復(fù)方烏杞膠囊對小鼠免疫功能影響實(shí)驗(yàn)研究

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1、復(fù)方烏杞膠囊對小鼠免疫功能影響實(shí)驗(yàn)研究復(fù)方烏杞膠囊對小鼠免疫功能影響實(shí)驗(yàn)研究更新日期：2010-07-07點(diǎn)擊：唐顯民提要　對復(fù)方烏杞膠囊對小鼠免疫功能的影響作了動物實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明該藥能增加小鼠胸腺及脾臟指數(shù)，增強(qiáng)小鼠腹腔吞噬功能，能明顯增加小鼠對SRBC抗體的生成；能增強(qiáng)特異性體液免疫功能，同時(shí)還能增強(qiáng)小鼠外周血液T淋巴細(xì)胞的功能。提示復(fù)方烏杞膠囊具有良好的增強(qiáng)免疫功能的作用。關(guān)鍵詞　復(fù)方烏杞膠囊；　免疫器官指數(shù)；　巨噬細(xì)胞吞噬功能　　復(fù)方烏杞膠囊為我所研制的新藥，已通過“江蘇省新藥評審委員會”專家評審，準(zhǔn)備上報(bào)衛(wèi)生部審定。處方中有烏梢蛇、枸杞子等中藥。是按照傳統(tǒng)炮制方法的要求，結(jié)合現(xiàn)

2、代工藝制成的硬膠囊制劑，具滋腎養(yǎng)肝、祛風(fēng)明目、強(qiáng)筋骨、增強(qiáng)免疫等功能，主治肝、腎之虛虧。我們通過對復(fù)方烏杞膠囊對小鼠免疫功能影響進(jìn)行了動物實(shí)驗(yàn)研究?，F(xiàn)報(bào)告如下。1　實(shí)驗(yàn)材料　　昆明系小鼠(由南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)；復(fù)方烏杞膠囊(銀灰色粉劑，自制，批號971229，臨用前用蒸餾水配成所需濃度)，人參(由南京市藥材公司購入，自制成0.05g/ml水煎液備用)，淋巴細(xì)胞分離液(上?；瘜W(xué)試劑廠)，堿石灰(上海五四化學(xué)廠)；CS501型超級恒溫水鍋(重慶分析儀器設(shè)備廠)，82-1型離心機(jī)，U型血凝板(上海塑料三廠)，OLYMPUS光電顯微鏡(日本)。2　實(shí)驗(yàn)方法2.1　對小鼠免疫器官指數(shù)的影

3、響［1］：取昆明小鼠40只，雌雄各半，體重23～25g，隨機(jī)均分為4組，即復(fù)方烏杞膠囊小劑量組、復(fù)方烏杞膠囊大劑量組、人參水煎液組、生理鹽水組。各組均灌胃給藥1次/d，連續(xù)10d。于第11d脫臼處死各組小鼠，剖腹，立即取脾臟、胸腺稱重，并計(jì)算每20g小鼠的器官指數(shù)。結(jié)果見表1。表1　復(fù)方杞膠囊對小鼠免疫器官指數(shù)的影響組　　別劑　量動物數(shù)器官指數(shù)(±s，mg/20g)脾臟胸腺生鹽鹽水組　　　　　10ml/kg10　　58.8±10.6　　36.7±8.9人參水煎液組　　　　0.3g/kg1082.6±16.3**53.3±15.8*復(fù)方烏杞膠囊小劑量組0.9g/kg1072.7±15.4*45

4、.5±14.7復(fù)方烏杞膠囊大劑量組2.2g/kg1079.8±21.5*50.4±13.6*　　　與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方烏杞膠囊兩個(gè)劑量組均能增加小鼠胸腺及脾臟指數(shù)，與生理鹽水組比較，差異顯著(P＜0.05)。2.2　對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響［1］：取昆明小鼠40只，雌雄各半，體重18～22g，隨機(jī)均分為4組，即復(fù)方烏杞膠囊小劑量組、復(fù)方烏杞膠囊大劑量組、人參水煎液組、生理鹽水組。各組均灌胃給藥1次/d，連續(xù)10d。于給藥后第6d每鼠腹腔注射10%蛋白胨0.2ml，停藥后次日取腹腔巨噬細(xì)胞，以生理鹽水將巨噬細(xì)胞配成適當(dāng)?shù)臐舛?，加入適量5

5、%雞紅細(xì)胞混合，37℃溫育30min，每隔10min搖動1次，4000rmp離心10min，取細(xì)胞沉淀物制成涂片，待自然干燥后用甲醇固定3min，姬姆薩染色7min，在油鏡下觀察100個(gè)巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞總數(shù)和吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)，并計(jì)算吞噬指數(shù)和吞噬百分比?！　⊥淌芍笖?shù)=(100個(gè)巨噬細(xì)胞中吞噬雞紅細(xì)胞總數(shù))/(100個(gè)巨噬細(xì)胞)　　吞噬百分比=(吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù))/(100個(gè)巨噬細(xì)胞)×100%　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果(見表2)表明：復(fù)方烏杞膠囊兩個(gè)劑量組能明顯增加小鼠腹腔吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)和吞噬百分比，與生理鹽水組比較，差異非常顯著(P＜0.05，P＜0.01)。提示復(fù)方烏杞膠囊可增

6、強(qiáng)小鼠腹腔吞噬細(xì)胞的吞噬功能。表2　復(fù)方杞膠囊對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響組　　別劑　量動物數(shù)(只)吞噬百分比(±s，%)吞噬指數(shù)(±s)生鹽鹽水組　　　　　10ml/kg10　19.4±8.6　0.42±0.13人參水煎液組　　　　0.3g/kg1040.5±13.8**1.03±0.48**復(fù)方烏杞膠囊小劑量組0.9g/kg1027.6±5.3*0.88±0.35**復(fù)方烏杞膠囊大劑量組2.2g/kg1038.0±10.7**0.95±0.42**　　　與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.012.3　對SRBC致敏小鼠抗體生成的影響［2］：取昆明小鼠40只，雌雄各半，體重23

7、～25g，隨機(jī)均分為4組，即復(fù)方烏杞膠囊小劑量組、復(fù)方烏杞膠囊大劑量組、人參水煎液組、生理鹽水組。各組均灌胃給藥1次/d，連續(xù)10d。于開始用藥后次日腹腔注射10%SRBC0.2ml/只。停藥后次日眼眶取血，分離血清，56℃滅活30min，以生理鹽水倍比稀釋，將不同稀釋度的血清分別加入到血凝板內(nèi)，觀察血凝程度，并根據(jù)下列公式計(jì)算抗體積數(shù)。　　抗體積數(shù)N=∑(S1+2S2+3S3+nSn)　　(其中n代表稀釋倍