2另對(duì)加入硫酸蒽酮的量和反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行了3結(jié)果與討論比較,顯示此二者對(duì)結(jié)果影響不大,最終選擇加入63.1靈芝多糖的提取曾比較了沸水浴回流和索氏mL,反應(yīng)l5IIlin。提取,經(jīng)醇沉后,回流提取的多糖沉淀極少,故選擇

6、[收稿日期]2006-01—25索氏提取至提取液無色以使多糖提取完全。此外還[通訊作者】戚雁飛。Tel:(0571)86462075對(duì)醇沉?xí)r不同的乙醇含量進(jìn)行了考察,結(jié)果顯示乙·852·維普資訊http://www.cqvip.com第3l卷第l0期中國(guó)中藥雜志Vn1.31.Issuel02006年5月ChinajournalofChMateriaMedicaMay,2006醇含量達(dá)到95%時(shí)多糖沉淀最多,乙醇含量為9o%芝和紫芝的性狀無必然的聯(lián)系,而多糖的含量較為時(shí)沉淀的多糖與之接近(偏差小于2.O%),為節(jié)省接近,故認(rèn)為采用靈芝多糖作為含量測(cè)定的指標(biāo),用溶劑,選

7、擇后者。本方法因無多糖對(duì)照品而以葡萄于靈芝的質(zhì)量控制更為合理。糖為對(duì)照品。多糖提取采用水提醇沉方法,葡萄糖[參考文獻(xiàn)]用乙醇無法使其沉淀,故未進(jìn)行回收率考察。[1]鄧海林,吳佩穎,王建新.靈芝的研究進(jìn)展.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥.2005,16(o2):141.3.2靈芝中的三萜類成分因未找到合適的靈芝酸[2]單衛(wèi)華.靈芝菌發(fā)酵液制劑中靈芝多糖及總糖含量測(cè)定.時(shí)對(duì)照品,未測(cè)定其含量。核苷類是有廣泛活性的一珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥。2OOO,11(9):797.類水溶性成分【3j,故又測(cè)定了核苷類中腺苷和尿苷[3]肖培根.新編中藥志.第三卷.北京:化學(xué)工業(yè)出版社.的含量,結(jié)果表明其含量在各

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