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1、肺炎克雷伯菌超廣譜β程訓(xùn)民，張琪，徐元宏，李敏，朱素珍，沈繼錄【關(guān)鍵詞】,肺炎克雷伯菌DetectionofextendedspectrumbetalactamasesandanalysisofantibioticresistanceinclinicalisolatesofKlebsiellapneumoniae 【Abstract】AIM:Tostudythephenotypeandgenotypedistributionofextendedspectrumbetalactamases(ESBLs)producingKlebsiel
2、lapneumoniae（K.pneumoniae）anditsdrugresistance.METHODS:SeventysevenstrainsofK.pneumoniaeinedby1999NCCLsmethodsandthegenotypeofESBLsplifiedbypolymerasechainreaction(PCR).Theantibioticsusceptibilityofbacteriainedbymicrodilution.RESULTS:Inthe77positiveK.pneumoniaeisolatesof
3、theinitialscreentest,45strains(58.1%)edbycefotaximeandcefotaximeclavulanicacidbutonly27strainsedbyceftazidimeandceftazidimeclavulanicacid.PCRshooniaeisoneofthemostmonESBLsproducingstrains.TheratesofESBLsproducingK.pneumoniaesignificantlyincreaseinrecentyearsandCTXMismost
4、mongenotype.Somestrainscarrytoregenotypes.Imipenemisthemostsusceptibleantibiotic. 【Keyoniae;betalactamases;phenotype;genotype;drugresistance；antibiotic 【摘要】目的：了解產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及對常用抗生素的耐藥情況.方法：用1999年NCCLS推薦的初篩試驗(yàn)從77株肺炎克雷伯菌中篩選出可疑產(chǎn)ESBLs細(xì)菌，并用確證試驗(yàn)加以確認(rèn)；用PCR的方法擴(kuò)
5、增其基因型；用微量液體稀釋法做藥敏實(shí)驗(yàn).結(jié)果：將初篩得到的可疑菌株用紙片擴(kuò)散法確證，用頭孢噻肟和頭孢噻肟/克拉維酸測定，77株肺炎克雷伯菌中共檢出45株產(chǎn)ESBLs（58.1%）；而用頭孢他啶和頭孢他啶/克拉維酸檢測ESBLs陽性菌為27株.PCR擴(kuò)增基因型陽性結(jié)果為TEM型19株、SHV型8株、CTXM型36株、OXA型11株.結(jié)論：近年來肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs率顯著升高；基因型以CTXM型為主，有些菌株同時(shí)攜帶多種耐藥基因；亞胺培南仍為首選藥物,頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦為候選藥物. 【關(guān)鍵詞】肺炎克雷伯菌;β內(nèi)酰胺酶
6、類;表型;基因型;耐藥性;抗菌藥物 0引言 超廣譜β內(nèi)酰胺酶(extendedspectrumbetalactamases,ESBLs）是由質(zhì)粒介導(dǎo)的能使細(xì)菌對三代頭孢菌素類、青霉素類及單酰胺類抗生素耐藥的一類酶，ESBLs主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，以肺炎克雷伯菌為代表菌屬.近年來，肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株逐年增多，ESBLs在菌株間的轉(zhuǎn)移和傳播〔1〕，使其耐藥性成為突出問題.我地區(qū)產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的檢測結(jié)果及耐藥性分析如下. 1材料和方法 1.1材料 肺炎克雷伯菌77株來自200302/200411淮北市人民醫(yī)院、
7、淮北礦工總院、濉溪縣醫(yī)院疑為感染患者血液、骨髓、漿膜腔穿刺液、腦脊液、尿液和前列腺液等.質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922,肺炎克雷伯菌ATCC700603，標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)酶Eco菌株TEM1，TEM3，SHV5，CTXM3，CTXM24，TOHO1，OXA1，OXA2和OXA10均由安徽醫(yī)科大學(xué)徐元宏副教授惠贈.藥敏試驗(yàn)采用微量液體稀釋法,ESBLs檢測采用頭孢他啶、氨曲南、頭孢噻肟、頭孢曲松紙片進(jìn)行初篩,確證試驗(yàn)采用頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟/克拉維酸紙片、藥敏培養(yǎng)基（MuellerHinton瓊脂）均購自O(shè)xiod公司.根據(jù)GenB
8、ank公布的blaTEM，blaSHV，blaCTXM和blaOXA的DNA序列設(shè)計(jì)合成8對特異性引物，均由上海生物工程公司合成.PCR擴(kuò)增試劑盒購自大連寶生生物公司. 1.2方法 選用頭孢他啶、氨曲南
