牙本質(zhì)中可溶性磷蛋白對(duì)抑制脫礦牙本質(zhì)再礦化的作用

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1、牙本質(zhì)中可溶性磷蛋白對(duì)抑制脫礦牙本質(zhì)再礦化的作用-->牙本質(zhì)中可溶性磷蛋白對(duì)抑制脫礦牙本質(zhì)再礦化的作用【摘要】　目的研究去除牙本質(zhì)中可溶性磷蛋白后對(duì)進(jìn)一步再礦化的影響,代寫(xiě)醫(yī)學(xué)論文了解磷蛋白在牙本質(zhì)礦化中的作用機(jī)制。方法　用EDTA脫礦法去除牙本質(zhì)中的固有可溶性磷蛋白,獲得脫礦的牙本質(zhì)籽晶,進(jìn)行再礦化實(shí)驗(yàn),并與以正常牙本質(zhì)和乙酸脫礦法(可保留可溶性磷蛋白)獲得的牙本質(zhì)再礦化過(guò)程對(duì)照。實(shí)驗(yàn)應(yīng)用等組分晶體生長(zhǎng)體系,記錄再礦化過(guò)程添加液體積隨時(shí)間的增加量,以計(jì)算再礦化速率。結(jié)果　經(jīng)EDTA脫礦0·5h及2h的牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率比正常牙本質(zhì)粉明顯增快,在20

2、0min時(shí)觀察到的速率增加可超過(guò)100%,而脫礦5h和10h以及所有乙酸脫礦牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率均較正常未脫礦籽晶慢。結(jié)論　牙本質(zhì)固有的可溶性磷蛋白具有抑制脫礦牙本質(zhì)再礦化的作用?！娟P(guān)鍵詞】　磷蛋白類;　牙再礦化;　晶體研究已經(jīng)證明牙本質(zhì)磷蛋白(dentinphosphateprotein,DPP)是牙本質(zhì)形成過(guò)程中的調(diào)節(jié)蛋白,但對(duì)其作用機(jī)制尚不明了。有研究表明,在牙本質(zhì)脫礦過(guò)程中,有可溶性DPP的釋放[1],而去除可溶性DPP有可能促進(jìn)脫礦牙本質(zhì)再礦化[2]。由于特殊的分子結(jié)構(gòu)和高磷含量,DPP極有可能通過(guò)抑制晶體的表面反應(yīng)性,發(fā)揮調(diào)節(jié)晶體生長(zhǎng)方向和

3、生長(zhǎng)時(shí)機(jī)的作用。我們根據(jù)以往學(xué)者的經(jīng)驗(yàn)[2],以EDTA法去除牙本質(zhì)中的固有可溶性磷蛋白,利用等組分晶體生長(zhǎng)體系觀察其對(duì)于再礦化過(guò)程的作用,以期了解可溶性磷蛋白的可能作用機(jī)制。資料和方法1·實(shí)驗(yàn)材料:(1)正常牙本質(zhì)籽晶:取自人牙根部牙本質(zhì),經(jīng)粉碎、過(guò)濾、干燥、恒重,測(cè)定粉末的比表面積。(2)脫礦牙本質(zhì)籽晶(去除可溶性磷蛋白):根據(jù)Clarkson等[2]1991年的研究,采用0·5mol/LEDTA脫礦可以去除牙本質(zhì)中的可溶性磷蛋白。正常牙本質(zhì)粉分別經(jīng)0·5mol/LEDTA脫礦0·5、2、5、10h,然后經(jīng)洗滌、過(guò)濾、干燥、恒重、測(cè)定比表面積。(3)

4、脫礦牙本質(zhì)籽晶:正常牙本質(zhì)粉分別經(jīng)0·1mol/L乙酸脫礦0·5、2、5、10h,然后經(jīng)洗滌、過(guò)濾、干燥、恒重、測(cè)定比表面積。2·實(shí)驗(yàn)設(shè)備:等組分晶體生長(zhǎng)體系。具體實(shí)驗(yàn)方法及原理參見(jiàn)文獻(xiàn)[3]、[4]。3·再礦化實(shí)驗(yàn)的條件:溫度(T)=(37·0±0·5)℃;pH=7·00±0·03;再礦化工作液中Ca2+=1·5mmol/L,PO3-4=0·9mmol/L:離子強(qiáng)度(IS)=0·15mol/L;飽和度(δ)=5·23。添加液A含Ca2+,B含PO3-4和OH。4·觀察方法:E625型動(dòng)力學(xué)反應(yīng)自動(dòng)記錄儀自動(dòng)記錄反應(yīng)過(guò)程中添加液體積的變化,分別繪制添加液

