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1、褪黑素對(duì)大鼠脊髓損傷后iNOS表達(dá)的影響作者：李東武永剛趙爾曼楊秀玲段力軍【摘要】目的：探討褪黑素對(duì)大鼠脊髓損傷后誘生型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)的影響。方法：采用改良Allen′s撞擊法制備脊髓損傷模型；成年SD大鼠110只隨機(jī)分為假損傷組、損傷組和藥物治療組3組，其中損傷組和藥物治療組各50只，分5個(gè)時(shí)間點(diǎn)（8小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)、7天、14天）處死；假損傷組10只，于手術(shù)后14天處死，采用HE染色和免疫組化檢測(cè)脊髓損傷后脊髓組織中iNOS蛋白的表達(dá)。結(jié)果：與損傷組比較,藥物治療組大鼠損傷后脊髓組織iNOS表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論：褪黑素可通過(guò)抑制iNO
2、S蛋白表達(dá)對(duì)大鼠脊髓損傷起保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】脊髓損傷;褪黑素;誘生型一氧化氮合酶 AbstractObjective：ToinvestigatetheinfluenceofMelatoninontheinductionofinduciblenitricoxidesynthase(iNOS)expressioninspinalcorduponspinalcordinjury(SCI)inrats.Methods:SCImodelwasreproducedaccordingtoAllen′smethodwithmodification.OnehundredandtenadultSDratsw
3、ererandomlydividedintothreegroups:shaminjurygroup(n=10),thespinalcordinjuredgroup(n=50),andSCIwith11melatonintreatmentgroup(n=50).FortheSCIgroupswithorwithoutmelatonintreatment,ratswerekilledatdifferenttime(8h,24h,72h,7d,14d).Andratsofshaminjurygroupwerekilledat14dpostSCIoperation.HEstainingandImmu
4、nohistochemistrymethodwereemployedtodetectiNOSexpressioninspinalcord.Results:MelatonintreatmentsignificantlyreducestheinductionofiNOSexpressioninspinalcordofratssubjectedtoSCIoperation(P<0.05or0.01).Conclusion:Theresultsuggeststhatmelatoninmayexertprotectiveeffectonspinalcordinjurythroughinhibit
5、ingtheinductionofiNOSexpression. KeywordsSpinalcordinjury;Melatonin;Induciblenitricoxidesynthase(iNOS) 脊髓損傷(spinalcordinjury,SCI)后的繼發(fā)性損傷是一個(gè)復(fù)雜的病理過(guò)程,包括興奮性氨基酸、氧化性代謝產(chǎn)物和致炎細(xì)胞因子等多種效應(yīng)因子的釋放，可導(dǎo)致脊髓組織不可逆損害，表現(xiàn)為不同程度的運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)和自主神經(jīng)功能障礙。一氧化氮(NO)作為在體內(nèi)廣泛存在并具有多重生物學(xué)效應(yīng)的信號(hào)介質(zhì)可能起很重要的作用，體內(nèi)NO由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)生成
6、,NOS廣泛存在于包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的各系統(tǒng)中。NOS有3種亞型,其中誘生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)產(chǎn)生的11NO量大、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),通過(guò)直接引起過(guò)氧化損傷或作為信號(hào)介質(zhì)介導(dǎo)其它炎癥因子而起作用，表現(xiàn)出強(qiáng)的神經(jīng)毒性。褪黑素(5-甲氧基-N-乙酰色胺,melatonin,MT)主要是由松果體分泌的激素,能直接清除自由基,減輕細(xì)胞的過(guò)氧化損害[1]。本試驗(yàn)通過(guò)觀察大白鼠脊髓損傷后腹腔注射褪黑素對(duì)iNOS表達(dá)的影響，分析褪黑素在脊髓繼發(fā)性損傷中的可能作用，為臨床治療繼發(fā)性脊髓損傷提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究提供資料?！ ?材料與方
7、法 1.1主要儀器與試劑Olympus光學(xué)顯微鏡圖像采集系統(tǒng)顯微圖像分析系統(tǒng)(日本)，褪黑素購(gòu)自晶美北京分公司(瑞士Alexis公司生產(chǎn))，兔抗大鼠iNOS多克隆抗體免疫組化試劑盒、SABC試劑盒、DAB顯色試劑盒為武漢博士德生物工程有限公司提供?！ ?.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組健康成年SD大鼠110只,雌雄各半,體重250～330g。隨機(jī)分為假損傷組、損傷組和藥物治療組3組。其中損傷組和藥物治療組各50只，分5個(gè)
