螺旋藻活性肽的制備及其免疫調(diào)節(jié)功能研究

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1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文螺旋藻活性肽的制備及其免疫調(diào)節(jié)功能研究姓名：楊磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：工學(xué)制糖工程指導(dǎo)教師：滕建文20090603螺旋藻活性肽的制備及其免疫調(diào)節(jié)功能研究摘要本課題借助螺旋藻自溶酶，或輔助添加外源蛋白酶，對(duì)新鮮藻泥進(jìn)行酶解，制備螺旋藻活性肽，并研究其免疫調(diào)節(jié)活性。直接利用新鮮藻泥開發(fā)多肽產(chǎn)品，既增強(qiáng)了螺旋藻的保健功能，又節(jié)省了將藻泥干燥成粉的成本；螺旋藻肽可提高營(yíng)養(yǎng)成分的吸收利用率，提升產(chǎn)品附加值，同時(shí)對(duì)螺旋藻業(yè)的企業(yè)利益及其產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定良性發(fā)展有直接、深遠(yuǎn)的現(xiàn)實(shí)意義。選用木瓜蛋白酶做工具酶，采用對(duì)比試驗(yàn)法，以酶解產(chǎn)物的DPPH清除率及多肽得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)表明螺旋藻

2、自溶酶不僅可提高以上兩個(gè)指標(biāo)，對(duì)產(chǎn)物腥味的去除、顏色的淺化等方面也起到一定作用；藻泥酶解產(chǎn)物的感官評(píng)價(jià)較好，且其上述兩指標(biāo)均明顯高于藻粉酶解產(chǎn)物。單因素分析和響應(yīng)面法優(yōu)化藻泥酶解條件為：pH7．0(酶解過程中不需維持pH恒定)，料液比1：2，加酶量0．12％，酶解溫度55．7。C，酶解時(shí)間3．34h。該條件下制備出的酶解產(chǎn)物的多肽得率和DPPH清除率分別為(75．87±0．14)％、(57．18±0．19)％，在理論預(yù)測(cè)值的95％置信區(qū)間內(nèi)，說明模型的優(yōu)化結(jié)果與實(shí)際情況是相吻合的。采用對(duì)比試驗(yàn)法優(yōu)化醇沉除多糖工藝參數(shù)，選擇三倍體積的90％乙醇溶液，多糖脫除率為(84．88±O．33)％、

3、肽回收率為(92．39±O．25)％；超濾后的螺旋藻肽回收率為(95．36±O．27)％；以原料干基計(jì)，螺旋藻肽最終得率為51．42％；98％左右的分子量分布在1000Da以下；氨基酸組成較合理；螺旋藻肽具有明顯的清除DPPH作用，當(dāng)濃度達(dá)至lJ4mg／ml時(shí)，其清除率接近50％；對(duì)羥基自由基、超氧陰離子均有一定的清除作用；具有一定的還原能力。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明螺旋藻肽不僅能顯著提高正常小鼠的免疫功能，而且能顯著提高環(huán)磷酰胺致免疫低下小鼠的臟器指數(shù)、廓清指數(shù)(K)和吞噬指數(shù)(Q)、抗體生成細(xì)胞含量及血清溶血素含量(P

4、(P>O．05)。關(guān)鍵詞：螺旋藻泥活性肽酶解自溶酶抗氧化免疫調(diào)節(jié)IlSTUDYoNPREPARATIoNoFACTIVEPEPTIDESFRoMSPIRULINAMUDANDITSIMMUNEREGULATINGFUNCTIoNABSTRACTThefleshSpirulinamudwashydrolyzedwithitsendogenousproteinasesorexogenousproteasetoproduceactivepeptide，anditsimmuneregulatingfunctionwasinvestigated．Itimprovedthehealthfunctio

5、nofSpirulinaandsavedthecostofdryingSpirulinahydrolyzingdirectlyfleshSpirulinamud．Spirulinaactivepeptideimprovesabsorptionandincreasesaddedvalueofproducts．Meanwhile，itconstructesdirectlyenterprisebenefitsandhaveprofoundsignificanceandstabledevelopmentonSpirulinaindustry．Aftercomparativeanalysiswit

6、hthepeptidesproductionTCA—NSIandDPPHscavengingrateasevaluationindexes，itshowsthattheendogenousproteinasesplayedcertainroleofthetwoindexes，theremovingoffishysmellandtheimprovementofcolor．ThehydrolysisresultofSpirulinamudandpowderwascompared．Itshowsthattheindexesofmudwereobviouslysuperiortothemofpo

7、wder．Basedontheresultsofone—factor—at-a-ime-technique，responsesurfacemethodologywasappliedtooptimizethehydrolysisconditions．Consideredproductcostandprocessrequirement，theoptimumconditionswereobtained：pH7．0，solid—liquid