資源描述：
《丙二醛在大鼠繼發(fā)性脊髓損傷中的表達及其意義》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、丙二醛在大鼠繼發(fā)性脊髓損傷中的表達及其意義王楠1賈忪青2(通訊作者)(1沈陽醫(yī)學(xué)院奉天醫(yī)院骨外四科110024;2中國醫(yī)科大學(xué)盛京醫(yī)院骨外一科遼寧沈陽110001)【中圖分類號】R681【文獻標識碼】A【文章編號】1672-5085(2012)9-0123-02【摘要】目的動態(tài)觀察脊髓損傷后脊髓內(nèi)丙二醛的含量變化以探討脊髓繼發(fā)性損傷的病理機制。方法健康雄性SD大鼠60只，對照組10只，脊髓損傷組50只，脊髓損傷組再分5個時間點：12h、2d、5d、7d、14d,每個時間點10只大鼠。采用靜壓法建立大鼠SCI模型。各組大鼠分別于傷后12h、2d、5d、7d、14d,通過頸動脈放血處死大
2、鼠，HE染色觀察病理學(xué)改變，硫代巴比妥酸比色法檢測脊髓中MDA。結(jié)果鏡下可見SCI后12h?2d損傷局部神經(jīng)元核固縮，胞體縮小，胞質(zhì)深伊紅染色，成為紅色神經(jīng)元。傷后2?5d，軸突腫脹，出現(xiàn)空泡，白質(zhì)內(nèi)祌經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7?14d膠質(zhì)細胞增生明顯，可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細胞。對照組MDA含量為(22.03±2.98)μmol/g；傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高，7d時升至最高峰，升幅達90%，隨后逐漸下降，傷后14d恢復(fù)并接近傷前水平。脊髓損傷組各時間點MDA含量均顯著高于對照組(P<0.05)oMDA值在7d內(nèi)顯著升高，并與脊髓損傷程度呈正相關(guān)(
3、「=0.765,P<0.05)o結(jié)論脊髓損傷后MDA表達升高，與繼發(fā)性脊髓損傷缺血缺氧及病理變化密切相關(guān)。【關(guān)鍵詞】丙二醛脊髓損傷自由基脊髓損傷(Spinalcordinjury,SCI)是人類嚴重致殘和死亡的重要原因，急性脊髓損傷后常繼發(fā)多種祌經(jīng)生化改變，這些改變在加重脊髓繼發(fā)性損傷中起重要作用。SCI后自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)在繼發(fā)性反應(yīng)中占有非常重要的地位，可以使脊髓血流量進一步減少、水腫加劇，引起嚴重神經(jīng)結(jié)構(gòu)與功能損傷甚至器質(zhì)性壞死，從而使祌經(jīng)功能永久喪失［1］。所以自由基與脂質(zhì)過氧化損傷學(xué)說在脊髓損傷發(fā)病機制中尤受重視［2-3］。兩二酸（Malonyldialdeh
4、yde,MDA）作為脂質(zhì)過氧化最終產(chǎn)物，可直接反應(yīng)體內(nèi)自由基的變化和機體受自由基攻擊的嚴重程度［4-5］。冇研究發(fā)現(xiàn)，損傷后早期脊髓MDA的含量就可以明顯升高［6-7］。研宄MDA在SCI中量的吋序性變化以及蘇是否與脊髓神經(jīng)功能的損害存在量效關(guān)系，對于SCI的進-步治療和改善預(yù)后有著十分重大的意義。本研宄旨在建立鼠靜壓型脊髓損傷模型的基礎(chǔ)上，動態(tài)觀察脊髓損傷后脊髓內(nèi)丙二醛MDA含量以探討脊髓繼發(fā)性損傷的病理機制。1材料與方法1.1實驗動物與分組健康雄性SD人鼠60只，體重250±20克，由中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，隨機分為正常對照組10只，脊髓損傷組50只（損傷后1
5、2h、2d、5d、7d、14d各10只）。在觀察期間大鼠如有死亡、感染，立即補充。1.2動物模型的建立：采用靜壓型大鼠SCI模型。手術(shù)顯微鏡下以胸10為中心，暴露上下為椎板，直蚊式有齒血管鉗咬除椎板充分暴露硬脊膜。以30克的重量局部壓迫8分鐘即可造成重度SCI模型。所有動物均在手術(shù)后60min內(nèi)清醒。1.3病理學(xué)觀察：脊髓損傷后12h、2d、5d、7d、14d,分別通過頸動脈放血處死動物，多聚甲醛灌注固定脊髓組織，取受損節(jié)段脊髓組織約1.0cm,行石蠟包埋，HE染色后，光鏡下觀察病理學(xué)改變。1.4脊髓中MDA檢測：脊髓損傷后12h、2d、5d、7d、14d,分別通過頸動脈放血處死動物
6、。放血處死后，迅速取各吋點受損節(jié)段脊髓組織（正常對照組取相應(yīng)節(jié)段的組織）1?2cm，用冰生理鹽水漂凈血跡，濾紙拭干，立即放入-80°C冰箱冷藏，集齊標本后統(tǒng)一檢測。MDA測定采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法［8］,利用721發(fā)光光度計于波長532nm測定，含量單位：μmol/g。1.5統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0forWindows統(tǒng)計軟件。所有均以x-±S表示，不同時點組內(nèi)組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，以P<0.05為冇顯著性差異。2結(jié)果2.1病理學(xué)觀察鏡下可見SCI后12h?2d損傷局部神經(jīng)元核固縮，胞體縮小，胞質(zhì)深伊紅染色，成為紅色神經(jīng)元。傷后2?
7、5d，軸突腫脹，出現(xiàn)空泡，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7?14d膠質(zhì)細胞增生明顯，可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細胞。具體結(jié)果如圖1所示：圖1、SCI后不同吋間點脊髓組織病理學(xué)結(jié)果(HE染色，100×)2.2SCI后不冋吋間點脊髓組織中MDA含量變化對照組MDA含量為(22.03±2.98)μmol/g；傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高，7d吋升至最高峰，升幅達90%，隨后逐漸下降，傷后14d恢復(fù)并接近傷前水平，脊髓損傷組各吋
