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《真核生物基因表達的調控》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在教育資源-天天文庫。
1、課次：19教學目的：使學生了解真核基因表達調控的特點、轉錄前的調控，掌握增強子的作用特點和反式作用因子的DNA結合域的結構花式。重點：增強子和反式作用因子的DNA結合域的結構花式。難點：反式作用因子的DNA結合域的結構花式。復習舊課：提問2人，了解教學效果。導入新課：第八章真核生物基因表達的調控第一節(jié)概述真核生物細胞中由核膜將核和細胞質分隔開，轉錄和翻譯并不偶聯；基困組是由多條染色體組成。真核基因的調節(jié)分為：真核基因表達調控的特點：第二節(jié)轉錄前的調控一.??DNA的甲基化與去甲基化真核DNA中的胞嘧啶約有5%被甲基化為5-甲基胞嘧啶(5-methylcytidi
2、ne,m5C)，而活躍轉錄的DNA段落中胞嘧啶甲基化程度常較低。甲基化可使基因失活，去甲基化又可使基因恢復活性。二染色質結構對真核基因轉錄的調控1.染色質結構影響基因轉錄 常染色質中的基因可以轉錄，異染色質(heterochromatin)，無基因轉錄表達。2.組蛋白的作用 ü組蛋白扮演了非特異性阻遏蛋白的作用，ü非組蛋白成分起到特異性的去阻遏促轉錄作用。ü核小體結構影響基因轉錄。三基因重排和基因擴增對基因表達的影響基因重排(generearrangement)，即原胚性基因組中某些基因會再組合變化形成第二級基因?；驍U增(geneamplificatio
3、n)，即基因組中的特定段落在某些情況下會復制產生許多拷貝?；騺G失：在細胞分化過程中，丟掉某些基因而去除其活性。例如某些原生動物，線蟲、昆蟲、甲殼類動物，體細胞常丟掉部分或整條染色體，只保留將來分化產生生殖細胞的那套染色體。例如在蛔蟲胚胎發(fā)育過程中，有27％DNA丟失。在高等動植物中，尚未發(fā)現類似現象。第三節(jié)真核基因轉錄水平的調控1順式作用元件(cis-actingelements)順式作用元件：對基因表達有調節(jié)活性的DNA序列，其活性只影響與其自身同處在一個DNA分子上的基因；通常不編碼蛋白質，多位于基因旁側或內含子中。1.1啟動子(1)核心啟動子成分，如TA
4、TA框；(2)上游啟動子成分（UPE），如CAAT框，GC框，八聚體（octamer）等；表哺乳動物RNAPolⅡ啟動子上游轉錄因子結合的序列元件?組件保守順序DNA長度結合因子大小（Da）豐度（/細胞）分布TATAboxTATAAAA～10bpTBP27,000?普遍CAATboxGGCCAATCT～22bpCTF/NF160,000300,000普遍GCboxGGGCGG～20bpSP1165,00060,000普遍OctamerATTTGCAT～20bpOct-176,000?普遍OctamerATTTGCAT23bpOct-252,000?淋巴細胞KBG
5、GGACTTTCC～10bpNFKB44,000?淋巴細胞KBGGGACTTTCC～10bpH2·TH1??普遍ATFGTGACGT～20bpATF??普遍1.2增強子Enhancer又稱遠端上游序列（farupstreamsequence）。最早SV40病毒中發(fā)現，可使旁側的基因轉錄提高100倍。組成：100-200bp，可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。正性調控元件增強子的作用特點：①促進基因的轉錄效率遠距離發(fā)揮作用(100~500bp，10Kb)②促進轉錄，不具有啟動子專一性③功能與方向、位置無關④具有組織或細胞特異性1.3沉默子silencer負性調控元件
6、，與轉錄因子結合抑制轉錄。作用特點：不受序列方向的影響，能遠距離發(fā)揮作用，并可對異源基因的表達起作用。2反式作用因子（trans-actingfactors）反式作用因子：通過擴散自身表達產物（酶、調節(jié)蛋白）控制其他基因的表達，其編碼基因與其識別或結合的靶序列不在同一個DNA分子上。轉錄因子(transcriptionfactor)：起正調控作用的反式作用因子。2.1TF的分類：(1)??通用轉錄因子，在一般細胞中普遍存在，主要識別一些啟動子的核心啟動成分TATA框，如TBP；上游啟動子成分CAAT框，如CTF/NF-1；GC框如SP1；識別八聚體核苷酸的Oct
7、-1等；(2)特異轉錄因子：特殊組織與細胞中的，如淋巴細胞中的Oct-2；(3)誘導型因子：和特異調控序列結合。2.2TF結構特征DNA結合域，bindingdomain，BD：<100aa，大溝轉錄激活域，activedomain，AD：30-100aa調節(jié)域：與其它因子或調控蛋白結合1）轉錄激活域帶負電荷的螺旋結構如GCN4，GAL4rich-Gln如SP1,AP2,oct1,oct2rich-pro如CTF/NF12）DNA結合域的結構花式/基元（motif）①鋅指（zincfinger）由一小組保守的氨基酸和鋅離子結合，形成了相對獨立的功能域，像一根根手
8、指伸向DNA的大溝。A.
