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《糖尿病腎病患者晚期氧化蛋白產(chǎn)物與sod、tnf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、糖尿病腎病患者晚期氧化蛋白產(chǎn)物與SOD、TNF：孫麗娜,吳志賢,張勝利,林憶陽,李春梅,薛耀明【關(guān)鍵詞】糖尿病腎?。?晚期氧化蛋白產(chǎn)物；,超氧化物歧化酶；,腫瘤壞死因子 摘要:目的研究糖尿病腎病患者血清蛋白氧化損傷指標(biāo)晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）的改變及其與超氧化物歧化酶（SOD）、腫瘤壞死因子α(TNFα)的關(guān)系，探討蛋白氧化損傷與糖尿病腎病氧化應(yīng)激狀態(tài)和炎癥因子的關(guān)系。方法糖尿病患者85例，根據(jù)尿微量白蛋白排泄率和肌酐水平分為無腎病(DM)組、早期腎病(DN3)組、臨床腎病(DN4)組、終末期腎病(DN5)組。用組(58.2±17.7)μmol/L（P<0.01）
2、；DN3組血清AOPP(72.7±17.2)μmol/L與DM組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血清AOPP與SOD顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.217，P<0.05），與TNFα無明顯相關(guān)性(r=-0.064，P<0.01)。結(jié)論臨床糖尿病腎病患者的血清蛋白氧化較無糖尿病腎病患者增強(qiáng)，并且與糖尿病腎病氧化應(yīng)激狀態(tài)有關(guān)，但與炎癥因子TNFα無明顯關(guān)系。 關(guān)鍵詞:糖尿病腎??；晚期氧化蛋白產(chǎn)物；超氧化物歧化酶；腫瘤壞死因子α 研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1]。氧化應(yīng)激所致蛋白氧化損傷可能在糖尿病血管并發(fā)癥中有重要作用意義。Kalousova等發(fā)現(xiàn)，從2型糖尿病的啟動(dòng)
3、到臨床發(fā)病的多年時(shí)間中，當(dāng)輕度高血糖導(dǎo)致氧化應(yīng)激后，蛋白氧化損傷就已經(jīng)發(fā)生[2]。在腎臟疾病患者，氧化應(yīng)激可促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞活化，介導(dǎo)炎癥因子釋放，導(dǎo)致蛋白氧化損傷[3]。因此，可能糖尿病腎病患者的蛋白氧化損傷是逐漸加重的，且與炎癥因子有關(guān)。筆者檢測不同時(shí)期糖尿病腎病患者血清蛋白氧化損傷指標(biāo)晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）水平，并觀察其與血清抗氧化系統(tǒng)的指標(biāo)超氧化物歧化酶（SOD）、炎癥因子腫瘤壞死因子α(TNFα)的相關(guān)性，探討蛋白氧化損傷與糖尿病腎病氧化應(yīng)激狀態(tài)和炎癥因子的關(guān)系?！ ?對(duì)象與方法 1.1對(duì)象按照1999年組），UAER持續(xù)30～300mg/24h為早期腎病組
4、（DN3組），UAER＞300mg/24h為臨床腎病組（DN4組），血清肌酐（Cr）＞445μmol/L為終末期腎病組（DN5組）。排除急、慢性感染和急性心臟、肝臟、胃腸道及腦血管病變患者；排除原發(fā)性慢性腎小球腎炎和其他繼發(fā)性蛋白尿疾病如高血壓腎病、慢性腎盂腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡性腎病等?；颊哌M(jìn)入研究<1月未服用抗氧化劑如維生素E、維生素C。各組年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）比較見表1。 表14組患者的臨床資料（略） Tab1Clinicalcharacteristicsofthestudypopulation 除性別為例數(shù)外，其余數(shù)據(jù)為x±s.DM:無腎病；DN
5、3：早期腎?。籇N4：臨床腎?。籇N5：終末期腎??；UAER：尿微量白蛋白排泄率（(正常值：<30mg/24h)；Cr：血清肌酐（正常值：66～133μmol/L). 1.2試劑與設(shè)備冰醋酸,碘化鉀溶液1.16mmol/L，氯胺T，迭氮鈉磷酸鹽(NaN3)緩沖液(pH7.0)，三氯醋酸(TCA)溶液0.61mmol/L，試劑均購自原第一軍醫(yī)大學(xué)試劑中心。黃嘌呤，黃嘌呤氧化酶0.25mg/mL，[5,5’二硫代雙(2硝基苯甲酸)]（DTNB）顯色液1.0mmmol/L，GSH溶液1.0，均購自美國Sigma公司?；瘜W(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑lucigenin2mmmol/L購自美國M
6、olecularProbe公司；人血清新喋呤ELISA試劑盒96T購自德國IBL公司。分光光度計(jì)(T680,上海分析儀器廠)?；瘜W(xué)發(fā)光儀(ultiskanMk3,美國Thermo公司）?！ ?.3方法受試者清晨空腹采靜脈血2mL,室溫靜置1h內(nèi)離心10min(2000r/min),取血清避光保存于-70℃冰箱待測,所有標(biāo)本一次測定?！ ?.3.1AOPP測定按文獻(xiàn)[3]的分光光度計(jì)法加以改進(jìn)：血清與PBS按1∶5稀釋，以氯胺T同法稀釋作空白對(duì)照，加入1.16mmol/LKI10μL及乙酸20μL后立刻測340nm處的吸收值。AOPP濃度以氯胺T含量表示。 1.3.2SOD及
7、TNFα測定SOD采用黃嘌呤氧化酶法:用磷酸鉀緩沖液配制含0.1mg/mL黃嘌呤和2μmol/Llucigenin化學(xué)發(fā)光液。將樣品10μL加入96孔板內(nèi)，空白加入PBS10μL。每孔加入新鮮配制的化學(xué)發(fā)光液200μL。在化學(xué)發(fā)光儀上測本底發(fā)光值(25℃)。每孔加入黃嘌呤氧化酶10μL啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光，連續(xù)測定發(fā)光值(6min)。將最高發(fā)光值減本底，計(jì)算各樣品抑制發(fā)光的百分率，活性單位定義為：抑制50%發(fā)光值為一個(gè)活性單位，計(jì)算每mL樣品活性單位(u)?！ NFα的測定采用ELISA方法：加生物素標(biāo)記的抗