5、體積及反應(yīng)速率隨時(shí)間變化的曲線。結(jié)果一、EDTA脫礦牙本質(zhì)籽晶與正常牙本質(zhì)籽晶再礦化過(guò)程的比較圖1為EDTA脫礦牙本質(zhì)籽晶再礦化速率動(dòng)力學(xué)曲線?？梢?jiàn)EDTA脫礦0·5及2h的牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率比未脫礦的正常牙本質(zhì)粉明顯增快,在200min時(shí)增加的幅度達(dá)100%以上,而EDTA脫礦5和10h的牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率則明顯小于正常未脫礦的牙本質(zhì)籽晶。二、乙酸脫礦牙本質(zhì)籽晶與正常牙本質(zhì)籽晶再礦化過(guò)程的比較圖2為乙酸脫礦牙本質(zhì)籽晶再礦化動(dòng)力學(xué)曲線圖。可見(jiàn)乙酸脫礦不同時(shí)間牙本質(zhì)籽晶再礦化速率均比正常未脫礦牙本質(zhì)籽晶小,且隨脫礦時(shí)間增加而更小。對(duì)乙酸脫礦10h的

6、籽晶,觀察了大約41h,未見(jiàn)明顯的再礦化生長(zhǎng)過(guò)程。討論根據(jù)以往的經(jīng)驗(yàn),使用EDTA脫礦可以去除牙本質(zhì)中的可溶性DPP,而使用乙酸脫礦則不會(huì)溶解任何形式的DPP[2]。利用兩種不同脫礦方法制備的籽晶進(jìn)行再礦化速率研究,其差異可能為可溶性磷蛋白的存在所致。本研究表明,經(jīng)EDTA脫礦乙酸脫礦時(shí)間對(duì)牙本質(zhì)籽晶再礦化的作用0·5h和2h的牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率比正常未脫礦牙本質(zhì)粉快,而乙酸脫礦牙本質(zhì)籽晶的再礦化速率小于正常未脫礦牙本質(zhì)粉。這提示了牙本質(zhì)中可溶性磷蛋白具有抑制晶體再礦化的作用。這種作用可能來(lái)自于DPP與HAP晶體表面結(jié)合后,其二級(jí)結(jié)構(gòu)變?yōu)棣缕瑢訕咏Y(jié)構(gòu)

7、,這種結(jié)構(gòu)可以部分覆蓋分子表面,使晶體生長(zhǎng)受到抑制[5]。因此將其去除可以起到促進(jìn)脫礦再礦化的作用。Clarkson等[6]1998年在根面齲的研究中觀察到類似現(xiàn)象。本研究還發(fā)現(xiàn),過(guò)長(zhǎng)的脫礦時(shí)間也會(huì)使再礦化過(guò)程受到抑制。釉質(zhì)和牙本質(zhì)脫礦過(guò)程中,礦物損失值與脫礦時(shí)間呈正相相關(guān)關(guān)系[7]。研究已經(jīng)證明,牙本質(zhì)的再礦化是由殘余晶體生長(zhǎng)引發(fā)的[8,9],殘余晶體的量決定著再礦化的整體速率[10]。本研究對(duì)DPP再礦化中作用的探討,旨在為利用磷蛋白作為礦物促進(jìn)劑(蓋髓劑)的應(yīng)用提供借鑒。近年來(lái)國(guó)際上對(duì)DPP在牙本質(zhì)礦化中的生物學(xué)作用的研究取得了重要進(jìn)展,基本點(diǎn)包括

8、4個(gè)方面:①礦化早期,磷蛋白有誘導(dǎo)成核的作用,但其濃度需求非常低,時(shí)間非常短;②