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1、田基黃對內毒素血癥引起的肝損傷的防治作用鄭竹美1葉青1邵文霞2陳學軍1（通訊作者）潘巖享1（1浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院檢驗科浙江杭州310003;2杭州市第一人民醫(yī)院檢驗科310006）【摘要】目的探討田基黃對內毒素血癥引起的肝損傷的防治作用。方法對Wister大鼠用不同劑量的田基黃水煎劑和聯(lián)苯雙酯進行灌胃，1次/d,連續(xù)7d。于最后一次給藥1小時后，尾靜脈注射內毒素（LPS）5mg/kg。1次/d,連續(xù)7d。于最后一次給藥1小時后，空白組尾靜脈注射生理鹽水，余各組尾靜脈注射LPS5mg/kg。最后用藥24小時后取材觀察肝組織病理學變化和生化指標變化。結果㈩基黃能
2、減輕LPS引起肝組織病理損傷并能明顯抑制LPS引起的小鼠血清ALT活性的升高，抑制NO,TNF-α和IL-6的過量分泌。結論田基黃對內毒素引起的肝損傷有顯著的防治作用?！娟P鍵詞】田基黃內毒素肝損傷【中圖分類號】R965【文獻標識碼】A【文章編號】2095-1752（2013）09-0038-02H基黃原名地耳草，系藤黃科金絲桃屬楨物地耳草的干燥全草，含有黃酮類、內酯類、色原烯類、縮二氨酸衍生物、咕噸酮類、間環(huán)己三醇衍生物等化合物，具有抑菌、抗病毒、抑制癌細胞、增強免疫、抗氧化、保肝護肝等多種藥理學功效，但其對內毒素性肝損傷的保護和治療機制尚未闡明。木課題
3、采用大鼠尾靜脈注射內毒素誘導建立起急性肝損傷的大鼠模型，運用免疫學和病理學技術研究和監(jiān)測大鼠模型中血清丙氨酸氨基轉移酶（ALT）的水平，肝組織內抗炎癥介質的和致炎癥介質的釋放，探討W基黃在內毒素引起的肝損傷的防治方面的價值。1材料1.1動物Wistar大鼠，SPF級，質量200±20g120只，雌雄各半，由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供。1.2藥物田基黃用冷水浸泡，煎煮2次，過濾，合并濾液，濃縮成含藥2g/ml的水煎液，用前配成0.5、1.0、2.0g/ml溶液；將聯(lián)苯雙酯（BPD）滴丸配制成20mg/ml的溶液。1.3試劑田基黃購自杭州胡慶余堂國藥號
4、，并經鑒定為藤黃科植物田基黃的全草；生理鹽水注射液,杭州民生藥業(yè)集閉冇限公司產品，批號110103A07；AST,ALT,NO測試藥盒，南京建成生物工程研究所產品；TNF-α、IL-6試劑盒，解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所產品。1.4儀器LXP2B低速大容量離心機、DDL-5低速冷凍離心機，上海安亭科學儀器廠產品；HH.W21>600電熱恒溫水浴箱，上海醫(yī)療器械廠產品；AB204-N電子天平，梅特勒公司產品；BT224半自動生化分析儀，意大利儀器；FJ-2008PSg放射免疫計數(shù)器，西安核儀器廠產品；BH-2系統(tǒng)顯微鏡，OLYMPUS公司產品。2方
5、法2.1建模［1］田基黃用冷水浸泡，煎煮2次，過濾，合并濾液，濃縮成含藥2g/ml的水煎液，用前配成0.5、1.0、2.0g/ml溶液，各以低、中、高劑量標之；將聯(lián)苯雙酯（BPD）滴丸配制成20mg/ml的溶液分別給LPS+田基黃各組和西藥對照組灌胃，1次/d,連續(xù)7d。于最后一次給藥1小時后，空ft組尾靜脈注射生理鹽水，余各組尾靜脈注射LPS5mg/kg。2.2動物分組和給藥選擇健康大鼠，質量200±20g120只，隨機分成6組，每組20只，雌雄各半：內毒素血癥（LPS）組、生理鹽水對照組、LPS+低劑量田基黃組、LPS+中劑量田基黃組、LPS+高劑
6、量田基黃組和西藥對照組。2.3檢測指標與方法：最后用藥24后，用2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，經下腔靜脈采血；剖開腹腔，暴露肝臟，剪取小塊右葉中央部位肝臟組織，約0.5cmx0.5cmx0.5cm，迅速投入10%福爾馬林溶液中固定。獲得的樣本分別進行如下的觀察：①各指標分別按相關的試劑盒操作說明書進行。②常規(guī)切片，HE染色，光鏡下作組織病理學檢查。2.4統(tǒng)計學方法實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗。3結果3.1各組大鼠一般情況正常對照組大鼠處死前全部存活，精神飲食、活動均正常。LPS組大鼠處死前大鼠出現(xiàn)精神萎靡，進
7、食減少和反應遲鈍。聯(lián)苯雙酯組和田基黃組人鼠一般狀態(tài)較好，人便偏稀，未出現(xiàn)死亡及中毒性鼓腸發(fā)生。3.2血清肝功能的變化與正常對照組相比，LPS模型組小鼠血清轉氨酶明顯升高(P<0.05);聯(lián)苯雙酯組和田基黃組可顯著降低LPS肝損傷小鼠血中ALT水平(P<0.05);低中劑量田基黃組與聯(lián)苯雙酯對照組結果相似(P>0.05),高劑量田基黃組療效最好。見表1。3.3肝組織病理學檢查各組小鼠于肝大葉相同部位取材，10%福爾馬林溶液固定，石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡下觀察。正常對照組大鼠肝細胞排列整齊，肝竇結構清楚；LPS模型組以脂肪變性為主，可見肝細胞
