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《細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的實(shí)驗(yàn)研究方法——顯微鏡觀察法》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的實(shí)驗(yàn)研究方法——顯微鏡觀察法四川省綿陽(yáng)第一中學(xué) 馮永康 在高中生物學(xué)的教學(xué)中，通過(guò)切實(shí)可行的實(shí)驗(yàn)研究方法，深入認(rèn)識(shí)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，是十分必要的。這主要包括使用顯微鏡觀察和分級(jí)離心等技術(shù)的運(yùn)用?！ ∫弧⒓?xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察——顯微鏡觀察法顯微鏡是中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的最常用的儀器。熟練地使用高倍顯微鏡觀察不同細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，是高中生物課程標(biāo)準(zhǔn)要求的重要的實(shí)驗(yàn)操作技能?！ ?顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用原則 1.1顯微鏡結(jié)構(gòu)和功能的熟悉目鏡長(zhǎng)度與放大倍數(shù)成“反比”，即目鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越??；目鏡
2、越短，放大倍數(shù)越大。物鏡長(zhǎng)度與放大倍數(shù)成“正比”，即鏡頭越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大。焦距調(diào)好后，鏡頭與蓋玻片的距離越遠(yuǎn)，物鏡越短，放大倍數(shù)越?。环粗?，放大倍數(shù)越大。顯微鏡的放大倍數(shù)為目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。顯微鏡下視野（是指在顯微鏡下一次所能觀察到的被檢玻片標(biāo)本的范圍）中所看到的物象為真實(shí)物象的倒立放大的虛象。由于低倍物鏡的通光量比高倍物鏡的通光量大，所以低倍鏡下的視野較明亮；而高倍物鏡下，雖然放大倍數(shù)大，實(shí)際觀察到的標(biāo)本區(qū)域小，視野較暗例1使用顯微鏡時(shí)，所選用的物鏡倍數(shù)愈大，則下列哪一項(xiàng)敘述不正
3、確？（C）A．物鏡前端愈接近玻片標(biāo)本B．物鏡前端的透鏡片直徑愈小C．物鏡的鏡筒長(zhǎng)度愈短D．物鏡下視野的亮度愈小 1.2顯微鏡的使用程序和原則： 1.2.1操作的基本程序：取鏡——安放——對(duì)光——制片——觀察 1.2.2把握好幾個(gè)原則：①用眼原則：左眼注視目鏡，右眼睜開(kāi)。這樣，一可減輕左眼疲勞，二可方便繪圖。②物鏡選用原則：先低倍后高倍，由低倍到高倍?？梢杂玫捅段镧R觀察清楚的就勿需使用高倍物鏡。③準(zhǔn)焦螺旋使用原則：先粗后細(xì)，由粗到細(xì)。 1.2.3顯微鏡下視野出現(xiàn)異物幾種情況的判斷：如移動(dòng)裝片異
4、物不動(dòng)，說(shuō)明不在裝片上；轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換上高倍鏡，仍可觀察到，說(shuō)明不在物鏡上；由此，可判斷異物在目鏡上?！ ?活細(xì)胞觀察法在高中生物課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書(shū)中，根據(jù)對(duì)生物實(shí)驗(yàn)材料觀察的要求，可以分為活細(xì)胞觀察法和固定觀察法。 2.1用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體 2.1.1實(shí)驗(yàn)材料的選擇：觀察葉綠體時(shí)，宜選用葉綠體大、數(shù)目少的材料。如陰生植物蘚類的葉、菠菜葉的下表皮（稍帶葉肉）等。由于在不同的光照下，葉綠體可以運(yùn)動(dòng)并改變?cè)诩?xì)胞中的分布位置。所以，在不同光照下采集的材料，其葉內(nèi)葉綠體的形態(tài)有所不同。觀察線
5、粒體時(shí)，一定要用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕刮取，避免破血，以影響涂片和觀察效果?！ ?.1.2臨時(shí)裝片的制作基本程序：凈片→滴液→取材→平展→蓋片應(yīng)該注意的問(wèn)題：將選取的觀察材料要放在滴有清水（或健那綠染液）的載玻片上，以使細(xì)胞仍然保持在生活狀態(tài)，便于觀察?！ ?.2探究植物細(xì)胞的吸水和失水——植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原 2.2.1實(shí)驗(yàn)操作的簡(jiǎn)要程序 2.2.2實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵：①選擇生活的、成熟的（具有大液泡）、有顏色的（如紫色洋蔥）植物細(xì)胞。②所選蔗糖溶液的濃度要適宜（質(zhì)量濃度為0
6、.3g/mL）。例2觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原時(shí)，如選用蔗糖的質(zhì)量濃度為0.5g／mL的溶液時(shí)，可觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象很明顯，但不能復(fù)原，檢查操作步驟都正確。分析造成此實(shí)驗(yàn)失敗的原因是。（參考答案：細(xì)胞因過(guò)度失水而死亡，故不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。）例3用高倍顯微鏡觀察已制作好的原生質(zhì)體的臨時(shí)裝片（原生質(zhì)體處于質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液中）時(shí)，應(yīng)主要觀察記錄什么？（參考答案：觀察測(cè)量原生質(zhì)體的體積大小變化。） 2.2.3植物細(xì)胞質(zhì)壁分離后復(fù)原的類型——誘發(fā)復(fù)原與自動(dòng)復(fù)原在植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)
7、原實(shí)驗(yàn)中，一般選用的外界溶液是質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液。用蔗糖溶液處理活的植物細(xì)胞后，蔗糖溶液的濃度大于植物細(xì)胞液的濃度時(shí)，植物細(xì)胞通過(guò)滲透作用失水而發(fā)生質(zhì)壁分離。要使發(fā)生了質(zhì)壁分離的植物細(xì)胞恢復(fù)原狀，必須用清水處理，使外界溶液的濃度低于植物細(xì)胞液的濃度，才可發(fā)生植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離復(fù)原，這種復(fù)原稱為誘發(fā)復(fù)原。（因蔗糖分子是不能通過(guò)選擇透過(guò)性的膜的。）如果在植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)中，選擇的外界溶液是具一定濃度的硝酸鉀溶液、尿素溶液（或甘油溶液、乙二醇溶液）等，當(dāng)外界溶液的濃度大于植物細(xì)
8、胞液的濃度時(shí)，植物細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離后，可不再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理來(lái)降低外界溶液的濃度，隨即也可觀察到植物細(xì)胞出現(xiàn)分離復(fù)原的現(xiàn)象，這種復(fù)原稱為自動(dòng)復(fù)原。植物細(xì)胞質(zhì)壁分離后自動(dòng)復(fù)原的原因是：用硝酸鉀溶液處理植物細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離后，當(dāng)水分子通過(guò)滲透作用自由進(jìn)出細(xì)胞時(shí)，硝酸根離子和鉀離子（植物細(xì)胞生活所必需的礦質(zhì)離子）可經(jīng)主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞液，細(xì)胞液的濃度不斷增大，水分滲入的速率增大，由此出現(xiàn)自動(dòng)復(fù)原。用尿素溶液等處理植物細(xì)胞，是因?yàn)檫@些物質(zhì)分子也可自由進(jìn)入細(xì)胞。但這些外界溶液的濃度如
