銀耳多糖對小鼠移植性肝癌治療作用及機制的實驗研究

《銀耳多糖對小鼠移植性肝癌治療作用及機制的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、維普資訊http://www.cqvip.com·l662·中國老年學雜志2006年l2月第26卷銀耳多糖對小鼠移植性肝癌治療作用及機制的實驗研究曲萌董志恒蓋曉東畢勝利王冰梅(北華大學醫(yī)學院分子生物教研室，吉林吉林132013)【摘要】目的研究銀耳多糖(TremellaPolysaccharide，TP)對荷HAC小鼠T細胞表面分化抗原、細胞因子、體外腫瘤細胞的殺傷作用及小鼠移植性肝癌的影響。方法用環(huán)碑酰胺和11P分別作用于荷HAC肝癌小鼠，采用免疫熒光法、流式細胞儀及酶標儀觀察各組免疫功能的變

2、化及細胞因子的表達。并分離其脾細胞，將誘導的細胞毒性T細胞(CTL細胞)分別作用于體外培養(yǎng)的H-TdR標記的腫瘤細胞P815、HAC和B16。4h后用一閃爍記數(shù)儀進行檢測。并記算殺傷程度。檢測各組腫瘤重量、體積、組織學改變和主要臟器的形態(tài)學改變。結果11P實驗組總T細胞、T殺傷細胞及腫瘤壞死因子(TNF)分別為(62．3±1．06)、(25．6±O．87)及(87．5±O．5)，高于對照組，其中對總T細胞及TNF上調明顯。在對HAC、P815、B16腫瘸細胞的殺傷作用中。TP實驗組的殺傷話性明顯

3、高于對照組。分別為23．85％、20．81％、25．43％(P(O．O1)。其中對BI6殺傷作用最強，HAC次之，P815最弱。環(huán)礴酰胺+rP實驗組上述指標與rP實驗組相比有所下降，但與對照組相比則明顯增高(P(0．05)。治療組肝腫瘤重量、體積均低于模型組。組織學上腫瘤壞死程度重且范圍廣，淋巴細胞、巨噬細胞浸潤明顯。纖維組織增生顯著。環(huán)磷酰胺組較實驗組表現(xiàn)的更為明顯rP實驗組除脾臟外。其他主要臟器無明顯形態(tài)學變化。結論rP具有激活和提高特異性和非特異性殺傷細胞的抗腫瘤作用。[莢t詞)TP；移植

4、性肝癌；生物治療【中豳分類號】R979．1[文獻標識碼】A[文章一號】1005-9202(2006)12-1662．04以往治療肝癌多采用手術及術后放、化療的方法，這種傳w；環(huán)磷酰胺對照組(B組)接種肝癌細胞，并在接種后的第1、統(tǒng)方法存在著無法保證切除所有的腫瘤細胞，不能抑制腫瘤的7、14天以20mg／kg腹腔注射環(huán)磷酰胺；環(huán)磷酰胺+rI'P實驗組轉移，且在殺傷腫瘤細胞的同時也損傷了正常組織等缺點。嚴(c組)接種肝癌細胞，并在接種后的第1、7、14天分別以20重地影響了治療進程。銀耳多糖(Tre

5、mellaPolysaccharide，TP)mg／kg和50mg／kg腹腔注射環(huán)磷酰胺和11P；rI'P實驗組(D組)是一種含蛋白多糖，為銀耳的重要有效成分，現(xiàn)代藥理學研究接種肝癌細胞，并以50mg／kg腹腔注射rI'P，連續(xù)4W。證明，TP具有抑制腫瘤生長。提高機體免疫，延緩衰老，抗突l-2．3癌模型的復制取原發(fā)性肝癌腹水型帶瘤小鼠，于超變、抗放射及提高巨噬細胞吞噬功能和促進脾細胞產生IL-2等凈工作臺內行腹腔穿刺術，抽取腹水。碘酒、酒精二次消毒腹作用¨’‘】，其對癌細胞并不具有直接抑制或殺

6、傷作用，它對癌部皮膚，用5Illl注射器吸取2ml注射用生理鹽水，9號粗針頭瘤的抑制作用是通過中間宿主效應，即可能通過機體增強對癌于中下腹部穿過皮膚和腹腔，抽取含瘤細胞腹水3Illl，用生理瘤的免疫功能等途徑而實現(xiàn)的。我們對rI'P的體內、外抗肝癌鹽水以1：8稀釋成細胞懸液，于小鼠左腋下皮下接種0．2mi／生物治療作用進行研究，并對其對體內主要臟器的影響進行檢鼠(約2×10。個細胞)。測，探討rI'P對肝癌生物治療作用及作用機制，為肝癌的更好防l-2．4脾細胞懸液的制備無菌獲取不同組別荷瘤小鼠的

7、脾治提供新的靶向及手段。臟。置于100目尼龍網上輕輕碾碎，加適量Hanks液混懸，3次過濾，加Tris．NH4Cl溶解殘余的紅細胞。以含2％NBS的HBSSl材料和方法離心(1500r／rain，8min)洗滌。用1640培養(yǎng)液還原細胞至41．1動物純系BALB／C小鼠由吉林省藥品檢驗所實驗動物m1左右，鋪于小鼠淋巴細胞分離液上(比重為1．088)，離心2部提供，原發(fā)性肝癌腹水型帶瘤小鼠購自中科院藥物研究所。000r／rain，20min。吸取單個核淋巴細胞(PBL)，1500r／rain，81

8、．2方法rain洗滌細胞2次。用含IL-2(1000U／m1)和30％FCS的16401．2-1試劑與儀器RPMI-1640培養(yǎng)液；Tris-NH4Cl：0．83％培養(yǎng)液調整PBL濃度為2×10／ml，待用。NH‘CI；Hanks液：HBSS；結晶紫：北京化工廠；MrI-I．：Signm公司；1．2．5HAC肝癌細胞的制備、處理無菌抽取含瘤細胞腹環(huán)磷酰胺：上海第十二制藥廠；TP：購自福建省三明真菌研究水。制備成細胞懸液，1500r／rain，8min離心、洗滌。細胞經小所；IL-2：Boehri