低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)

低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)

ID:22405874

大?。?4.00 KB

頁數(shù):5頁

時(shí)間:2018-10-29

低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)_第1頁
低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)_第2頁
低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)_第3頁
低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)_第4頁
低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)_第5頁
資源描述:

《低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫

1、低氧誘導(dǎo)因子1α在大鼠腦缺血耐受中的表達(dá)【關(guān)鍵詞】低氧誘導(dǎo)因子1缺血預(yù)處理缺血低氧腦大鼠[ABSTRACT]ObjectiveToinvestigatetheexpressionofhypoxiainduciblefactor1α(HIF1α)inthebrainischemicmodelofrats.MethodsHealthyCAO)group(SS+MCAO,n=40)andtheischemicpreconditioningandMCAOgroup(IP+MCAO,n=40).Aratmod

2、eloffocalischemicpreconditioningiddlecerebralartery.Atday1,3,7,4,and21afterthepreconditioning,anothertiaentalanimal.Thepathologyesofinfarctareaeasured,andtheexpressionoftheHIF1αdetectedviaimmunohistochemicaltechnique.ResultsThelevelsofHIF1αexpressionin

3、ratsofIP+MCAOgroupatday1,3,and7afterthepreconditioningaybeoneofthemolecularmechanismsinthebrainischemictolerance.[KEYCAO組,40只):預(yù)缺血10min后按再灌注不同時(shí)間(1、3、7、14、21d)分為5個(gè)亞組;假手術(shù)組(SS+MCAO組,40只):分按前述時(shí)間點(diǎn)5個(gè)亞組;對(duì)照組(SS+SS組,4只)。1.2模型的制備缺血預(yù)處理參照文獻(xiàn)[2,3]方法進(jìn)行。再缺血的處理按再灌注的不同時(shí)間在

4、規(guī)定時(shí)間點(diǎn)再次麻醉大鼠,將埋在皮下的線栓推進(jìn)(18.5±2.0)mm,再次阻斷大腦中動(dòng)脈造成MCAO,重新結(jié)扎ECA近心端,縫合皮膚,2h后將留在皮外的線栓退出至ECA,形成第2次再灌注,完成再缺血處理。1.3實(shí)驗(yàn)方法IP+MCAO組預(yù)缺血10min后,分別于再灌注1、3、7、14、21d后阻塞大腦中動(dòng)脈2h,再灌注22h后處死;SS+MCAO組假手術(shù)代替預(yù)缺血,在假手術(shù)后按前述不同時(shí)間點(diǎn)阻塞大腦中動(dòng)脈2h,再灌注22h后處死;SS+SS組兩次均為假手術(shù)。1.4神經(jīng)功能缺損評(píng)分參照BEDERSON等[4

5、]5分制法進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分累積1分以上認(rèn)定為造模成功。1.5腦組織病理觀察每組隨機(jī)選取4只大鼠,心臟灌注生理鹽水、40g/L多聚甲醛各約200mL,斷頭取腦,取前囟后3~6mm部位組織,40g/L多聚甲醛后固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、切片,片厚5μm。HE染色后鏡下觀察組織病理學(xué)變化。1.6HIF1α蛋白檢測(cè)采用SABC法。SABC試劑盒、兔抗鼠HIF1α單克隆抗體(一抗)購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。大鼠水合氯醛麻醉后,心臟依次灌注生理鹽水、40g/L多聚甲醛各約200mL,斷頭取腦,取前囟后3

6、~6mm部位組織,多聚甲醛后固定4h,脫水、透明、浸蠟、包埋、切片,片厚5μm。每只動(dòng)物取3張切片,常規(guī)脫蠟至水。體積分?jǐn)?shù)0.03的H2O2滅活內(nèi)源性酶,抗原熱修復(fù),滴加1∶200工作濃度的HIF1α單克隆抗體。4℃過夜后,依次滴加生物素化二抗、試劑SABC,37℃各孵育30min,DAB顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。梯度乙醇脫水,二甲苯透明,封片。參照文獻(xiàn)[5]的方法進(jìn)行觀察。1.7圖像分析采用SimplePCI顯微圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析,測(cè)量免疫組化染色的平均吸光度(A)值。1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPS

7、S11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,檢測(cè)結(jié)果以±s表示。各組同一時(shí)間點(diǎn)之間比較采用t檢驗(yàn),組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)比較采用方差分析。2結(jié)果2.1神經(jīng)功能缺損評(píng)分SS+SS組神經(jīng)功能評(píng)分為0。IP+MCAO組3、7d神經(jīng)功能評(píng)分均低于SS+MCAO組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.025、2.683,P<0.05)。SS+MCAO組中各時(shí)間點(diǎn)間比較差異無顯著性;IP+MCAO組中3d與其他時(shí)間比較,差異具有顯著性(F=3.55,P<0.05)。見表1。表1各組動(dòng)物不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺損評(píng)分比較2.2病理學(xué)觀察2.2.1大

8、體改變?nèi)毖獋?cè)大腦表面呈不同程度的飽滿、蒼白等腦水腫征象。2.2.2光鏡觀察SS+SS組神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量及形態(tài)分布正常。SS+MCAO組與IP+MCAO組海馬區(qū)均表現(xiàn)不同程度的損傷改變,如細(xì)胞數(shù)減少、形態(tài)腫脹,細(xì)胞排列紊亂。梗死灶中心區(qū)組織明顯稀疏,神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)脫失及變形,胞核固縮、溶解,失去完整結(jié)構(gòu)。梗死灶周邊區(qū)神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞腫脹,甚至胞核固縮、濃染,并可見膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)。IP+MCAO組梗死灶中心區(qū)較SS+MCAO組明顯減小,周圍區(qū)結(jié)構(gòu)

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁,下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁,下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數(shù)學(xué)公式或PPT動(dòng)畫的文件,查看預(yù)覽時(shí)可能會(huì)顯示錯(cuò)亂或異常,文件下載后無此問題,請(qǐng)放心下載。
2. 本文檔由用戶上傳,版權(quán)歸屬用戶,天天文庫負(fù)責(zé)整理代發(fā)布。如果您對(duì)本文檔版權(quán)有爭(zhēng)議請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系客服。
3. 下載前請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔內(nèi)容,確認(rèn)文檔內(nèi)容符合您的需求后進(jìn)行下載,若出現(xiàn)內(nèi)容與標(biāo)題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時(shí)可能由于網(wǎng)絡(luò)波動(dòng)等原因無法下載或下載錯(cuò)誤,付費(fèi)完成后未能成功下載的用戶請(qǐng)聯(lián)系客服處理。