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1、黃連素的抗炎作用及其機(jī)制苞政甄'磷?434?中國藥理學(xué)通報ChinesePharraacologicalBulletin1998Oct;14(5):434～7～j7R黃連素的抗炎作用及其機(jī)制尺77/?/_盟嬰爾遜江.托卡依劉發(fā)(新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部藥理學(xué)教研室人體解剖學(xué)教研室,烏魯未齊830054)中國圈書分類號R282.1}R971.1'R979.5摘要目的探討黃連素抗炎作用及其機(jī)制.方法(采用中性粒細(xì)胞趨化法,化學(xué)發(fā)光法微酸滴定法和紫外分光光度法等,從細(xì)胞和分子水平觀察黃連素(berbefiae,Ber)對中性粒細(xì)胞及幾種重要炎癥介質(zhì)的影響結(jié)果5×10,5×10叫mol
2、?L叫明顯抑制趨化固子zAP(zymosan—activitedplasma)誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞趨化}抑制多形棱白細(xì)胞酵母多糖誘導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光{對白細(xì)胞系產(chǎn)生的羥自由基及過氧化氫導(dǎo)致的化學(xué)發(fā)光亦有顯著的抑制作用;明顯降低中性粒細(xì)胞中磷脂酶Az(PLA2)的活性.在整體實驗中,Bet30,60,90mg?kg～,ig,可明顯降低大鼠炎癥組織中PGE:的含量.結(jié)論Bet的抗炎作用可能與抑制中性粒細(xì)胞趨化,產(chǎn)生活性氧的功能,抑制自由基產(chǎn)生,降低PLA.活性,減少炎癥組織中PGE:的產(chǎn)生等多因素有關(guān).關(guān)鍵詞趨化性;化學(xué)發(fā)光{磷脂酶A;前列腺素E黃連素是從黃連根莖中提取的一種季銨類化合物.
3、l臨床上作清熱,解毒,抗菌類藥物應(yīng)用.黃連素在心血管,傳出神經(jīng)系統(tǒng)及治療糖尿病等領(lǐng)域都有肯定的作用":.近年來,黃連素的抗炎免疫藥理作用逐漸引起人們的注意.本室耿東升等研究認(rèn)為,黃連素可增強小鼠非特性免疫,抑制細(xì)胞和體液免疫0.本文對黃連素的抗炎作用及其機(jī)制進(jìn)行試驗研究目的在于充實和完善對黃連素的基礎(chǔ)研究,為臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)依據(jù).1實驗材料1.1藥品與試劑鹽酸黃連素(berberinehy—drochloride,Ber),東北制藥廠提供,批號:93一O9—187,用前以相應(yīng)緩沖液配成合適濃度.角叉菜膠(carrageenin),遼寧省藥物研究所產(chǎn)品.環(huán)磷酰胺(cycl0p
4、h∞phamide),上海第十二制藥廠產(chǎn)品.魯米諾(1uminol,氨基苯二酰一肼),德國E?Merck產(chǎn)品.酵母多糖(zymosan),美國Sigma公司產(chǎn)品.人血,烏魯木齊中心血站健康志愿者提供.新生小牛血1997-07—16收稿.1997—12-2l修回新疆軍區(qū)藥材庫,烏魯木齊,830002作者簡介:蔣檄揚.男,26歲,硬士.講師;劉發(fā).男.62歲,教授,碩士生導(dǎo)師,中國藥理學(xué)告常務(wù)理事清(newborncalfserum,NCS),新疆種牛場出品,用前56℃滅活30min1.2儀器二氧化碳培養(yǎng)箱,MCO96型,日本SANYOElecticCoLtd產(chǎn)品.液閃儀,LKB
5、一1217型Finland產(chǎn)品.75—1型可見紫外分光光度儀,上海第三分析儀器廠產(chǎn)品.倒置顯微鏡,重慶光學(xué)儀器廠產(chǎn)品.1.3動物Wistar大鼠,新疆流行病研究所動物室提供.生產(chǎn)證號:新醫(yī)動字(94)一16001號.2實驗方法和結(jié)果2.1對中性粒細(xì)胞瓊脂糖趨化實驗的影響.采用右旋糖酐沉淀法從健康成人抗凝血中提取.檢查細(xì)胞存活率>0.95以上,調(diào)整白細(xì)胞濃度5x10?L備用.依文獻(xiàn)"制備瓊脂糖凝膠玻片.趨化因子制備(zAP);酵母多糖以生理鹽水清洗數(shù)次,加入新鮮制備的大鼠血清,酵母多糖終濃度為10g?L～,37℃孵育1h,離心去酵母上清即為ZAP,儲存于一2Oc備用,取上
6、述白細(xì)胞懸液分為5組,分別加入Per終濃度為5×10～,5×10一,5×10tool?L-.,地塞米松終濃度為5x10mol?L_.,對照組加入等量的RPMI1640培養(yǎng)液,37C孵育1h,150Xg離心5min,棄上清,加入等量的RPMI1640培養(yǎng)液,再次混懸白細(xì)胞,向制備瓊脂糖凝膠玻片的各孔加入白細(xì)胞懸液,趨化因子ZAP,等量的RPMI1640培養(yǎng)液1o1,37℃CO培養(yǎng)箱中孵育12h.在倒置顯微鏡用測微尺準(zhǔn)確測定白細(xì)胞隨機(jī)運動擴(kuò)散距離及趨化性運動距離.并計算抑制百分率:(對照組擴(kuò)散距離一實驗組擴(kuò)散距離)/對照組擴(kuò)散距離×結(jié)果,Per5x10～,5x10tool?L可明
7、顯抑制白細(xì)胞趨化性運動,5x10tool?L可明顯抑制白細(xì)胞隨機(jī)運動(表1).2.2對多形核白細(xì)胞呼吸爆發(fā)化學(xué)發(fā)光的影響多形核白細(xì)胞(PMNs)從角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠急性胸膜炎中提取制備,調(diào)整多形核白細(xì)胞數(shù)至4×1O.?L備用.瑞氏染色,細(xì)胞分類,其中PMNs>09,以臺盼藍(lán)作活力測定,活細(xì)胞數(shù)>0.95.以同種大鼠血清調(diào)理酵母多糖后,酵母多糖以375g?L再混懸于Hanks液中備用.取制備的PMNs0.5中國藥理學(xué)通報ChineseP&刪c.gfBulletin1998OctF14(
