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1、分類號：R651.2學(xué)校代碼：10392學(xué)科專業(yè)代碼：100101學(xué)號：200703221福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文NeuroD在大鼠脊髓損傷過程中的特異性表達(dá)NeuroDSpecificExpressioninSpinalCordInjuryofRats學(xué)位類型：醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院申請人：簡國堅(jiān)學(xué)科、專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)導(dǎo)師：王瑋教授研究起止日期：2011年5月至2012年8月答辯日期：2012年12月28日二○一二年十二月目錄英文縮略詞表……………………………………………………………………1中文摘要……………………………………
2、……………………………………2英文摘要…………………………………………………………………………3前言………………………………………………………………………………5材料與方法………………………………………………………………………7結(jié)果………………………………………………………………………………17討論………………………………………………………………………………27結(jié)論………………………………………………………………………………31參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………………32附表……………………………………………………………
3、…………………35致謝………………………………………………………………………………37綜述………………………………………………………………………………38參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………………47英文縮略詞表NeuroDneurogenicdifferentiation神經(jīng)源性分化因子bHLHbasichelix-loop-helix堿性螺旋-環(huán)-螺旋MSCmesenchymalstemcell骨髓干細(xì)胞GFAPglialfibrillaryacidicprotein膠質(zhì)纖維酸性蛋白R(shí)T-PCRreversetrans
4、criptionpolymerasechainreaction逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DAB3,3’-diaminobenzidine二氨基聯(lián)苯胺DEPCdiethylpyrocarbonate焦磷酸二乙酯EBethidiumbromide溴化乙錠TBStrisbuffersaline氨基丁三醇緩沖液TBSTTweentrisbuffersaline含Tween20的TBS緩沖液HRPhorseradishperoxidase辣根過氧化物酶PBSphosphate-bufferedsaline磷酸鹽緩沖液GAPDHglyceraldehydesph
5、osphatedehydrogenase磷酸甘油醛脫氫酶TEMEDtetramethylethylenediamine四甲基二乙胺Tris-HclTris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽SDS-PAGEsodiumdodecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳TBETris-Boricacid-EDTA三羥甲基氨基甲烷-硼酸-乙二胺四乙酸SPSSstatisticalpackageforsoci
6、alscience社會(huì)科學(xué)統(tǒng)計(jì)程序BBBBassoBeattieBresnahan運(yùn)動(dòng)功能評分及腳印分析1NeuroD在大鼠脊髓損傷過程中的特異性表達(dá)中文摘要目的探討大鼠脊髓損傷過程中神經(jīng)源性分化因子（NeurogenicDifferentiation，NeuroD）的分布、變化及規(guī)律，進(jìn)而研究其對脊髓損傷模型的影響。方法SD大鼠腹腔麻醉，無菌條件下顯露并咬除T10棘凸及椎板，顯露其下方的硬脊膜，采用改良Allen’s打擊法進(jìn)行打擊建立急性脊髓損傷模型。假手術(shù)對照組同法暴露，但不損傷脊髓。建模成后采用免疫組織化學(xué)法檢測NeuroD在脊髓中分布情
7、況；應(yīng)用RT-PCR方法檢測在大鼠脊髓損傷不同時(shí)段NeuroDmRNA的表達(dá)變化；應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlotting)對NeuroD蛋白在鼠脊髓損傷不同階段的表達(dá)進(jìn)行半定量分析，進(jìn)而確定NeuroD在SCI大鼠脊髓中表達(dá)的規(guī)律。結(jié)果免疫組化提示NeuroD主要表達(dá)在脊髓灰質(zhì)中，白質(zhì)中未見陽性反應(yīng)細(xì)胞。NeuroD陽性細(xì)胞經(jīng)常成團(tuán)排列，分布于損傷處與正常細(xì)胞的交界處。RT-PCR和蛋白免疫印跡結(jié)果提示NeuroD在大鼠脊髓損傷后不同時(shí)期都有表達(dá)：從脊髓損傷后第1天開始，NeuroD的表達(dá)呈現(xiàn)明顯升高，在第5天達(dá)到最高峰，隨后逐漸降
8、低。結(jié)論在大鼠脊髓損傷后的不同階段，NeuroD的表達(dá)在時(shí)間和空間上有明顯的變化差異：損傷后，NeuroD表達(dá)呈現(xiàn)升高的水平，到術(shù)后第5天達(dá)到最高峰；
