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《羊肚菌多糖體外抗菌活性研究 》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、羊肚菌多糖體外抗菌活性研究龍正海，紀(jì)其雄，周惠燕【關(guān)鍵詞】羊肚菌；,,多糖；,,抗菌活性 摘要：目的對羊肚菌Morchellaesculenta多糖的體外抗菌活性進(jìn)行初步研究。方法采用改良藥基法和K-B法，對子囊果多糖(APS)、菌絲體胞內(nèi)多糖(IPS)、胞外多糖(EPS)進(jìn)行體外抗菌實(shí)驗(yàn)。結(jié)果研究表明羊肚菌多糖對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌以及放線菌的抗菌活性都比較強(qiáng)，而對霉菌和酵母菌的抗菌作用不明顯。結(jié)論3種羊肚菌多糖均具有比較明顯的抗細(xì)菌、抗放線菌活性?！ ￡P(guān)鍵詞：羊肚菌；多糖；抗菌活性 Studyon
2、Anti-microbialActivitiesofPolysaccharidefromMorchellaesculentainvitro Abstract：ObjectivePrimarystudyonantimicrobialactivitiesofMorchellapolysaccharideinvitroiscarriedon.MethodsTheMICofpolysaccharideeasurededicine-mediumandKirbyBauerMethod.ResultsThetestindicatedt
3、hatallthetestedsampleshadanti-microbialactivitiesagaistE.coli,B.subtilis,S.aureusandA.microflavus.ConclusionStudyshoM.esculentahadstronganti-bacterialandantiactinomycespoicrobialactivities 羊肚菌Morchellaesculenta營養(yǎng)豐富，是珍稀食藥用真菌?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明多糖是其重要的活性物質(zhì)之一，具有抗疲勞、抗腫瘤、抗病毒及提高機(jī)
4、體免疫力等作用〔1,2〕。目前尚未見到有關(guān)羊肚菌多糖抗菌作用方面的研究報道，本文將對羊肚菌子囊果多糖以及菌絲體胞內(nèi)、胞外多糖的抗菌活性進(jìn)行初步研究?！ ?材料與方法 1.1菌種來源 1.1.1羊肚菌來源羊肚菌M.esculenta子囊果于200505分別采自浙江麗水和貴州貴陽，同時進(jìn)行單孢子分離得到斜面菌種?！ ?.1.2供試菌種 大腸桿菌Escherichiacoli，枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis，耐藥性金黃色葡萄球菌Staphalococcusaureus，細(xì)黃放線菌Actinomycesmicr
5、oflavus，產(chǎn)黃青霉Penicilliumchrysogenum，米曲霉Aspergillusoryzae，熱帶假絲酵母Candidatropicalis，啤酒酵母Saccharomycescerevisiae均由本校微生物教研室提供?！ ?.2培養(yǎng)方法和供試菌液制備 1.2.1培養(yǎng)基 細(xì)菌培養(yǎng)基：牛肉膏0.5％，蛋白胨1％，NaCl0.5％，水100ml，pH7.0~7.2。真菌培養(yǎng)基：馬鈴薯20％，葡萄糖2％，水100ml，自然pH值。酵母、放線菌培養(yǎng)基：葡萄糖5％，蛋白胨1％，KH2PO40.3％，MgSO4
6、0.5％，水100ml，pH6.0。 1.2.2供試菌培養(yǎng)供試菌種用各自液體培養(yǎng)基在適宜溫度下培養(yǎng)后得到各種原菌液?！ ?.2.3供試菌液制備 用原菌液分別制備成含菌量約為107CFU/ml的供試菌液，備用。 1.3多糖提取與測定 1.3.1多糖提取 取羊肚菌子囊果干品2g，加人100ml水，煮沸提取30min，冷卻后2500r/min離心5min。取上清液于一燒杯中，殘渣再加人100ml水，煮沸提取30min，收集上清液于同一燒杯中，殘渣再重復(fù)提取1次，將3次收集的有提取液的燒杯在電爐上加熱、濃縮至30ml左右
7、冷卻，再加人100ml乙醇使多糖析出，沉淀30min后2500r／min離心3min，棄去上清液，殘渣再加人50ml乙醇攪拌清洗后同樣離心棄上清液，殘渣再清洗1次后，用約80℃熱水70ml溶解殘渣，轉(zhuǎn)移至200ml容量瓶中，冷卻后定容，得到子囊果多糖液(APS)。再取羊肚菌菌絲體干品2g，同法制備成菌絲體胞內(nèi)多糖液(IPS)。用真菌培養(yǎng)基接種羊肚菌斜面菌種在25~28℃中培養(yǎng)5~7d，濾去菌絲體的液體培養(yǎng)液于3600r/min離心20min，收集上清液。取5ml上清液，加入3倍體積的95％的乙醇，4℃靜置過夜；3600r/
8、min離心10min，收集沉淀，用60℃熱水溶解，定容至200ml，即得到胞外多糖液(EPS)?！ ?.3.2多糖含量測定 采用蒽酮比色法〔3〕測定多糖含量，經(jīng)測定每毫升子囊果多糖液、胞內(nèi)多糖液、胞外多糖液分別含有多糖2000，2500，100mg?！ ?.4體外抑菌實(shí)驗(yàn) 1.4.1抑菌圈的測定
