紫金砂體外抗菌活性的研究

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1、紫金砂體外抗菌活性的研究【摘要】目的紫金砂提取物及其提取部位抗菌活性的研究。方法5%乙醇提取,系統(tǒng)溶劑萃取分離得到5個部位,采用紙片擴(kuò)散法對提取物及提取部位進(jìn)行體外抗菌活性研究。結(jié)果紫金砂提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌具有抑制作用,氯仿提取部位對大腸桿菌、枯草芽胞桿菌具有抑制作用,正丁醇提取部位對大腸桿菌、綠膿桿菌具有抑制作用。結(jié)論紫金砂提取物及提取部位具有抗菌活性?!娟P(guān)鍵詞】紫金砂抗菌活性提取物提取部位Abstract:ObjectiveTostudytheanti-bacterialactivityoftheextractanditsextractivefractionsof

2、AngelicapolymorphapolymorphaMaxim.wasextractedwith5%ethanol.FivefractionswereobtainedbysystematicallyseparatingtheeffectinvitrowastestedusingdiskdiffusionTheextractshowedantibacterialactivityagainstStaphylococcusaureusandEscherichiachloroformfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandBacil

3、lussubtilis.ThenobutanolfractionshowedactivityagainstEscherichiacoliandPseudomonasextractanditsfractionsofAngelicapolymorphaMaxim.haveanti-bacterialactivitives.Keywords:AngelicapolymorphaMaxim.;Anti-bacterialactivity;Extract;Extractivefraction土家族常用中藥紫金砂,為傘形科植物當(dāng)歸屬植物白根獨(dú)活A(yù)ngelicapolymorphaMaxim.的

4、根[1]。主要分布于湖北、湖南、重慶、陜西省等省區(qū)。具有溫中散寒、理氣止痛的功效。民間一直作為香獨(dú)活入藥,常用其治療胃痛、腹痛、胸脅痛、風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、跌打損傷、毒蛇咬傷等,療效極佳[2]。其化學(xué)成分主要為生物堿[3]、揮發(fā)油[4]、香豆素[5,6]、甾醇[7]等。文獻(xiàn)報道抗菌植物資源中傘形科較為豐富,這其中又以當(dāng)歸屬等植物抗菌活性最強(qiáng)[8]。在上述文獻(xiàn)工作的基礎(chǔ)上,本實(shí)驗(yàn)對傘形科當(dāng)歸屬植物拐芹的根,即紫金砂進(jìn)一步進(jìn)行體外抗菌實(shí)驗(yàn)(紙片擴(kuò)散法[9,10])的研究,發(fā)現(xiàn)紫金砂初提物及不同萃取部位具有不同的抗菌活性。為進(jìn)一步活性追蹤其化學(xué)成分提供了依據(jù)和導(dǎo)向。1器材儀器N-1001型旋轉(zhuǎn)蒸

5、發(fā)器、ss-325型壓力蒸氣滅菌鍋、SPX-1508B型恒溫培養(yǎng)箱、AL204萬分之一電子天平(METTLWRTOLEDO)、SW-CJ-1F型超凈工作臺。藥材自采藥材,XX0709采于神農(nóng)架林區(qū)木魚鎮(zhèn)。經(jīng)鑒定為傘形科植物當(dāng)歸屬植物拐芹的根。試劑5%乙醇、石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇等;10型濾紙。培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯,瓊脂粉。菌種金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌由湖北省宜昌市中心醫(yī)院提供,枯草芽孢桿菌由湖北省宜昌市三峽大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院微生物室提供。 2方法與結(jié)果.1供試液的制備取干燥的紫金砂根,研磨成細(xì)粉,過20目篩。用95%乙醇回流提取,提取液減壓濃縮得總浸膏。總浸

6、膏用適量水溶解后,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇分別反復(fù)萃取。各萃取液及最后水溶液減壓回收溶劑,濃縮得不同極性部位浸膏。精密稱取所得各部位浸膏g,依次將浸膏配制成10ml,即10g/100ml濃度的藥液備用。具體過程及結(jié)果見圖1。.2固體培養(yǎng)基的制備稱取營養(yǎng)瓊脂置于三角燒瓶中,用去離子水將其充分溶解,取適量脫脂棉塞住瓶口并用濾紙包扎好放入高壓滅菌鍋中,121℃滅菌1min,待冷卻到0℃后取出,在無菌操作臺上倒入一次性培養(yǎng)皿中。待冷卻凝固后放入冰箱中,4℃保存?zhèn)溆谩?3菌懸液的制備取只試管,分別倒入等量生理鹽水至試管的1/處,于紫外燈下滅菌20min,然后用無菌棉簽蘸取新鮮菌種

7、少量~5個菌落放入生理鹽水充分?jǐn)噭邮辜?xì)菌分散均勻。校正菌液濃度與標(biāo)準(zhǔn)比濁管相同,即達(dá)01號麥?zhǔn)媳葷峁軡岫?,所有步驟均在無菌操作臺上完成。.4紙片的制備將無藥紙片放入高壓滅菌鍋中,121℃滅菌1min,取出后置恒溫培養(yǎng)箱中干燥備用。在無菌操作臺上用移液器移取0μl已配制好的藥液均勻注入已滅菌的紙片上,使藥液完全被紙片吸收,待藥片上的溶劑揮干后,在紫外燈下滅菌0min備用。.5提取物的抑菌實(shí)驗(yàn)分別用無菌移液管吸取上述制備的種供試菌懸液ml添加到平板培養(yǎng)基上,用無菌三角玻璃

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