膨潤(rùn)土絮凝法精制刺五加水提液的研究

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1、膨潤(rùn)土絮凝法精制刺五加水提液的研究【摘要】目的考察膨潤(rùn)土絮凝劑對(duì)刺五加水提液的澄清效果。方法將膨潤(rùn)土用于刺五加水提液的澄清,以水提液中有效成分總黃酮的保留率及浸出物得率為考察指標(biāo),并與醇沉法進(jìn)行比較。結(jié)果膨潤(rùn)土絮凝法與醇沉法同樣能使藥液澄清,能有效降低總固形物的量,而對(duì)水提液總黃酮的保留率要優(yōu)于醇沉法。結(jié)論膨潤(rùn)土絮凝劑可用于刺五加水提液的澄清工藝?!娟P(guān)鍵詞】刺五加水提液;絮凝;膨潤(rùn)土;總黃酮刺五加主要分布在我國(guó)的東北和華北等地,為五加科植物刺五加AcanthopanaxsenticosusHarmssyn的干燥根和根莖,具有補(bǔ)中益

2、氣、健脾補(bǔ)腎,安神醒腦的功效,用于脾腎陽虛、體虛乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多夢(mèng)等病癥,其中刺五加中所含總黃酮是其有效成分,刺五加制劑在神經(jīng)官能癥、神經(jīng)衰弱、高脂血癥、冠心病、腦血栓、心絞痛、低血糖等疾病的治療中均具有顯著療效[1]?! 〈涛寮铀嵋荷a(chǎn)工藝中采用中藥制劑常用的水提醇沉澄清工藝,不僅需要消耗大量的乙醇,生產(chǎn)成本高,乙醇回收復(fù)雜,而且易造成有效成分的損失,影響制劑的療效。膨潤(rùn)土是一種具有層狀結(jié)構(gòu)的水合鎂鋁硅酸鹽非金屬黏土礦物,作為一種天然的澄清劑,資源豐富,安全無毒[2,3]。為了最大限度地保留刺五加水提液的有效成

3、分,本實(shí)驗(yàn)采用膨潤(rùn)土作為刺五加水提液的絮凝劑,用于刺五加提取液的絮凝和精制,選擇總固形物和黃酮總含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo),并與傳統(tǒng)醇沉法進(jìn)行比較。1儀器和材料  722型可見分光光度計(jì);電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱;ESJ10-4型電子天平。刺五加根和莖飲片;蘆丁對(duì)照品;膨潤(rùn)土;無水乙醇、硝酸鋁、亞硝酸鈉等試劑均為分析純。 2方法和結(jié)果.1絮凝劑溶液的配制準(zhǔn)確稱取g膨潤(rùn)土,用100ml蒸餾水浸泡2h,使之充分吸水分散成膠體懸浮液,即得5%的膨潤(rùn)土懸濁液。.2刺五加水提液的制備稱取干燥刺五加藥材100g,加蒸餾水500ml,浸泡30min后,煎煮1h

4、,濾過后,擠干濾渣,濾渣再煎煮1h,合并兩次濾液,加熱濃縮至每毫升煎劑含生藥。.3刺五加水提液中總黃酮含量的測(cè)定[4].標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品,置50ml量瓶中,加60%乙醇適量,超聲處理使溶解,放冷,用60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液,,,,ml分別置2ml量瓶中,加60%乙醇溶液至ml,加5%亞硝酸鈉溶液1ml,搖勻,放置min,加10%硝酸鋁溶液1ml,搖勻,放置min,再加4%氫氧化鈉溶液10ml,用60%乙醇稀釋至刻度,放置1min,以相應(yīng)的溶液為空白,在波長(zhǎng)

5、510nm處測(cè)定吸光度。重復(fù)測(cè)定3次,以吸光度為縱坐標(biāo),以濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程:Y=-,Y為濃度mg/ml;X為吸光度;相關(guān)系數(shù)r=,n=5,說明在×10-3~.92×10-mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。.總黃酮含量的分析精密量取“”項(xiàng)刺五加水提液置于2ml量瓶中,加60%乙醇溶液至ml,加入5%亞硝酸鈉溶液1ml,搖勻,放置min,再加入10%硝酸鋁溶液1ml,搖勻,放置min,再加入4%氫氧化鈉溶液10ml,用60%乙醇稀釋至刻度,放置1min,以相應(yīng)的溶液為空白,在波長(zhǎng)510nm處測(cè)定吸光度。根據(jù)回歸方程分

6、別計(jì)算澄清前后刺五加水提液中總黃酮含量。并按下式計(jì)算有效成分總黃酮保留率:總黃酮保留率=澄清后藥液總黃酮的量/澄清前藥液總黃酮的量×100%。.固形物收率的測(cè)定精密量取刺五加水提液2ml,置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,水浴蒸干后于105℃烘箱中干燥至恒重,在干燥器中放置30min,迅速稱重,與絮凝處理前樣品液中的固形物相比,計(jì)算固形物收率。.4水提液濃縮比的選擇取濃縮至生藥量與藥液體積比為1∶1,1∶2,1∶5,1∶10的提取液各2ml,分別加入絮凝劑,于室溫下攪拌1h,在室溫下靜置2h后將膨潤(rùn)土及沉淀物分離,觀察藥液的澄清度,過濾,

7、測(cè)定濾液中固形物總量及總黃酮含量。刺五加水提液濃縮比對(duì)絮凝效果的影響結(jié)果見表1。結(jié)果表明,藥液濃度過大時(shí),由于溶液粘稠,加入絮凝劑后,不利于大分子的分散,因而澄清效果較差。而提取液濃度較稀時(shí),澄清效果較好,而且總黃酮損失不大,但當(dāng)藥液濃度過稀時(shí),后續(xù)處理過程較為復(fù)雜。因此,將水提液濃縮比定為1∶5較為合理。表1水提液濃縮比對(duì)絮凝效果的影響.5絮凝劑用量的考察精密量取“”項(xiàng)刺五加水提液各6份,每份50ml,在室溫及相同的攪拌速度下,分別加入絮凝劑,,,,ml,于室溫下攪拌1h,在室溫下靜置2h后觀察藥液的澄清度,過濾,測(cè)定濾液中固形

8、物總量及總黃酮含量。結(jié)果見表2?! 〗Y(jié)果表明,隨著刺五加水提液中膨潤(rùn)土加入量的增大,得到的固體物總量明顯減少,水提液更為澄清。當(dāng)膨潤(rùn)土絮凝劑加入量高于ml時(shí),藥液由渾濁變澄清。隨著刺五加水提液中膨潤(rùn)土加入量的增大,藥液中有效成分總黃酮含量降低,當(dāng)膨

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