細(xì)菌的培養(yǎng)與接種技術(shù)

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1、細(xì)菌的分離培養(yǎng)與接種技術(shù)濰坊職業(yè)學(xué)院生物技術(shù)2014細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)的場所，標(biāo)本的接種、培養(yǎng)、分離、鑒定、藥敏等工作在此完成。細(xì)菌室要防止外界污染，還要避免細(xì)菌播散。配備紫外燈、消毒劑等。注意定期消毒。對無菌物品和標(biāo)本應(yīng)明顯分開放于指定位置，同時要對用過的物品及時進(jìn)行滅菌處理。保證細(xì)菌室的溫度。無菌實(shí)驗(yàn)室是細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用于無菌操作的小室，要求更嚴(yán)格。完全封閉，應(yīng)有緩沖區(qū)。用前要用紫外燈消毒30min,定期用甲醛熏蒸消毒。僅限于分裝培養(yǎng)基及傳染性強(qiáng)的細(xì)菌接種。要保證本室的無菌狀態(tài)。保證本室的溫度。無菌實(shí)驗(yàn)室可用超凈工作臺代替。培養(yǎng)基常用玻璃器材的準(zhǔn)備

2、培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的成分和作用培養(yǎng)基：是指人工配制的適合細(xì)菌生長繁殖的綜合營養(yǎng)基質(zhì)。(1)營養(yǎng)物質(zhì)：蛋白胨(氮源)、肉浸液（氮源和碳源）、牛肉膏、糖醇類、血液、雞蛋和動物血清、生長因子、無機(jī)鹽類(2)水(3)凝固劑：瓊脂、明膠(4)抑制劑：非生長必需，而是選擇、鑒定及判斷結(jié)果的需要(5)指示劑：便于觀察細(xì)菌培養(yǎng)基的種類（按用途分類）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：培養(yǎng)營養(yǎng)要求不高的細(xì)菌，如普通平板營養(yǎng)培養(yǎng)基：能滿足營養(yǎng)需求較高細(xì)菌的生長，如血平板鑒別培養(yǎng)基：含有某些特定的底物，用于鑒別細(xì)菌，如克氏雙糖培養(yǎng)基（KIA）選擇培養(yǎng)基：具有選擇性抑制作用

3、，用于選擇性的培養(yǎng)目的菌，如SS平板增菌培養(yǎng)基：促進(jìn)目的菌的生長，適用于含菌量較少的標(biāo)本，如葡萄糖肉湯。厭氧培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)厭氧菌培養(yǎng)基的種類（按物理性狀分類）液體培養(yǎng)基：不含凝固劑，用于增菌和接種純種細(xì)菌。半固體培養(yǎng)基：含0.3％～0.5％瓊脂，用于觀察細(xì)菌的動力。固體培養(yǎng)基：含2％～2.5％瓊脂，多用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)。培養(yǎng)基的制備玻璃器皿的消毒滅菌制備的程序調(diào)配溶化矯正pH過濾澄清分裝滅菌鑒定保存細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境細(xì)菌接種法平板劃線接種法：★目的：使混合

4、的細(xì)菌呈單個分散生長，形成單個菌落，以便獲得純菌?！锓椒ǎ悍謪^(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本液體培養(yǎng)基接種法穿刺接種法:用于觀察細(xì)菌動力斜面接種法傾注培養(yǎng)法:用于細(xì)菌計數(shù)分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)連續(xù)劃線法細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：35℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時間：18～24h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落★定義：指單個細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一

5、肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)?！锞涮卣鳎捍笮　⑿螤?、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。菌落菌落與菌苔