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《膳食補(bǔ)充亮氨酸對正常大鼠和高脂膳食喂養(yǎng)大鼠胰島素敏感性的影響及其相關(guān)機(jī)制的研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文方法:通過高脂膳食喂養(yǎng)建立胰島素抵抗大鼠模型,正常飼料喂養(yǎng)大鼠和高脂飼料(脂肪供能比達(dá)到53.8%)喂養(yǎng)大鼠分別飼以添加了0,1.5%,3.0%和4.5%亮氨酸飼料進(jìn)行膳食干預(yù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前一周,進(jìn)行葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)、胰島素耐量實(shí)驗(yàn)。25周后處死,測定血脂、血糖、血胰島素,計(jì)算HOMA指數(shù)。高效液相色譜法檢測大鼠血清亮氨酸水平。ELISA法檢測血中相關(guān)激素和脂肪細(xì)胞因子:胰高血糖素、瘦素、脂聯(lián)素。酶法測定肝臟和骨骼肌TG水平以及GSH/GSSG。Realtime-PCR法檢測組織(肝臟、骨骼肌)中SODmRNA。Westernblotting檢測肝臟mT
2、OR及磷酸化mTOR表達(dá)水平。結(jié)果:1.動物的代謝改變:(1)高脂飼料喂養(yǎng)大鼠的進(jìn)食量明顯低于基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)組(P<0.05)。亮氨酸有降低正常大鼠進(jìn)食量的趨勢,而對高脂大鼠,亮氨酸有增加其進(jìn)食量的趨勢。(2)能量攝入結(jié)果表明,高脂組大鼠僅在實(shí)驗(yàn)前兩周的能量攝入明顯高于正常組大鼠。亮氨酸補(bǔ)充對大鼠能量攝入無明顯影響。(3)大鼠體重變化趨勢表明,從第6周開始,HFD組和HFD+1.5%leu組的體重開始升高;第7周時(shí),HFD組大鼠體重已顯著高于ND組(P<0.05);11周以后,HFD+1.5%leu、HFD+3.0%leu、HFD+4.5%leu組大鼠體重顯著高于HFD組大鼠
3、(P<0.05)。表明亮氨酸補(bǔ)充可顯著增加高脂大鼠體重,對正常大鼠無明顯影響。(4)HFD組腎周脂肪占體重的比值顯著性升高(P<0.05)。1.5%和3.0%亮氨酸補(bǔ)充進(jìn)一步增加高脂大鼠腎周脂肪占體重的比值。表明亮氨酸可促進(jìn)高脂大鼠脂肪組織的脂肪聚集。(5)HFD組的總膽固醇水平明顯高于ND組,除了HFD+1.5%leu組甘油三酯水平明顯高于HFD組外,亮氨酸對正常大鼠和高脂大鼠血脂水平無明顯影響。大鼠血清中的胰高血糖素、瘦素、脂聯(lián)素各組也沒有顯著性差異。2.胰島素敏感性的改變:(1)各組大鼠的空腹血糖水平無顯著性差異。HFD組血胰島素水平顯著高2華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文于
4、ND組(P<0.05)。各高脂飼料亮氨酸干預(yù)組的血胰島素水平均明顯低于HFD組(P<0.05)。HFD組的HOMA-IR指數(shù)均顯著高于正常對照組(P<0.05)。HFD加亮氨酸干預(yù)組的HOMA-IR指數(shù)均明顯低于HFD組,(2)胰島素耐量試驗(yàn)血糖曲線下面積(areasunderthecurves)結(jié)果表明,HFD組胰島素耐量實(shí)驗(yàn)曲線下面積(AUC)明顯高于ND組(P<0.05)。HFD加亮氨酸干預(yù)組的曲線下面積均比HFD組低,有顯著性差異,P<0.05。葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)果表明,各HFD加亮氨酸干預(yù)組與HFD組之間血糖值以各組血糖曲線下面積(AUC)均無顯著性差異(P>0.0
5、5)。3.氧化應(yīng)激水平的改變(1)大鼠肝臟和骨骼肌GSH/GSSG比值結(jié)果表明,僅ND+1.5%leu組的GSH/GSSG明顯高于ND組,亮氨酸補(bǔ)充對肝臟GSH/GSSG比值無明顯影響。(2)高脂大鼠肝臟和骨骼肌的TG含量顯著增加(P<0.05),但是亮氨酸補(bǔ)充對正常大鼠和高脂大鼠的肝臟和骨骼肌的TG含量無明顯影響。(3)HFD組肝臟MnSODmRNA的表達(dá)水平明顯較ND組升高(P<0.01),HFD+1.5%組MnSODmRNA的表達(dá)水平明顯降低(P<0.05),表明亮氨酸補(bǔ)充可減輕肝臟的氧化應(yīng)激。各組大鼠肌肉中MnSODmRNA的表達(dá)水平無明顯變化。4.肝臟mTOR及磷
6、酸化mTOR蛋白表達(dá)水平經(jīng)胰島素刺激,亮氨酸可顯著增強(qiáng)HFD大鼠pSer2448mTOR的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.膳食補(bǔ)充亮氨酸可顯著增加高脂喂養(yǎng)胰島素抵抗大鼠的胰島素敏感性,對正常大鼠胰島素敏感性無明顯影響。2.亮氨酸改善可能通過改善肝臟的氧化應(yīng)激以及調(diào)控胰島素信號通路,如激活mTOR途徑改善胰島素抵抗。3.亮氨酸干預(yù)改善胰島素抵抗的作用不是通過降低進(jìn)食量及體重,也不是通過改善機(jī)體脂質(zhì)的異位沉積來實(shí)現(xiàn)的。3華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)鍵詞:胰島素敏感性;亮氨酸;氧化應(yīng)激;高脂飼料;大鼠創(chuàng)新點(diǎn):本課題在建立高脂膳食誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠模型的基礎(chǔ)上,通過膳食補(bǔ)充不同劑
7、量的亮氨酸,闡明亮氨酸對正常大鼠和胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性的不同影響及其相關(guān)機(jī)制,為亮氨酸防治代謝性疾病提供新的科學(xué)依據(jù);突破傳統(tǒng)的以能量、脂肪以及碳水化合物為主的膳食干預(yù)模式,成為膳食防治胰島素抵抗的極有潛力的新亮點(diǎn)。4華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文Theeffectsofchronicdietaryleucinesupplementationontheinsulinsensitivityinratsonnormaldietorhigh-fatdietPostgraduateCandidate:XiangLiSupe