褪黑素對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響

《褪黑素對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、褪黑素對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響【摘要】觀察褪黑素(melatonin，MT)對大鼠脊髓損傷(spinalcordinjury，SCI)后脊髓組織細胞凋亡的影響，探討其對脊髓損傷的保護作用。方法成年T治療組)。Sham組僅切除椎板未損傷脊髓；A、B兩組采用改良Allen法制成大鼠SCI模型，術(shù)后立即分別腹腔注射等體積無水乙醇、褪黑素(100mg/kg)；Sham組于術(shù)后48h、A和B組于術(shù)后8、24、48、72h和7d分別進行神經(jīng)功能評分和測定傷段脊髓組織凋亡細胞數(shù)。結(jié)果A組凋亡細胞百分率傷后24h開

2、始升高，48h達到高峰，72h開始下降；B組凋亡細胞百分率傷后24h、48h及72h與A組相比明顯減少，差異具有顯著性(P＜0.05或P＜0.01)；B組神經(jīng)功能比A組有明顯提高(P＜0.05)。結(jié)論SCI后應(yīng)用MT可以抑制脊髓組織神經(jīng)細胞凋亡，從而對脊髓損傷起保護作用?！娟P(guān)鍵詞】褪黑素脊髓損傷細胞凋亡EffectsofMelatoninonRatNeuronsApoptosisAfterSpinalCordInjuryAbstract：ObjectiveToobservetheeffectofmelaton

3、in(MT)onratneuralcellapoptosisafterexperimentalspinalcordinjury(SCI)inordertostudytheprotectiveeffectonSCI.MethodsSixtysixTgroup).ShamgrouponlycutvertebralplateodelodifiedAllentechniqueingroupAandB.Theratsg/kg)ingroupBandthedehydratedalcoholofequalvolumein

4、groupAafterSCI.Apoptosisandnervesfunctioneasuredat8h、24h、48h、72hand7dfollogroupepoints(P＜0.05orP＜0.01)，andthefunctionalrecoveryelatonin；spinalcordinjury；apoptosis本實驗旨在觀察褪黑素(melatonin，MT)對大鼠脊髓損傷(spinalcordinjury，SCI)后脊髓組織神經(jīng)細胞凋亡的影響，探討其對脊髓損傷的保護作用，現(xiàn)報道如下。1材料與方法1

5、.1動物分組健康成年T治療組(B組)各30只。A、B兩組又按SCI后不同時間點(8、24、48、72h和7d)各分為5個亞組，每個時間點6只。1.2模型制備與處理以10％水合氯醛(400mg/kg體重)腹腔注射麻醉。嚴格無菌操作下取正中切口，切除T8～10椎板，暴露硬膜囊并保持其完整。Sham組僅切除椎板暴露硬膜，未損傷脊髓；A、B兩組按照改良Allen法制作中度脊髓損傷模型。B組于SCI后30min內(nèi)腹腔注射MT溶液(100mg/kg體重，購自晶美上海公司，瑞士Alexis公司生產(chǎn))，按照褪黑素說明書要求，

6、用無水乙醇對褪黑素進行稀釋；A組于同一時間內(nèi)給予等量無水乙醇。術(shù)后常規(guī)青霉素40萬U肌肉注射，1次/d；人工排尿，2次/d。1.3檢測指標及方法A和B組分別于術(shù)后8、24、48、72h和7d隨機各取6只，用4％水合氯醛麻醉，從原切口暴露脊髓，以損傷處為中心迅速取出傷段脊髓組織約25mm，將標本用冰生理鹽水洗凈表面血跡，濾紙吸干水分后制備成勻漿，測定凋亡細胞數(shù)。Sham組6只全部于傷后48h取髓。細胞凋亡用AnnexinVPI雙標記流式細胞儀檢測，分別于488nm激發(fā)波長和560nm波長以EPICSELite

7、流式細胞儀檢測AnnexinV和PI標記的細胞，以不含AnnexinV和PI的孵育緩沖液的脊髓細胞作陰性對照，計算凋亡細胞百分率。1.5統(tǒng)計學分析實驗數(shù)據(jù)用±s表示，用SPSS11.0軟件包處理數(shù)據(jù)，采用方差分析進行組間差異分析。2結(jié)果2.1細胞凋亡檢測結(jié)果細胞凋亡流式細胞儀檢測結(jié)果見表1。Sham組未見凋亡細胞；A組凋亡細胞百分率傷后24h開始升高，48h達高峰，72h開始下降；B組凋亡細胞百分率傷后24h、48h及72h與A組相比明顯減少，差異具有顯著性(P＜0.05或P＜0.01)。2.2脊髓功能恢復比

8、較Sham組的脊髓神經(jīng)功能穩(wěn)定，其斜板試驗角度和BBB評分在SCI后24h分別達到60°和20分左右，表現(xiàn)基本正常。和A組相比，MT治療組神經(jīng)功能恢復均有不同程度提高。其中，MT治療組斜板試驗可以觀察到運動功能總的提高，至第3天和第7天，運動功能提高，差異具有顯著性(P＜0.05或P＜0.01)，見表2。同時MT治療組BBB評分也有不同程度的提高，至SCI后3、7d，兩組之間差異具有顯著性(P＜0.